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你可能喜欢西南农业大学 硕士学位论文 茶多糖分离纯化及理化性质的研究 姓名：袁海波 申请学位级别：硕士 专业：茶学 指导教师：童华荣;周才琼
摹多鼙分毒竞敝摹犯藕震琏碡竞摘要麓善荣多藜（Ｔｅａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ）是茶跨孛瓣篷妥豹空魏渗毪成分，其蠢诲多特殊豹燕 理功能．但是它的分离纯化却一直是个亟待解决的问题，而且茶多糖的含量与组成会随 着提取方法和工哉的不ｌ司而有很大的差异。 本论文是滚黧痰雅安茶厂黛产懿瘫砖兔舔瓣，逶过足秘举蘑鬟取王慧靛毙较来选耩 出～种适合工业化大生产的成
本低廉，步骤简单，产量较高的ＴＰＳ提取纯化新流稷。 并嫩过实验确定此流程中一些麓要参数的配比以得到最佳的提取效果。 怒滤法是一秘较是理憨豹誓照伍提取ＴＰＳ懿工艺，茭麓入无本乙醇、去离子承、 提取温度及时间等的最佳比例分别为２倍、ｌ：４、６０＂０和３．５ｈ。利用Ｓｃｒａｇ脱蛋白，加 入ｌ，４体积的氯仿和１１１６体积的芷丁醇，氯仿使蛋白质变性，变性的蛋囱质溶予正丁蹲辛，褥多耱不溶予鸯撬屡。鲻瑶褥蛋自矮酴去。粒是蛋自藤减少豹圈释多糖类氇在减痧，而飘Ｓｅｖａｇ法脱瑕自主要集中在前３次，其所占比例可达９０％以上。另外，氯仿是有邂 物璇，容易造成多糖活性的下降和溶裁的沉积。因此，从成本的低豢和环燠豹清洁考斑， Ｓｅｖａｇ脱蛋自３次较逶宣。 超滤法提取操作条件温和，不会引起多糖的降解，而殷设备简单，操作方便，没有 相的转移。但燕膜的选择和聪力的调试也比较重要。通过试验确定了截留分子爨必 １００００ｄ静超滤袋农０．２ＭＰａ豹舔力下遴行为庭。通过纸层析殿其组分的研究，可以确定ＴＰＳ是由多糖类、蛋白质、灰分、水分殷其宗成分所组成，弱且晕白质禽量较高，猜潮其与多耱黧紧密结合态，：因此所褥劐豹ＴＰ￥霹藐是一种鬣鑫多糖。超滤法提取的ＴＰ￥在沸水中有较好的溶解性，但不潞子高浓度的肖机溶剂中。而且其热稳定性较麓，在高温或过酸和偏碱的情况下，均会使其中的多糖部分水解两造娥损失。利用纸层析和气相色谱分析ＴＰＳ的单糖组成，发现它是由阿拉伯糖、葡萄糖、甘 露糖、半乳糖和半魏糖醛酸组成。纸层板与气楣色谱分析约结果接近，只是由于半乳糖 醛酸羧性大，不菘气诬丽未熊掰峰，其摩尔魄铡秀，Ａ撼：Ｍａｎ：Ｇａｌ：Ｇｌｃ－－－８．２４：３．３８： ２３．８２：２４．５６，它们的平均分予爨为９５０００。。关键词：１—…～一…一－＋＃’’翌竺章墼些脱蛋白越滤。辱？，蓄城蛰ｆ豢，■分毒地化最理也性质曲研竞Ａｂｓｔｒａｃｔ———————————＿＿＿＿＿＿－●————＿＿＿＿＿－＿＿＿—－－＾＿＿＿＿—＿——－●＿＿＿＿＿＿＿＿－—＿＿＊—－＿＿＿＿＿＿●＿＿●＿＿＿＿——＿＿＿＿＿－＿—————＿＿－＿＿————＇——————＿＿——＾一Ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ，Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ，Ｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ Ｔｅａ ＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓＣ＾ｎｄ试ａｔｅ：Ｙｎａｎ 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淀粉是一种贮藏物斌，难潞于水，冲泡时邋常不能被利用，营养价德不大。但在茶时燕工申壹予酶或承热捧震，霹被拳黧转蘧戒霹溶瞧糖类，薅爨离萘蕊滋睬、香气褒浼色有～定意义。，，纾绦素，拳磐缝豢燕蓰藏稳蘩象藏壤錾主要成分，纯学牲麓毖较稳定，在～黢耱荼： 时加工中几乎冤变化。但在茯砖、康砖以及普洱茶等特种茶类加工中，ｌ！ｌ！Ｉ于微生物的大 蘩繁蕊ｒ分滋大量酶类，龟菇纤维素酶，可分瓣纤维素形成可溶性糖类。在普洱荼渥璀 工序中由于微生物的大爨繁殖（原菌落数５０个，克榉，瀣壤中羰赢对可达３６６５０７令，克 样），澈纤维显蒋下降（原料租纤维１８．６５％，溅难完毕仅为１４．０９％），而可溶性糖则显 蔷蜷麓（蘸辩４．６８％，出堆这７．８４％）ｌ外。１．３茶叶中潴性多糖寄一类复台多糖，主要垂葡萄糖、黼控韬耱、采糖、木糖、半乳糖殿鼠李耱簿组成 的聚台艘大于ｌＯ的聚糖，为多凝糖（Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ），麓称多糖。这一类多耱其蠢复杂豢，■分寓地化及理化性质曲研究的多方面的生理功能。在茶叶中也含有一类水溶性多糖，因具有多种生物活性而逐渐被人们所重视，只是 目前对它的研究相对较少。这类水溶性多糖也被称为茶叶活性多糖（Ｔｅａ Ｐｏｌｙｓａｅｃｈａｘｉｄｅ； ＴＰＳ）或是茶叶多糖、茶多糖。 １．３．１茶叶多糖的组成及含量 １．３．１．１茶叶多糖的组成 粗老茶叶富含茶叶多糖。粗茶叶多糖（ＣｒｕｄｅＴｅａＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；ＣＴＰＳ）是多糖、蛋白质、果胶、灰分和其它成分等的混合物。经分离纯化后的精茶叶多糖是一种分子量 约为ｌ×１０４￣５ｘ１０４的水溶性复合多糖，主要成分有：葡萄糖、阿拉伯糖、核糖、半乳糖、 甘露糖、木糖及果糖等。由于多糖是生物活性高分子化合物，其成分会因分离方法而异， 粗提物常是多糖的混合物。可根据不同多糖在不同浓度低级醇中有不同的溶解度的性质 进行各种多糖的进一步分离纯化。清水岑夫（１９８５）报道［４１，茶中降血糖的有效成分为 一种复合多糖，包括葡萄糖、阿拉伯糖和核糖，构成比为１．７：５．７：４．７，分子量约为４ 万，而汪东风报道，茶叶多糖由五种单糖组成，包括阿拉伯糖、木糖、果糖、葡萄糖和 半乳糖，分子量为１０７０００，其组成含量如表１。表１茶叶多糖的组成Ｉ！Ｉ黄桂宪阿从广西绿茶中分离纯化出３种茶叶多糖，即浅***的１１Ｐｓ．１、灰白色的 ＴＰＳ－２和灰色的．ＴＰＳ－３，其总糖含量分别为４８．２８％、５７．７Ｐ／ｏＮ ４０．０２％（硫酸．葸酮法测 定）。１１Ｐｓ?１含Ｌ一岩藻糖、Ｄ－甘露糖、Ｌ．阿拉伯糖及Ｄ．果糖，组成百分比为３．５ｌ：１４．７８： ２０．４６：６１．２５。ＴＰＳ一２含Ｄ一木糖、Ｌ－阿拉伯糖、Ｄ．果糖及Ｄ．葡萄糖，构成比为４．３９：１６．２２： ７９．３９（有一个峰置后，为Ｄ－葡萄糖）。ＴＰｓ一３含Ｌ一鼠李糖及Ｄ．果糖，构成比为１００（Ｄ一 果糖太低，被Ｌ－鼠李糖掩盖）．此外，ＴＰＳ－３还含有锌、锰、硒等多种对人体有益的微量元素（表２）。～— 一— ～— — — — — — — — — —二— — — — — — — — — — — —．— — — —～表２ ＴＰＳ－３中微量元素含量组成嘲Ｚｎ ＣｒＣｕ元素 含量Ｃａ％２．４０ＭｅＦｅＭｇＣｏ’Ｇｅｓｅ９８．９８３．０６６０３２．３０．２５４０．６１３０．１１１０．３１３Ｏ．３６８纂，舞夺毒毙托袅臻托茬莲鹄研宅吏故螓连１．３．１０茶叶多糖舱含爨蘩蘸多耱懿窘量每萘凝菠蘸葵毒漱纛有关。嫒荼豢来漤，***藏黎串蒺磅多瓣雷囊囊于红、绿茶，汰２．６３％左右，约为六级缎茶的３．１倍放穴级绿茶的１．６７倍，主戮原因是粤藏荼瓣豫攀｝挠照、绿茶糕案。一般来说，在簸茶、岛藏萘嚣绿茶三三樊茶砖中浆憨糖量之毙舞ｌ：３：２，费显繇秽荼魏含量送糕予蠢稷萘＋荣磅多蕤熬鑫爨鹭蕤纂耩鼗慧程囊 的增加丽递增（表３）。 袭３鼗缳茶答缎乓韵瞧窘羹《鬃圭Ｓ器％’辑＋１．３．２茶砰多精的提取、分离与纯化 簸早茶盼渗糖瓣提墩努法魄较裁攀，茶静多耱缀成审零会祷类擞等秘囊，潮熊，农１９７０年代，絷簿多饕叉貉黥多壤。１９８６零ｌＧ冀，清零岑夫拜疑爨本熊舞学会上发表鬈涛“获荼辞枣繇取蕤藜瘸驹麓搦为镶探莒尊薄盘耱律麓”蠹孽撮告。清水岑夫系塌冷水、温水 栅沸水三种淤挺方法抽掇漫出物，再对辫茶的冷水澄搬物在碱性祭件下耀***、黻酸己 葭裂下酵装淡攀疑藤器粪、繁多戆等或静，饕零屡爱遴辑，毽蘩聚糖凝蔽拄，溺翔窳瑟有效成分为～挺合多糖。诚雾糖体是出黼蔼糖、瓤授铟撩、核耱缀成，分子量约必４ｘ ｌ扩。谢晓飙瑙｝答将茶叶预疑蠖黼，用温水没撼ｌｄ。乙醇溅淀，沉淀物艇麓用***、爝酾和 曩泰乏酵浚滚，冷冻手爨嚣褥获鑫琶餐状蔫簿雾赣，Ｍｏｒｉ§疹‘３等势燕溪泰、乏醚簿Ｔ 孵作为萃取潮从茶时中制祷出其释血耱殿抗糖藤病辩ｊ的茶叶复合茹糖，其组成｛：ｌ Ｌ．阿 钕伯戆、蕊棱糖襄Ｄ－餐糟耩必基本绪撼。灏毅，誉鬻的挺取羔艺掰褥麓懿茶多耩在缝媛主鬟较大靛麓舅。骥在实滁寤常震缒穷激箍先将茶奸瓣碎，掰熟浓（７０’Ｃ～１００１Ｃ）浸泡３０ｍｉｎ，浸泡 滚减联浓缩麟，再加入３锻体积乙醇沉淀、离心，沉淀物再鼹少爨嫩溶瓣，重熨黪沉淡 一次，嚣淀戆瓣无索己筹、褥鬃、己醚楚簿装漆三莰，粪空甄瀑予潞，霉萘多羲糕秘菇，褥率约为ｌ＋扣１．麟。该糖制品中茶辫耱会霪淹２７＋５２～２９．３２％，茶多戆禽爨兔ｔ１．８“１４．４９％ｔ可溶性蛋融宙擞为１．５０，ｑ，７８％。茶多撼的提取应避凫在戳酸强碱溶液中遽孬，器粼翳楚萘多蕤串耱麓穗鞭裂歉擒象交稳，蘸褥灸去蓑辫甄鎏耪蕹毪。荼雾耱鬟 取也Ｗ用冷水、稀碱、稀酸戚稀盐进行，糟用稀酸提撒，时间宜短，温度不宜越避５０＂Ｃ：善，冀分毒赡靶及镬纯强震硒唾窕用稀碱提取，应在氮气中进行，以防止多糖降解；热水凝提得率高于冷水。 荼多耱豹初步缝往是采弱Ｓｅｖａｇ方法豫去蛋鑫嚣，救法祭｛孛涅窝，落效率不裹，茶 多糖粗制品中游离蛋白质含爨在１０％左右。经Ｓｅｖａｇ法脱鬣白４￣５次飚，用蒸馏水透析 ２４小时，然后缀醇析，真空低温干燥可得到茶多糖。 茶多耱静逡一步缝证有多秘方法：翔ＤＥＡＥ－纾维素柱层褥、凝胶濠板分离、凝菠 电泳法与ＨＰＬＣ法等。茶多糖用少量永溶解詹，再通过Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ．７５柱（２．６ｃｍ×８０ｃｍ）与Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１５０柱（１．５ｃｍ×６０ｃｍ）层析，可进一步纯化。用０．１ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ洗脱，收爨禽耱罄分，醛援爱透辑，囊象低温干燥瑶键萘多耱缝繇转、３２、３３】。 １３．３茶叶多糖的研究方法。。１３．３．１电泳分析醋酸终壤薄膜、ｖｍｏ．０硼簸薤缓洚滚（Ｏ．２ｍｏｌ／Ｌ），魄篷２５０Ｖ，２０ｍｉｎ，挈苯簸蘸染识。黄桂宪等用２ｘ８ｃｍ醋黻纤维薄膜电泳分析其分离的三种ＴＰＳ，均呈单一的藏色 带，这三种茶叶多糖都是均一的【ｌＩ １．３．３。２客爨分褥 用硫酸－葸酮法测定ＴＰＳ中总糖的含最，以咔唑．硫酸法测定其中糖醛酸含量【９’３５、３６１。１３．３３成分分析６’３４１。Ａ。纸上嚣撬法１９’’镯 取ＴＰＳｌｏｍｇ，用２ｍｏｌ／Ｌ三簸乙酸封管，１００．，Ｃ水解２小时。水解液浓缩至干，用甲 醇艇复洗涤至中性，风干。加少量水溶解，离心，取上清液作纸层析。 取赣华滤纸（２５ｘ１２ｅｍ），霆上学法，震篡裁楚正丁簿：乙赘；承（４：ｌ：５），班Ａｇ瓣侥 染色，标准单糖对照分析成分组成。 Ｂ．高效液相色谱法ｆ９—７１ 褥Ａ隶錾渡上嵩彀滚辍怨谱缝（帮翔离子钙鍪瓣爨挺＞，鞋示差参｝建检测嚣裣溅， 据单籍标准样的保留时间定蚀，峰面积定鬣，可确定１１ＰＳ组成及比例。Ｃ．气相色谱法将２０ｍｇＴＰＳ溶予２０ｍｌ水中，热１０ｍｇ豢验爱解酶。∞℃下谦持３小霹。然嚣糯承 透析，乙醇沉淀。沉淀溶于４．Ｏｒａｌ三氟乙酸（２．Ｏｍｏｌ／Ｌ）中密封，置１００℃下离解８小时。 然臌加一滴氨水、１．０ｍｌ肌醇及３０ｍｇＮａＢＩ－ｈ于２．０ｍｌ溶液中，置一夜，嗣Ｄｏｗｅｘ ５０。Ｗ避滤。最轰，燕Ｏ．１ｍｌ三擎蓥疆醚，振荡，涮成三甲墓醭搿生携，气鞠魏谱分桁萁缀成。Ｄ．原子吸收光谱分析嚣，■分毫地化最麟化挂壤的研究史娥蛛连爱蠢整殿笼焰囊予吸收毙谱投溺定多糖中静微鬃露素。翔姨茶跨褒渣孛缝挺豹 ＴＰＳ．３中即含镟、锌、硒等多种对入体脊籁的徽鬣元素。 １．３．３．４分予量懿测定１１１Ｉ裁溺Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２００棱（１８ｘ８８０ｍｍ）Ｎ定豁准蘩聚耱弱ｖｅ秘兰凝精国ｌｕｅ Ｄｅｘｔｒａｎ）的魄。洗蓰滚§．ｔｍｏｌ／ＬＮａＣＩ。将５ｍｇＴＰＳ溶予１．５ｒｏｔ零孛，灏定ｖ。。淫东嚣等采羯琵法测定纯品ＴｐＳ分子量为１０７０００。１．３。３．５斑落癸蓊黔删 Ａ．红外光谱分析 将纯化的荣许多耱进行瓤外光谱捆搦，分析其特定吸收峰。黄棱宪等将提取的 ＴＰＳ一３逡霉缝乡｝糍箍，ＴＰＳ－３簌３４１５－３２８０ｅｍ‘嚣ｔ６６５—１６３５畦娃爨蠢一鼗多糖类耱囊 的特征吸收峰。 Ｂ．紫乡｝吸牧溅谱势掇 霉冬魏晶ＴＰＳ遴牙紫终懿缮，ＴＰＳ豢２７０～２８０ｍ楚罄疆吸鼗蟪。 １．３．３．６荼多耱豹缝发漆定 茶叶活性寥糖的纯度标准不能用遴鬻化合物的纯艘标准来衡爨，因为即便是活性多 骧楚蕞，萁微瓣遣是不均～鹣。荼多糖靛缝凄鼓我表稳缀镳长熬荟多貔势子豹乎簿聚毒。 通常所谓的荼多糖纯品实际上怒一定分子质量魏围的繁时活性多糖的均一组分ｌ糊。譬裁 常用于活性多糖纯度鉴定的方法有凝胶艨析法、高压魄泳法、超离心法、旋光测定法和 毛缝蓉蔻踉法等。荼蟹溪懋多糠缝囊鍪定审应髑最多的疑凝驳罄橇法。鞭嚣曼该方法准确度高。茶叶活性多糖较凝胶屡析得到～对称洗脱峰，则证明该活性多糖是均一组分。凝胶震褥又分淹喾垂藩瓣瓣莲援滚稳盛辑。商器瞧泳法楚程露苓嚣的活谯多耱与硼移形 戏不鬻瓣复金秘，这些笺念耪冀骞不露豹邀麓，舞戳纛邀穆终蘧下疑迁骖搴不矮，毫濠 绪粟鬟色惹，皴堡单一惩濑，粼袭示该繁峙活谯多耱两均一组分。辩压憩泳鉴定活性多 糖纯度早期用的比较多，现在大多不再利用，原因是该方法的灵敏艘不离；超离心是将 滔蛙多耱港滚遂露密度稻发离一§，褥转速速蘩６０００００ｒ／ｒａｉｎ鞋上器，阁黼爨葙，翔褥蘩的结果是单一蜂，贝ｌｊ证明该茶叶灞性多糖是均一缀分；麓光鉴定法涮用誉网分子鼗鬟懿活性多糖在不间浓度低级醇中溶解度差别进行的，如聚谯不同浓度低级醇中得到的活性 多糖熬魄藤竞凄鞠霹，慰诞鹱该茶时滔热多禧舞褥～缀努。 １，３．４茶叶多糖的性质 鑫予多糖海生物活瞧离分子纯台秘，葵成分会遴分凌方法魏不黼丽辩，盈糌摁物常嚣，砖守毫圯也文糠札性曩鸶研竞文蠢精连是多籍楚潼套辍。多耱豹溪往岛分子量，糕菠、溃群发、裙级蘩抟鞫巍缀蘩擒酃窝荚。 不同化学组成的多糖，其结构和化学性璇势必存在一定麓异，生理功能也会有所不同“１１４’３飘。Ａ．茶野多赣魏一簸牲痰 经分离缝张豹茶骛多糖为粉末获疆体，不舅潮解，笼睬。溶予承，不溶予有巍滚翔。 柱浓Ｈ２Ｓ０４存凝时可与静蘩酚作用，界蕊会出现紫色躺＋茶叶多糖农瓣簸与费林试裁 鏊骥慈爱瘦。褥茶醇多赣撵菇案子滤纸主，薅擎辇藏繁染色呈羹惫。Ｂ。租茶叶多猿（ｃｒＰＳ）的瑷能性质ＣＴＰＳ溶乎水，沸水中溶解率约７６％，不溶予高浓发的有机溶剂如酵、醚、荫酮等。在燕熬楚理嚣，蠢会交痧，攀辩爨。琴醚教虢，嶷ｐＨ＜５＋０或ｐＨ＞７．０露，会菱宝势惩。Ｃ，褪茶叶多糖的光谱饿旗，ＣＴＰＳ鹣紫转逢谱（ｔＮ），将溶子承巾藏置一夜，糍ｌ∞ｏｏｆ，扛施下离心２瓤淑，上潺滚攘入乙懿滋淀，滋淀瓣***、嚣蔫洗涤，囊空予爨，遴行紫努秘绉，在２７０～２８０ｎｍ链有强啜投峰。ＣＴＰＳ的缎外光谱（撒），耀茶叶多糖缝化殿的ＴＰＳ越瑟，红多｝必谴扫搂。ＴＰＳ具 套一羧多耱装戆特薤簸毅蜂（４０００－《Ｓ００ｃｍ＂’）。筵桎宪等获茶蟹凌浚巾爨彀密来熬灰色茶时多糖ＴＰＳ－３在３４１５—３２８０ｃｒａ＂１和１６６５～１６３５ｃｍｌ处辫窍一般多藏躲质戆特薤暇牧蜂。１．３．５茶叶多糖的保健功能溪攘多蘩酶探毽磅爨鼹霹魏爨毽食溺功蓬嚣子孛辚究鬟秀爨熬麓鹾究热点，近年来，有丈量有关活性多糖保健功能的研究报道。丽茶时满性多糖也魁其中蘑要的～个部 分。橇括起采，这些磅究耄簧集中在活镶多耱酌增强受凝谤节、抗静瘸、抗突变、降血耱、燕瘸毒、耨矗羲、菝凝藏、菝浚疡、抗氧识簿方嚣淤３９．辕６０’６１１。１．３．５．１荼彩糖其脊糖辎射效果 早在１９７０霉代，中因农她辩学院茶卧所与天津塑艇防疫．翊ｆｔｌ６１，瘸茶畦多糖趱燃最 骰了，ｊ、爨嚣慧楼效身｜病茨治试验。枣鑫鬣痰下注辩绘药嚣照射６０Ｃｏ，照射麓羹为７６６～８４０ 舱（釉。续聚麓零，茶砖多耱酌黪辐射效繁量墓，挺褰域溪率这３０％。 １．３．５．２茶雾糖具有抗凝斑殷抗血检你用 据歪激辩萼￡臻壤遂，荼时多蘸钵凑、薅静筠哥显著延长蠢凝器雩褥。灌管缭药 ５０ｍｇ／ｋｇ，小鼠凝血时间可艇长３１９％。猩混合人Ｊ缸浆中加入不同蓬的茶叶多糖．３７＂Ｃ孵 商ｌＯｍｉｎ，豫簸链髓阔灏定，靖：餐表镑，Ｏ．０５ｍｇ的茶瞽｝多耱舔可延长囊钙聪闻，０．４ｍｇ９豢，赫分毒地化或理化性质曲研充文献蟓连可完全抑制ｍ浆凝固。用Ｃｈａｎｄｌｅｒ法形成的赢栓，组织学上炎似于人体动脉Ｊ衄栓。实 验表骥，茶多秸明显延长盘捡形成辩闯，缩愆矗拴长发，簌瑟起到抗斑栓豹药理作甭。 １．３．５．３茶多糖具有降血糖作用 给小自鬣腹腔注射茶许多糖，１２ｈ后，血糖含量比对照下降了约１２％，差异达Ｐ（０．０１ 永乎；２４１１盛，血糖禽量虽下降了６．８２％，照蒺冥未达显著水平ｎ８１。王丁ＦＩｌｌｆｌ９１等报道， 给芷常小自鼠口服剂爨为５０ｍｇ／ｋｇ和ｌＯＯｍｇ／ｋｇ茶叶多糖，７ｌｌ厢血糖浓度分别下降１４％和１７％。黢黢注射裁繁戈２５ｒａｅ沲窝５０ｍｇ／ｋｇ，７ｈ鬣癜羲浓嶷分裂下酶了４８％零ｔｌ ５２％，２４ｈ后给药组与对照组血糖浓度无差舜。进～步用四氧嘧啶诱导高血糖模型小鼠，腹腔 疰瓣茶跨多糖，蘩萋麓ｌＯＯｍｇ／ｋｇ，稳鞫２４ｈ分巍骜鬣取盘，结杀表麓，７｜ｌ螽斑糖降低 了４７％，差辨达极显著水平，２４ｈ后觚糖浓度最有所下降，但朱达显蔫水平。糖尿病本 囊楚越簿隐来源和去路闯失去正常狡态下的动态平衡，表现在：一方面葡萄糖生成增多， 另一方面糖的利用减弱，从两引起血糖浓度过高及穗鼹。茶时多糖其谢降血耱作用，说 明茶叶多塘共有修复糖代谢豢乱的作用。据Ｋｅｎｉｃｈｉ ｐ８报道，给糖屎病患者饭后饮用 ２００ｍｌ内含４５ｒａｇ茶叶多糖浆饮料，２月轰盘糖浓度爨蓉下黪，疆匿酵及彗淫三醋慧含 量也有下降，４周后所有患者都已好转。现有钢各含有茶叶多糖做为降血糖和抗糖尿瘸 鼹瓣蕊鐾窝镰素食．舔的专剥掰ｌ。 １３３Ａ茶叶多糖具有增强机体免疫功能摆疰东疑等ｆ’冁遴，对小自鬣受下注辩茶时多耱，然君浚腔注射苹红细稳免疫，６ｄ后静脉取ｍ，观察凝集程度并计算抗体积数，结果袭明，茶叶多糠浓度农３．晌删『ｍＩ￣ｌＯ曲ｎ咖ｌ范国内其有以血清凝集索为指标的体液兔疫增强作用，其中以浓发３．０ｍｇ／ｍｌ效果最佳，姆对照楣比差异达Ｐ（０．００１水平，薅浓发为１．ｓｉｎ＃ｍｒ孵笼上述臻用。翳菸，蓉砖多糖还具有健送荤核瞧整缨熬黎绕器瞧魂能，增强瓿棒鑫我绦护筏力。０．｜哦，２ｒａｉｎ窝５ｍｉｎ取矗筑涎，ｊ、鬣辕粒褰清情嚣。终采表骥，茶辞多糖裁蠡兔２５ｍｇ／ｋｇ和５０ｍｇ／ｋｇ时，小鼠碳粒廓清速率分别增加６僻‘和９３％。 １－３．５．５荼时多赣对心盘管系统的若干药耀作用 据王丁闲｜ｊ１２２１等搬遵，茶叶多耱对心血管系统具有以下药璞作用：黪斑蓬及减慢心搴 作用，茶叶多糖２２．５ｍｇ／ｋｇ十二指肠绘药，３０ｍｉｎ后可使麻醉大鼠血聪下降７２ｍｍＨｇ，据壬丁刚报道?给小鼠皮下流射茶叶多糖，７ｄ后静脉注射２％的碳索墨水，剂量为心率减慢ｌ雪‰耐缺镊露瘸，ｉ妻瓣绘薮５０ｍｇａ醵窝ｌＯ辆歌ｇ茶跨多耱，正豢奎鼠在鬻綦，麓分寓地化燕擅化性质曲嘶究莲下存灌对润分裂延长５９％萋Ｉ：１ ６６％，用巽雨瞥上艨索豹小鼠存滔融阕分别延长３１％和２９％：增热融状动昧流墩，心照插管侧支注入ｔ．．０ｍｇ／ｍｌ茶砰多糖０Ａｍ［，可增加离体豚鼠心脏冠脉衄流量３７％。１．３．５。６茶时多糖述舆存降ｌ警终愆Ｍｏｉｌ Ｍ等瞄】报道，用热水抽提绿祭，经超滤褥到多糖提取物。注射给药，帮量为１００ｍｇ／ｋｇ蛾灌胃给药，剂鬣为１０００ｍｇ／ｋｇ。结果表明，该多糖提墩物可明显降低高脂鼠 的盘浆慧艟霾薅及孛我艨水平。王东鼹镣摄遴，绘运露奎鬣菝黢注射０．２ｍｌ／只，浓度秀 ４．０ｍｇ／ｍｌ的茶时多糖，斑清甘油三醅含薰，给药组在１２ｈ及２４ｈ后均比对照缀降低约 ｌ％，血清腿圃醇含量，绘药组在１２ｈ厢比对照组低约１．５％，２４ｈ厢约低５．Ｏ％，但均未这显著农警。?．苎兰苎竺苎垒兰查兰苎兰苎竺苎叁一一．．．～．——————塞兰一２裁言糖类是自然界最多的有机化含物，也是重要的生物满分子和震要的信息分予?多糖浸糖羹台耪分帮广泛，秘能多辩多襻，它稻参与了缩鬻对多耱生命话动静调节。肖靛多 糖具有特殊生物活性，怒一秘兔疫调节粼，且炎毒副作用，而被作为临床用药或疫萤。在茶盱中也存在一种永溶性多糖，熊有多种特殊的嫩物活稳，称之为茶多糖（Ｔｅａｐｏｌｙｓａｃｃｈａ＿ｄｄｅ）。它§§辫趣糖、貉糖露瘸，还廷霄降盘礁、拭动赫鬻样磺睨、洚毅医、抗凝＿呶、抗血楗、防治心血管疾病等作用，而且它还能使血清凝集素抗体增加，从而增强撬钵受疫凌戆泌、４ｎ。 假目前对祭多糖的研究仍处于起步阶段，仪以粗提物迸彳亍动物实验，其分离、提取．Ｉ艺还没有确囊。瑗在采霭熬方法一黢冀逶舞ｌ予实验室瓣磅兖工俸，著不适弱予互渣纯生产，如海南群力药业肖限公司工业化生产的荣多糖含擞只有１５％，这对茶多糖的显著 生理功能的茇捧无疑燕一大簿礴，本研究通遘院较前入新运薅酌提取方濂，结合趣滤等 貊技术，试图找烈一耪逡会予工、盐他生产的工廖麓单，掇予操器，得率较高豹茶寥糖提 取纯化工艺，为今后茶寤糖的大规模生产提供基础和依据，并对优化工蕊提取的茶多糖 犍矮避行疆究。 茶多糖的来源丰富，主要襻在于料老茶叶中，因此原料较究分。利用新工艺，新方 法挺袋萘多糖鹣工翌纯燕产，并进一步器茇窭渗疗羲器癀、簿鬣盎蕤翦韵§塞囊燕、§受爨 健食晶，这对予低档茶的综合开发，提离荣叶的练合经济效益和社会效益是太存越裨的。善多麓分离地化曩理亿性质曲研究材料与方珐３材料和方法３．１材料３．１．１试验茶样重庆雅安茶厂生产的团结牌康砖３．１．２主要试剂试剂名称ＤＥＡＤ－５２纤维素Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００规格柱层析用 柱层析用产地和生产厂家Ｗｈａｔｍａｎ公司瑞典Ｐｈａｒｍａｃｉａ公司工业酒精 乙醇正丁醇 氯仿 硫酸 盐酸 蒽酮 葡萄糖重庆市钛新化工有限公司分析纯 分析纯 分析纯 分析纯 分析纯 分析纯 分析纯 色谱 色谱 色谱 色谱 色谱分析纯重庆市精工酒精公司成都化学试剂厂重庆东方试剂厂 重庆无机化学试剂厂重庆无机化学试剂厂广州化学试剂厂 重庆北碚化学试剂厂 瑞典Ｐｈａｒｍａｃｉａ公司 瑞典Ｐｈａｒｍａｅｉａ公司 瑞典Ｐｈａｍａｖｃｉａ公司 瑞典Ｐｈａｒｍａｃｉａ公司 瑞典Ｐｈａｒｍａｃｉａ公司蓝色葡聚糖葡聚糖．９０葡聚糖．７０ 葡聚糖＿４０ 葡聚糖．１０ 碳酸氢钠 氢氧化钠 氯化钠３．１．３主要仪器与设备重庆无机化学试剂厂 重庆北碚化学试；ｉ｜ｊ厂重庆北碚化学试剂厂分析纯 分析纯仪器与设备名称 自动部分收集仪恒流泵 旋转蒸发仪型号ＢＳＺ．１００ＨＬ．２产地或生产厂家 上海沪西分析仪器厂 上海沪西分析仪器厂上海医疗器械厂ＸＺＱ一１０６豢多麓垂毒地犯是理化挂质琦研宽精辫与方矗紫多卜可鼹分是光度诗 透耩袋（分子誓ｔ量旁１．２～ｉ．４备） 超级恒温水浴 超滤器 ＧＣ－９Ａ岛浮气褶色谱仪 Ｃ－Ｒ３Ａ型数据处理机 ＣＱ一５０５０融越 ＧＣ．９Ａ Ｃ，Ｒ３Ａ上海分凝仪器厂 美国Ｓｉｇｍａ公司重庆试验设备厂上海囊袈羧援树黪蠢隈公霹 丑本岛滓公司 日本岛滓公司 上海玻璃仪器有限公司 瀹荣化工有限公司瓤艮宅氮仪 衙易圆滚装雹微量分析天平Ｓａｒｔｒｉｕｓ西德电磁搅拌器 徽壅粉碎瓤。Ｕ７９ｌ ＳＳ一２６ｌ南江耄谶器耪厂广东省今日电器实业辫限公司３．２实验蠢法３工ｌ茶多糖分离纯他的路线 ３．２．１．１传统的分朕沉淀法１２４１将茶榉磨碎～一瘸王欺乙簿浸泡，圈流握取３次一褥刭滤波（掰褥会鸯茶多聚、 皂甙及朔雄虢豹乙醇液阿放置一旁）一用沸水提取３次一褥魏Ｉ滤液（滤渣彝鼹不用）减压浓缩麓原体积约ｌ，ｌＯ一一用Ｓｅｖａｇ沉淀法除去蛋白质多次—一得到的上清液再逆向 流隶透拆３天（所褥刭鹣沉淀为含蠢爨鑫痰懿纯念甥）一一减瓤浓缝透辑滚楚小傣羲 加乙醇使掇取液含酵萋达８０ｅ，静置，过夜，离心一一所得沉淀加水溶解，糟１－１２０２脱 色，然后按以上的操作避￡行二次沉淀一一二次沉淀溶于水一一用低浓度的乙醇溶液进行 沉淀一一沉淀魏ｌ无汞乙瓣，蠢酮反复洗涤一一囊空予爆餐茶多糖 ３．２．１．２求提法嘲 将茶样磨碎一一在其中加入２０倍的沸水浸泡（获分３次进杼，每次３０分钟）一一 过滤褥上游液（沉淀重复弧次上述过稷）～一减送浓缩至小钵较一一矮５％溪ｔｔ碳进霉亍 脱色一一脱色液再用Ｓｅｖａｇ法去蛋自一一得到的上清液透析３天～一减压浓缩麓小体积 在其中加入１，５倍的９５％乙醇，过夜一一离心，得沉淀（上清液弈去）～一用冤水乙醇、 踅蘩或***反复多次弱洗涤一一遴移爽窆于爨缛茶多糖３．２．１．３柱层轿法ｌ碱将茶样磨碎一一在其***加入２０倍的沸水浸泡（分３次进行，每次３０分钵）一一１４茶多麓分离屯化及理化性质的研究材料与方珐过滤，提取液再减压浓缩至小体积一一加入乙醇沉淀一一沉淀加入去离子水溶解一一 透析３天一一将透析液减压浓缩至小体积一一加入乙醇沉淀，并过夜一一将所得沉淀用 乙醇，丙酮洗涤后真空干燥即得茶多糖粗制品一一将粗制品溶于水一一用ＤＥＡＥ－纤维 素吸附一一用水洗涤，用稀碱溶液洗脱一一收集，并合并收集液一一ＨｃＬ中和，并置 于超滤器上过滤一一减压浓缩至小体积一一浓缩物冷冻干燥得茶多糖３…２ １ ４超滤法１３９?他廿’４４１我们结合傅博强，陈海霞，周集体，惠永正等人的提取方法，根据初步试验提出了下列所述提取工艺，并称之为超滤法： 将所需茶样磨碎一一在其中加入９０％的乙醇，浸提４小时一一过滤（滤出的乙醇溶 液可作为茶多酚，咖啡碱等的提取原料），滤渣重复提取一次一一滤渣加入去离子水在搅 拌条件下低温提取，同样条件重复３次～一合并过滤液，过滤，浓缩成小体积一一加入 蛋白质消除剂，放置１．５小时以上一一离心，去沉淀，溶液用石油醚萃取一一水相液进 行超滤一一截流液用一至五倍的乙醇和丙酮沉淀一一沉淀溶解后冷冻干燥的茶多糖３．２．２多糖含量的测定：硫酸．蒽酮法１９、２７１ 标准曲线的制作：准确称取葡萄糖２０ｒａｇ置于５００ｍｌ容量瓶中，加水至刻度，分别 吸取Ｏ．２ｍｌ、０．４ｍｌ、Ｏ．６ｍｌ、０．８ｍｌ、１．０ｍｌ、１．２ｍｌ及１．４ｍｌ置于７支１０ｍｌ具塞试管中， 再分别向各管中加入１．８ｍｌ、１．６ｍｌ、１．４ｍｌ、１．２ｍｌ、１．０ｍｌ、０．￥ｍｌ及Ｏ．６ｍｌ蒸馏水，浸 于冰水浴中冷却，然后再向各管中加入４．０ｍ１２９?Ｌ“的葸酮浓硫酸溶液，摇匀，同时将 各管从冰水浴取出，置于沸水浴中１０ｒａｉｎ，并不断振动，反应结束后用自来水冷却，室 温放置１０ｍｉｎ后，以第一管为空白，于４９０ｎｍ处测定其它各管的吸光值，以多糖体积 为横坐标，吸光值为纵坐标，得标准曲线如图ｌ。图１葡萄糖标准曲线Ｆｉｇｌ Ｓｔａｎｄａｒｄｃｕｒｖｅｏｆ Ｇｌｃ蓁多■分寓地化及理化性质的研完材抖与方击样品多糖含量测定：吸取样品液１．Ｏｍｌ（相当于４０９９左右的多糖），重复３次，按上述步骤操作，测定吸光值，以标准曲线计算多糖含量。３．２．３茶多糖组成成分测定 Ａ．含水量测定：１０５℃恒重法【２８】 Ｂ．灰份测定：灼烧法１２９ｌ ｃ．蛋白质的测定：微量凯氏定氮法【２８ｌ ３．２．４茶多糖分予质量测定１９’孤４剐 分子质量测定：凝胶柱层析。取用Ｏ．１ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ溶液充分溶胀（４５ｈ）的Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ．２００装柱（１５ｍｍ×ｇＯＯｍｍ），用０．ＩｍｏＬ／ＬＮａＣＩ溶液平衡３ｄ，先后将５种以知分子质 量的葡聚糖标准品（Ｄｅｘｔｒａｎ系列，平均分子质量分别为１００００Ｄａｌ，４００００Ｄａｌ，７００００Ｄａｌ， １１００００Ｄａｌ，和５０００００Ｄａｌ）进行凝胶层析，上样量各１０ｍｇ，用Ｏ．１ｍｏＦＬＮａＣＩ溶液洗脱， 流速为６ｍｌ／ｈ，按Ｉｍｌ／管分部收集，用硫酸蒽酮法检测茶多糖，分别求得相对应的洗脱 体积Ｖｅ。再用蓝色葡聚糖（平均分子量为２００００００Ｄａｌ）上柱求得柱的外水体积Ｖｏ，以 Ｖｅ／Ｖｏ为纵坐标，ｌｇＭｒ为横坐标，得到分子质量测定标准曲线。分别取待测分子质量的 茶多糖样品５ｍｇ单独依次上样，按与Ｄｅｘｒｅａｎ标准品层析相同的条件操作，求得相应 的洗脱体积，求得Ｖｅ／Ｖｏ值，查标准曲线可求得茶多糖的分子质量。 ３．２．５去蛋白条件的确定ｐ１’坛４Ｌ蜘Ｉ将所得ＴＰｓ用３００—４００ｍｌ蒸馏水溶解，然后分成６份，每份５０ｍｌ，进行脱蛋白处理。 设脱１次、脱２次、脱３次、脱４次、脱５次、脱６次６个处理，每次加１２ｍｌ氯仿和３ｍｌ正丁醇（提取液；氯仿：正丁醇＝１６：４：１），摇振３０分钟后离心５分钟（３０００ｒ／ｍｉｎ），取上清液，摇匀后测定茶多糖和蛋白质的含量。 ３．２．６多糖的纸层析‘９’１０Ｉａ层析纸 ｂ点样量 ｃ展开剂新华中速层析滤纸，纸长１０ｘ２５（ｃｍ）２将多糖配成Ｏ．５％水溶液，点样５０ｐｌ正丙醇：氨水：水＝６０：４５：５ 室温下展开约７￣８小时 用Ｏ．５％Ｎ苯胺蓝乙醇溶液染色，再用９５％的乙醇漂洗３３ ３８’４６ｄ展开条件ｅ显色３．２．７茶多糖理化性质的测定１３２４９Ｉ取茶多糖１９，加１００ｍｌ沸水溶解并保温８０～９５’Ｃ３０ｍｉｎ，其间搅拌数冷却至室温后 离心（４０００ｒｐｍ，２０ｍｉｎ），离心所得不溶性沉淀物烘干后称重。通过计算即可的茶多糖基，黄伞毒蛇毪度理地煞童鸯孵盘封＃冉者击在热水中的溶瓣疫。 取荣多糖０．５９５份，备加５０ｍｌ沸蒸馏水充分溶解，龄祈后分剃在４０＇Ｕ、６０＇Ｕ、８０＂Ｃ 秘１００＂Ｃ恒｛曩下予爨，蕊察其琶交僖嚣。将宅餐分裂蔫１００ｍｌ蒸壤求溶解，蔫蘧，（４０００ｒｐｍ，２０ｒａｉｎ）后取上消液透析３天，寇容至１００ｍｌ，用硫酸。慧嗣法测越含量。 彀茶多耱ｌ孙燕５０ｍｌ漭蒸馏隶充分溶释，离心（翮ＯＯｒｐｍ，２０ｒａｉｎ），取土游漩番４．０ｍｌ予５个１０ｍｉ容璺瓶中，分别用稀ＨＣＬ和襁ＮａＯＨ溶液调节ｐＨ俊海３．０、５．０、 ９．０、１１．０和空螽对照（ｐ磊｛为６＿２），并潮蒸馏水怒容，静簋１２ｈ，观察记泶色泽糍化及是否有汉淀骞嚣爨，透橱３天，离心（４０００ｒｐｍ，２０ｒａｉｎ），上演液羼羲酸慧囊法溅冀含惫．：３嚣茶多耱荦羲雏分辩纸瑟舞努耩降聃’铷ａ朦析纸新华中谜层析滤纸，纸长２０ｘ２５ｅｍ２ｂ豁准零耱麓蘩糖（Ｇｔｅ）、瞽露辖（Ｍａｎ）、辩毂嵇皤（Ａｓａ）、举巍耱《锄１）、半乳糖麟酸（Ｇａｌ．ａｉｄ）均为分麟纯试剂。 ｃ杰样蠢ｄ凝开刹筚糖配成０．粥鹣Ｚ。辞溶液，点祥薰２０１ｄ正丁酵；冰乙酸；水《：１：５ｅ臌开时间室温下艘开２０ｅｒａ左右，豹８曲小时ｆ爨色裁韶苯二攀羧ｌ。鳃溶予泰镪襄懿萎Ｔ蘸ｌＯＯｎ唾，热苯获０．９３９ 将滤纸用显色剂喷雾，鼹１０５℃加热５－ｌＯｍｉｎ 多蕤２０ｒａｇ趣入２ｍＬ２ｍｏｌ／ＬＨ２Ｓ０４蓬安凝簸孛，涕零漤瘩解强，ｇ鼹色条件 ｈ榉晶整理冷却，ＢａＣ０３中和，离心，上滴液浓缩即为点样ｊ瘦。 ３．２．９茶多耱静≮程毽谱分羲馨５ｔ，辅 ３．２．９．１茶多糖的水懈取０．５～１，０ｍｌ麓茶多萜祥最溶解在ｌｍｌ的４ｍｏｌ／Ｌ酌三氟乙酸溶液中，充氮气精加盖密封，爨１００℃水解镰。然后熙氮气除去永解滚。 ３．２．９．２单耱的还原 承解糖样溶簿在０，５ｍｌ夔０．０５ｍｏｌ／Ｌ鬣氧毒艺镳溶渡孛，掇氏５一ｔＯｍｏｌ魏鹱氢纯链， 加入９０ｐｇ的胍醇作为内标物，在６０＂Ｃ Ｊ丕原ｌｈ。加乙酸至无气泡逸出为止。用氮气除去 东，瓣入ｔｍｌ警簿菸振荡溶簿嚣，秀氮气除去擎簿。这撵反复５次殴豫去硼酸校。残渣在含有ｐ２０ｓ的真空中干燥５ｈ。３．２．９．３挚糖蓊乙蕺能豢，砖分离炖化及理化性质的研究材抖与方珐将０．５ｍｏｌ吡啶和Ｏ．５ｍｏｌ乙酸酐加入到干燥的盛有还原糖样的反应瓶中。在１００。Ｃ 反应３０ｍｉｎ，室温下用氮气除去过量的反应试剂。加入Ｏ．５ｍｏｌ二氯甲烷溶解在衍生物，使用微型过滤器过滤并收集滤液，残渣再用二氯甲烷萃取一次，合并２次滤液后用氮气浓缩至所需体积。３．２．９．４气相色谱条件‘鸵’ｓ３ｌ色谱柱：ＯＶ－２２５石英熔融毛细管柱（３０ｒｅｘ０．２５ｒａｍ） 程序升温，由１００１２升至２３０＂（２（５ｒａｉｎ）。速率３．３＂Ｃ／ｍｉｎＮ２１０：１ ２５０℃ ２５０＂（３柱温：载气：分流比：迸样口温度： 检测器温度：检测器：氢火焰离子化检测器３．２．１０数据处理与统计 本论文统计分析方法参考《正交试验法》１５那，《试验统计方法》［６２１，统计分析软件Ｗｏｒｄ［６３１．Ｅｘｃｅｌ［６４】善多■分毒地化定理ｆｔ，ｅｔ质的研竞培论４４．１结果与分析ＴＰＳ分离与纯化新工艺的初步确定４．１．１几种不同提取工艺ＴＰＳ得率和含量的比较 采用分层沉淀法，水提法，柱层析等方法提取茶多糖的结果如表４。由于提取工艺 的不同，所得到的ＴＰＳ得率和含量也会有所差异。从表４可以看出用分层沉淀法得ＴＰＳ 的平均得率是１．２８％，较之水提法的１．１８％，柱层析法的１．１２％和超滤法的１．２０％都为 高。但是它的多糖含量却只有３６．２４％，相比较而言，柱层析和超滤法则分别是４１．５４％、 ４０．３１％，比分层沉淀法要高好几个酉分点。而水提法的ＴＰＳ含量却只有２７．７４％，另外 从表４的显著性差异分析可以得知，在得率上分层沉淀法与超滤法呈显著性差异，与水 提法和柱层析法则呈极显著差异：在多糖含量上柱层析法、超滤法与分层沉淀法和水提 法都呈极显著差异，而它们两者本身却没有显著性差异。所以，从得率和含量可初步确定出用水提法是不适合运用于工业化大生产来提纯ＴＰＳ的。而从工业化生产所需要的低蔗成本、简便操作、有机溶剂使用少、得率和含量比较高等特点来看，分层沉淀法由 于所用的有机溶剂过多，毒性较大，整个操作流程也比较繁琐，而柱层析则由于成本大，得率低等原因而不及超滤法适合。表４四种不同提取工艺得率与含量比较Ｔａｂｌｅ ４ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｉｏ ａｎｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｍｏｎｇ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（％）４．１．２几种不同提取工艺所得ＴＰＳ组分的比较 运用不同的提取工艺可以得到含有不同组分的ＴＰＳ，其结果如表５所示。从上表可以得知，由于提取方法的差异，得到的ＴＰＳ组分含量也有较大的不同。但其主要的成分却是相同的，主要由糖类、蛋白质、灰分等成分组成。其中，糖类约占三分之～，蛋 白质和水分约占三分之一，灰分及其它约占三分之一。９楚！苎坌苎苎！兰兰苎熙坚苎竺竺整一—————————————————————型！—！Ｌ滏５不同搬取工艺蛆分比较Ｔａｂｌｅ５ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏＲａｍｏｎｇｄｉｆｆｅｒｅｎｔ垂ｅ豳拄嫡昭残％》 灰分 其它 水分 滠白质 总耱 一—————¨————————————————Ⅲ—————————————————＿——————¨———————●¨—————ｍｗ＿———————ｍ———————ｍ—————一 １９．２４ １４．３５ ８。７６ ２０．ｊ３ １ ３７．虢组分３５。１８２２点鬈７．９５ ８．０５ ８．２５９．８１ｌＳ．《垫１５髓１４，７０分蒺嚣淀法３６．０２２２．４３ ２１．７５ ２１．４５１８ｊ８０１８．９１平蚜教Ｉ２３６．２４１４．８５ １９．９８２８．６８２７．０１２０．∞２ｌ，６３２２．懿２１．５９９７５ ８．嚣６ｌ”３２孓１５水提法３２７．５４ｌ＆９７２０．１９ ２０．８７ ２｛．７３ ９．４７ ２７．７４ 平海敦 ¨Ｈ——＿—＿＿＿＿＿＿＿——＿＿＿ｗｗ…十———＿＿＿＿＿＿———－＿＿Ｍ＿＿＿＿－＿＿＿＿Ｈ＂—————＿＿Ｈ—＿’—＋—‘“。＿’’＋—－＿＿一——４——“。＿”＿——‘’‘“－＿＊…’———“—一ｌ４０．１２２０，５４ １８．７７ ｌ萋擘薹１０，０５１８．７５ １８．２ｌ １９霉ｌ１０．ｓ瘁ｌＯ．７６ 受７０４２．３４９，９２ｌ密。２２柱崖攒法 ４２．｛６平均数ｌ ２１８．甜 ｌＯ．３３ 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骧素凌蛰，露癸嬲建袋主涟霆素翔攀交稼缀素，蔼箕穗嚣黉纛整个王慧幂褒，进行挺取试验。结果如下艇示：袋７无承蟊簿律积潴摄取前影响强№７嚣融ｏｆ巍ｌｅｏｈｏＰｓ ｖｏ涎ｍｅ姆翩由薯畦ｌ瞧注：ＴＰ￥提取率撼攒５眶康精提取的茶多糖的魄数凝８水提波体积对提取的影嘛Ｔａｂｌｅ嚣ＥｆｆｅｅｔｏｆｗｅｉｇｈｔｒａｔｉｏｏｆｔｅｌｔｏｗＲｔｅＩ＇慰蒗霪量魄酶辨晌拼蝴ｔＯｗａｔｅｒ｛。２ｌ：４１：７ｌ；１０ＴＰ￥疆褒辜 Ｖ耙ｌｄ醴即Ｓ０．５９２ｏ＿６０７豢，培分毒毙纯茂鞋记挂覆鹤唾虫表９瀣发对ＴＰＳ提取的澎嚷Ｔａｂｌｅ ９Ｅｆｆｅｃｔｏｆｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ如ＴＰＳｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ衷１８掇凝时鲻瓣ＴＰＳ撵凝的影礁瓴ｂｋ １０ Ｅｆｆｅｃｔｏｆｔｉｍｅ ｔ０１瞪憾ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ综合上丽各表的锻后结桨，我们可以得出如下结论： ｌ，燕入己醇嫠鑫麓ＴＰＳ瓣承溶浚与多酪类，礴臻簸及皂斌等磐褰惠来；怒萘多糠 提取的第一步，醇提液的体积影响提取效果，醇挺液体税增大可间接提瀚茶多糖的收率。 壶试验缝莱哥嚣窭萋簿提滚钵袄鸯２铬左右辩，萁续黎与２．ｓ傣戆交筑不夫，滚璃在酵 提液为２倍判２．５倍之间时，多糖类矬基本溶出。２，每令毯索簿ＴＰＳ耱旋彀都畜不褥程菠靛彰嫡，爝热去离予永静体积可瑷掇高ＴＰＳ的得察，因为增大提取液的体积有利乎茶多糖的滚出，但当体擞增大到为原辩鲍７倍以 瑶，结果交纯不大，说鹅在周液碍：为ｌ：７瓣盼候，荼多糖已熬本溶如。３．提鑫爨取渡熬瀑度对ＴＰＳ懿提取瞧是蠢疑斡，溢度舞裔也霹叛艇速茶多糖更多的溶出。但怒涛提取液的温度丹高至６０℃的时候，茶多糖的提取率变化不是很大，说明在魏澈度下避褥提取王终是较会逶弱。４．提取时问的延长也有利于茶多鞲的提鞭，时间越长所得到的茶雾糖亦趟多。但 是爨彀薅楚惩长鹃弱对遣会壤整伞工慧瘸鬏越长，这瓣ＴＰＳ辩工盈张大生产来说是镬 不利的。而且从表９研以看出，提取时问从３，５小时到Ｓ小时，獒ＴＩＰＳ豹变化举是报大， 滋鹤茶多耱程这个辩投Ｅ基本溶出了。Ｂ．燕交试验ｆｓ３５４ｌ苎！苎生兰兰兰苎曼苎竺苎矍墨垒．一．一————————————兰！．！Ｌ擞据单因索试验络果，将上述蹬个因素综台考虑，按Ｌ９（３４）设计正交淡，仍以 ＴＰＳ掇取率律为指标，骰正瓷试验，并对试验结采遘行统计分祈，获褥最佳撼敬条俘ａ漤ｌｌ ｋ（ｒ）正交试验霪禁姆求平表Ｔ叠ｈｌｅ １１ Ｔｈｅ辆ｃｔｏｒｓ ａｎｄ ｉｅｖｅｈ ＯｆｏｒｔｈｏｄＯｘｙ采平亭萼西素Ａ Ｂ释鬟滚体积 加水体积２蘩ｈ ４ ２５３嵇ｌ：７４傣ｌ：１０ｅ滠度（℃）Ｄ国２，５ｌ∞３．５对随（ｈ）Ｌ５巍瓣ｅ垃Ｔｈｅ撑隧巍醒。埔Ｉ薅。帮嚣辨汹ｔ试验号； ２ ３ ４ Ａｌ表１２正交试验设计结果Ｂｉ ２ＣｉＤ ｛ ２ ３ ３ ｌ ２ ２ ３ ｌ ５．３６１ Ｓ３６９ ０。５８７数据（Ｙ。）０．５８９求和０翩５ｔ．７８ｉ ｌ．８ｌｌ １．８５６ｌ１２ ３２＆扫姑Ｏ石１４氇６２２ ０．５９９ 袭ＳＳ７Ｏ。Ｓ辩０．６１ｌ０．６１８ ０．６２４３ｌ２０７豁２０．６０５ §．５１９０．繇《０．５９２ 氇５８６ ０．５９０１．静Ｓ１．７９６Ｓ 蓐７ ｇ ９２２ ３ ３ ３ ５．４４８２ ３ ｌ ２３３ｌｌ、７繇ｌ。７９６ ｌ，８ｔ４ ｌ＋７８４ １６．２７８３ ｜ ２０．鳓ｌ 氇秘ｌ０．５９４ ５．４０７０．６０Ｓ０埔４０。鞠８５．４３８０。酮哆ｏ．５９２５。４３３Ｍ Ｍ Ｍ掇ｍＳ置蛄Ｓ■２ｌ５＿３５７ ５．４７３ ５．４４８ ｌ。？ＳＳＩ．８２４５。犯６５．３９４ｌ，８１６ １．８１２５．４０２１．８１８５．５４８ｌ。７９？ １．７９０ ｛，Ｓ《９ ０１８７１．８０７ｍ Ｒ１．斡Ｓ０，０５４ｌ韵｛０．０５３｜．Ｓ｛Ｓ０．Ｉｔ６，ｔ蒜ｊ＃秘蠢地化及理ｍ性质的研耙抽硷液１３饿交实验的方差分析袭Ｔａｂｌｅ １３ Ｒｅｓｅｌｔｓ ｏｆＶａｒｉａｇｃｅ ａａａｌｙｓｉｓ ｏｆｏｒｔｈｏｇｏＲａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ注：?表示显著缝出方差分毒匿漾可以爨出，爨飘素中爨索Ｄ对摄取影螭最为照藩，隧蛰提取时阕瓣鹫 长，荣多糖的撼取率升高。其次分别为Ｃ，Ａ，Ｂ因素煲ｌＪ表现为不显著，因此，避取最 佳工艺鲑啦Ｄ海主，掇擐委交裘牵诗葵Ｍ结聚，选取Ｄ３ＣｚＡｔ转ｌ巍最毪王艺。涣予该 工艺在正交试验中没做，故做验证试验，试验结果如袭１４。表１４袋建提取工艺渡验臻采Ｔａｂｌｅ １４ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ注：ＴＰＳ提取率为５０９康祷所得到的茶多耱的克数出鼗可鞋籍避由燕交试验霉逛靛最佳工艺提取效栗麓显嵩予难交试验审笼大多数 试验络粜，与预测情况相符。所以，确窳该条件为最佳条件，熙体工艺如下所示： ★簿撬滚髂赣：２镶 ★浸提漫发：６０＂Ｃ ★燕求襻积：｛．４★浸撵辩闻：３，５ｌｌ５５ｌ４．２．２去娠白提取条件的摸索龇４６，４７荼多耱蒗蛋岛戆嚣鹃是秀了去豫冀皆薛辩离蛋冬囊，孬禳撵大量赉辩表嗳茶多糖跫 …种酸性糖蛋白，蛋白廉与多糖是紧密结合态。因此去蛋白工艺对糖含量的影响熄整个 提取流猩中努须簧考惑瀚河题。。薹点苎堂查苎兰墨曼璺苎茎竺苎查。．。—————。！！曼袁ｌｓ聪溪敷次数对蛋囟袋客羹岛多糖学蟹魏影响（ｍｇ／ｍｉ）Ｔａｂｌｅ差５嚣臻啦糠囊礞ｆ蛹嘲’嚣龋薛髓臻｝霉瞄翻娃缱蕈阵黯矗ｐｒｏｔｅｉｎ原料荣脱强自次数雾耱含量 蛋鑫霞禽爨注。相同字姆袭示在０．０５水平不显著．惠豪｛５萄黻器篷瘫去滁簧岛戆王毯遗程串，随着鼗鑫囊魏逐澎减少，多藏禽爨逮套减少。寿差分辑表臻，来缀淼爨§避蠼每荟魏爨蠡熊壤魏疆零孛禽耱霪存在嚣游差 舜，而飘脱戳黼次数对糖禽爨宵显著影响。 鑫褒１５遴霹羲窭，不瓣次鼗鼗蛋爨鲶理褰ＴＰＳ枣瓣爨懿裁炎举藏，萋零上鼙滋残 趋势，獒串第１次魏蛋斑疑璞嚣糖量损失觳大，遮弼了掰商损失薰酌６３％。褶毙较磷言， 鬣囱痰禽量麴凝少主要集串程前３次，箕黼蛋邀薰苦憋个脱蛋白爨的９３．１％。这黼明在ＴＰＳ工装添疆巾采援Ｓｅｖａｇ浃艇蛋鑫３拣戳轰莠继续袋攒鑫基菱意义。嚣显Ｓｅｖａｇ法艇 鬣鑫餮褥静试辩建氯谤靳歪Ｔ酵，其巾豹氯仿莛裔毒物旗，容易建成多糖活镁下辫和溶 剂残霉。所以从成本低廉翻环撼豹滂港考毖，Ｓｅｖａｇ浚糕蹑皇３次城潍禽。４．２．３越滤象锋酌摸索’旗棘黼ｓ＂８ 逶避粪辩焱阕窝｛；强‰禳步凌定筵潞嚣雩瓣斌验滢炭强４５～５０＂０＋巍藏滋爱芩糕不会 引起茶多糖的搬性，又能降低粘度增加邋髓。而膜孔径的选择和聪力的调节对于超毂繇工潦寒鬟怒薅蘩关键懿。４…２３ ｌ越滤膜靛选耩搌搬道ｆ捌，茶叶复合多糖襁品中舆硪有较强生趱浠性部分的粕对分子斌懿的在 ４ｘｌ酽～ｌ妊｛扩之漆，霪魏零谂文采爨截爨努予董（Ｍｒｗ）努饕鸯１００００ｄ蠢３００００ｄ蕊焉ｔ种超滤簸进行拣挥试验，道蕊ｊ耩截馨攀丸与超滤时闽晌关系如鞫２和３所示。蒜多麓分毒怠纯趣理纯性堆秘研竞图２Ｊ耀瓣阕煞变纯避獠Ｆｉｇ．２ｖＩ垮ｐｒｏｃｅｓｓｉｏｎｏｆＪ ｗｉｔｈ ｔｉｍｅ巍鬻２爵籍，龄＿２蔟静裙始逶鬃援：ＰＳ－！貘太诲多，餐疆簧怒滤瓣藏嚣延长，ＰＳ－２ 膜的通量遗蟪下降，瓶ｐｓ—ｌ膜则下降缓慢，＝者的羧距逐渐缩小；３小时时＝者已魄 较接近。巍黟３看蓟，ｐＳ—ｌ朕帮ＰＳ－２膜的截爨率郡随ｌＩ圣闻露增搬，健擎Ｓ．１膜增加缓蠖， ＰＳ－２貘粼矮熬讴瘦较文。这憝嚣灸ＰＳ－２骥戆魏衽较大，聚金秘势子瀵入孔戆曳率也大，易造成膜孑Ｌ堵塞，而锚流（Ｃｒｏｓｓ．ｆｌｕｉｄ）流过的料液举能将其冲掉，使孔隙翠下降。聚合镌分子黧与截罄分予纛越搬运，貘越餐堵塞，魏稼攀下簿巍越迅速，结莱，遁燕逐逡 下簿ｔ截辍豢增加。两对于髂一ｌ膜，困绝大多数鬻含物分予爨太予蒸截密分予量，膜 王羞塞静蔻灏缀夺，蔽Ｊ下释平缓，丸土舞氇缓慢。鞭魏，在魏工挎串选用ＰＳ．１膜＜鞠Ｍｇｗ＝１００００ｄ）为宣。燕３氯辘赫赫鹣交纯道獠Ｆｉｇ．３ｖ叠ｒｙｐｒｏｃｅｓｓｉｏｎｏｆｘｗｉｔｈｔｉｍｅ豢，●分毒地化最麟化性质的研竞４．２．３．２版力对通鬃的影响 在温度为４５－５０℃时，将趣滤压力扶０．０４ＭＰａ逐渐增加到０，２８ＭＰａ，Ｊ随Ａｐ的变化 如图４所示。可见，当压力较低时，Ｊ较小，膜鼹上尚米形成浓箍极化层，此时，ｊ随△ｐ大致成正比关系。当压力逐渐增大时，膜面土开始形成浓差极化层，Ｊ的增加遮度开始减慢。当压努继续增大鞋，浓差掇纯鼷达到凝获层浓嶷，幻熬提裹使凝胶豢增厚，ｊ不再随△ｐ丽改变。邋过上述试验，可以得知压力过商会加速膜的压实，使Ｊ下降，九增热，瑟萎戆耧丈，被搽嚣嚣力应戳０．２ＭＰａ凳宣。圈４筮力对遵羹貔彩瘸Ｆ毽４ ＥｆｆｅｃｔｏｆｐｒｅａｕｒｅｏＲＪ遁过上述的试验，Ｂ基本确立了一套提纯订Ｓ的斯的工艺流程，储且从所得到韵结果来瓣，以赣工艺进抒ＴＰＳ的分离纯化，其褥搴、含爨等都鸯较大褥优越性。竺竺坌！苎竺兰竺竺苎苎竺竺查经预处理后的茶样苎堡乙醇液（用于提取茶多酚，咖啡碱等）厂］ＶＩ加入２倍的工业乙醇，回流提取２次沉淀 ，浸提温度６０℃．３．５ｈ浓缩土陀体积ｓｅ嘲法除蛋白ｃ寺：氯仿：正丁醇＝ｔ６Ａ?，溶液加巍醚萃取 水相液进行超滤。分子量，。。史进出口压力差为。．：Ｍｐ的 截留液扇。』倍的丙酮重沉淀 沉淀溶熹冷冻干燥 茶是Ｆｉｇ．５ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆＴＰＳ嚣，■舟毫苑也＾麓他桂麓砖耕竞赭如４．３茶鍪糠鼹性矮酝突４．３．１ＴＰＳ秘纯璇分羲在最佳王慧静绺下黻终了ＴＰＳ产趣，瓣其：邀褥渔蠖熊学挂璜越癸擀，主要毯措鲢度， 努予蘩，缀残簿耱缀努驳滚瓣援，熬稳定瞧镣方嚣瓣磅突。７４３．ｔ．１荼多糖蕤鬃藤瓣瓣｝缝莱分析结果翱阔６所承：网６科，ｓ纸屡拼ｌ雌ｇ．６ＰａｐｅｒＣｈｒｏｍａｔＯｇｒａｐｈｙｏｔ＇ＴＰＳ根据闰谱６可知，茶多糖雀躐层析上只有—个斑点。Ｒｆ擅憋０．５４。说臻糕黼这种掇取工慧褥鬟鹣ＴＰＳ哭裔脊雄一多糖组成。 ４．３．１。２缎势禽量分麟缭莱结聚觅表１６。．袭１６掣挚簿熬缓蠛成努台激（％》Ｔａｂ １６ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆＴＰＳ《％）簿箍ｓａｍｐＩｅｌ墓耱爨ａ辩Ｔｏｔａｌ簧岛滕Ｐｒｏｔｅｉｎ承势Ｗａｔｅｒ９２１ ９．３８ ９．１５藏势Ａｓｈ １９．２５其它Ｏｔｈｅｒｓ１０ ３０ｐｏｌｙｓａｅｅｈａｔ褥ｄｅ ４１，黯４１．７９１９。３６１９，２２２ ３ｌ擎．嚣ｔ０．３２１９．１４４２．０３１９．４０１０．２８结鬃表鹅，褒蘸褥爨魏ＴＰＳ串慈耱鬟与鬓蠡藏承戆澄平鹭遮秘％左右，磊蕊邋过 游几次脱溅白工序其蛋自质禽量还达２０％左右，研以猜测骞糖与燮自质璺紧密缝台奈。豢，辩分毒地化最理化性质曲研宪蛄论这与李布青【４１ｌ等报道的茶多糖是一类与蛋白质结合在一起的酸性糖蛋臼是相一致的。其 余的则是水分，灰分等。汪东风等对所提取判的茶多糖经过紫外、红外及气谬的分桥， ｛芷明它是由糖类、巢胶、蛋爨质等缎成的，磁者的结果是摆吻会的。另外从这～结果霹 以推测生物犬分子中可能络含有大量无机元素【３３～９１。４．３．２ＴＰＳ豹基本理识性曩４．３．２．１溶解性能，热稳定性能，酸碱稳定性能的测定 遴过ＴＰＳ漆解实羧可戳褥翔，ＴＰＳ荔溶解子永溶滚串，不溶手蹇浓度懿乙醇、露戮、 乙酸己酯、正丁醇等有机溶剂。且与硫酸蒽酮、硫酸苯酚反应阳性。离心后所得不溶性 沉淀物称重为０．２５７３９，酃熟承中ＴＰＳ的溶解发约为７６％。袭１７不弼温度对ＴＰＳ色泽的影响Ｔａｂｌｅ １７ Ｅｆｆｅｃｔｏｆｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ∞ｔｈｅ ＴＰＳ ｃｏｌｏｒ袭ｌｓ不同温度对ＴＰＳ含糖爨的影响Ｔａｂｌｅ勰ＥｆｆｅｃｔｏｆｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｏａｔｈｅｍｖｅｈａｒｋｌｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｈｅＴＰＳ由表１７、表１８可懿，ＴＰＳ对热稳定毪较差，表现在隧予澡温度增高，色泽变深。 这可能与ＴｐＳ中一然成分在离温下照易被氧化色泽变潦有关。另外，ＴＰＳ在热的作鲻 下，由于其中的多糖物质将产生降解，使得含薰减少。表中１００℃温度干燥下糖类测定 值离子８０℃处理值，这可戆与离温下识浮变深产生予捷舂关。查！苎曼！±竺墨璺！！兰墨竺苎查．一。…——～———————！！ｊ！Ｌ袭１９不同ｐＨ处理对ＴＰＳ禽糖量的影响Ｔａｂｌｅ １９ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆｐＨｖａｌｕｅ∞ｔｈｅｓａｅｃｈａｒｉｄｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆｔｈｅ ＴＰＳ０．３Ｈｐ ｐＨ６，２ ０，ｔｐＨｇ．０ ｌＨｐ 处理ｐＨＳ，０ Ｔｒｅａｍｅｎｔ禽壁（ｇ）Ｃｏｎｔｅｎｔ（ｇ）挺对壤少≤％≥。１８．０６ Ｒｅｄｕｃｅ ｒａｔｅ（％）０．§＃－３。｛１、＋１３．０６÷１５．９３氆表ｌ擘簿裁，不霭鳇鳝ｉ谴对谨ｓ色泽影确是：在碱枝条释下，ＴＰＳ东溶液藏琶加深随着碱性提高而加剧，并伴随有少霆沉淀产生。倪在酸性条件下笼此现象发生。而 ＴＰＳ申糖类躲藏由手在酸毪蘩僻下会菠垒簿群，表现渤糖含爨明显减少。至于ＴＰＳ在 碱性絷传下是褥会降群，则由予其水溶液颜色的加深藤嚣法测麴其真实镳。这说明ＴＰＳ 对Ｄ｜｛较为敏感，在开发或应用时要加以重视。４．３。２．２ＴＰＳ分子爨黎蒸定袭勰苓辫努子鳖的洗髓嚣熬、Ｖｅ／Ｖｏ靼魄矗董馕Ｔａｂｌｅ２０９ｌｅｔｉｏｎｖｏｌｕｍｅ，ＶｅＮｏａｎｄｌｏｇＭ ｅｆｖｔｒｉｅｍｍｏｌｅｃｕｌｅ州霉ｈｔｓｏｎ酬—神“Ｇ－７ｍ０ ｃｏｌｕｍｎ豳表２０和图７珂以得刘Ｖｅ／Ｖｏ与ｌｏｇＭ关系的回归方糨为：ｒ－０．６７７４ｘ＋４．９２７１（ｒ＝－０．９９５６），嚣鼗我嚣ｊ可知逶遵趣滤法靛簸链工艺褥饔静ＴＰＳ其分子董为９５０００。蒜争藉分离她纯度藏毽社蘑蝣研巍辩培懿７不蹙分乎摄鹩糠准穗聚糖及ＴＰＳ泌Ｖｅ／Ｖｏ与ｔｏｇＭ荧糕Ｆ秘羝瓣ｌ雠黼姆ｎ、酵魄黼垂‰Ｍ＃ｆｔｈｅｓｔａｎｄａｒｄ硅鹳（蚌袖ｌ冀黼畦；羝嘲｝删黼靴瓣ｌ羽ｏｆＴＰＳ４，３．３。秘Ｓ的零瓣缀分势橱鬃８ＴＰＳ鬣麓橱缓努势鬟黎莱Ｆｉｇ．８Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆＴＰＳ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｂｙ ｐａｐｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙＡ：Ｇｌｅ 器：Ｇａｔｅ：Ｍ窭ｌＤ：Ａｒａ蕺：Ｃ＿ｖａｌ－ａｌｄＦ：褥Ｓ４．３，３。ｌ纸艨糖 结添懿髫８。结采袭鹅，逶掰超滤法所得司的ＴＰＳ熬荦糖组成为葡萄糖、阿拽伯糖、督露骧、半巍糖翘半搴￡糖熬酸譬。鼹正丁醛一冰醚酸一水（４：ｌ：ｓ）瓷展嚣裁，隧蘧灏糖鹃嚣ｆ蘧为ｌ。稻，蘑｜ｊ寓嚣ｊ豹Ｒｆ篷之穗为，Ｇｔｃ；Ｇａｌ：Ｍａｎ：Ａｒａ：Ｇａｌ－ａｔｄ＝１．００；ｉ．１７：ｌ。３Ｓ：｛．５１：１．５７。４．３．３．２气槌色谱分辨豢，椿夸毒砘记基艇化性质曲耕竞赫如标壤ＴＰＳ嚣９羽塔气鞠琶谱瑶Ｆｉｇ．９ Ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｍａｐｓ ｏｆＴＰＳ Ｉ。Ｒｈｅａ ２。Ａｒａ轰Ｘｙｉ４．Ｍａｎｓ．Ｇａｌ６。Ｇｋ气ＩｎｏＴＰＳ酌气捆色谱圈见辫９。结果表骥，所褥ＴＰＳ熄囱阿拉豫糖、拳巍糖、麓麓糖、 甘露耱等组成，它们的摩尔比例为，Ａｒａ｛Ｍａｎ：Ｇａｌ：ＧＩｃ＝８。２４：３，３８：２３，８２：２４．５６。 这与纸最辑弱分餐蘩袋裔赢不鼹，襄瑟毫簧是黧舞睾巍耱醛酸掇褴大，褒实验条捧下不 易气化而未能粥峰。这～络聚与汪东风｛删用岛滓ＧＣ．９Ａ气相色谱仪对经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ．２００往麓纯瓣谚毫忿茶缓终荼酌荼多耱搀墩物酶分辑结采桷器，链酌磺究表鞲茶多糖缀取褥熊多耱罄分怒蠹辩拉｛蠡糖、本稳、老藻耱、蘩莓糖、拳巍耱缓袋，冀革糖缀藏院炎５，５２：２．２１：６．０８：４４．２０：４１．９９。蔫矫，王丁削汹等腻屯溪绿茶中提取的荼多糖证明怒豳岩藻糖、甘露糖、镶萄糖、半巍糖和阿拉健糖组成的，黪承比为Ｏ，２３：ｌ。０４：０．６２：２．４３： ｌ国恩；这蹙灏窀绩鬟懿蓑髯说硬交予萘靖舔赣、努饔缝健方法翡不满会导数瑟箍数瀚ＴＰＳ 照嬷缀成及魄侧有较大豹熬异，救在提取茶多耱孵，簧扶器辩、掇敬缝纯方法等备方瑟 严格加以规定，以增加实骏设计及数据的理论饿和准确度。蕃，麓｜争毒地张虎牲纯柱壤辑研宪赔ｇ－５结论（１）运用不同翻提取工艺所褥到酾茶多糖豹褥黎，组势，禽爨等都有较大差异。通ｉ妻凡：黪工德的比较试验表骥运用越滤法较其他工拔更适合予王般化生产。 （２）在糕用超谴法提取茶多糖聪，翅入无农己黪戆葵稷、去裹予拳的体襁、湛震 及掇彀魏瓣瓣等嚣索对予最熬ＴＰＳ辩褥率、会塞等影蘸较大，邀避赢交试验确定它｛｝】 分别为２储、ｌ：４、６０＂Ｃ和３．５ｈ时为最佳的正艺条件。 （３）Ｓｅｖａｇ爨蛋爨，热天Ｉ／４髂菝翡鬟捺窝１／ｔ６终霰熬菠Ｔ醛，鬣黄使骚鑫矮变 性。变性羽鬣自质溶予藏丁醇中，蔼雾糖不港于有桃滕，剐可将鬃自旗除去。锻是蛋囱 震减少静弼时多糖类也我减痧，而Ｒ Ｓｅｖａｇ法脱蛋囱燕要集中在前３次。其所由沈铡可 这９０％殴ｔ。贯终，煞髂是蠢毒赘矮，骞易选旗多耱活燕懿下繇鞠溶裁熬洗获。羲懿， 麸成率韵骶潦和环境静清洁考虑，Ｓｃｒａｇ脱蛋自３次较适宜。。（４）怒滤法提取擞佟条仕温和，不会弓ｌ趣多糖敷降壤，嚣慧蹬鍪楚攀，撵掺方嫠， 没鸯攘簸转移。毽是骥戆逡搽襄压秀熬潺试瞧魄较瀵黉。运遵试黢确定了截爨分予塞凳 １００００ｄ瓣糕潞簇在０．２ＭＰａ戆覆力下避短秀寂。 （５）邋蛙比较和优化实验获得了茶多糖的超滤法提取工芑，其■艺流税如图ｓ餍示。（６）通过纸层析和蕻缎楚的磺究ｔ舞定ＴＰＳ燕渤多糖类、鬃自质、灰势、水分及其它成分掰缀成，褥且辍自旗含量较黼，猜测其每彩糖呈紧密缩合态，因此所得到的ＴＰＳｎ－ｔ戆爨～耱虽篷多糖。（７）趟滤法提取羽付Ｓ在沸水巾肖较好的溶解性．但不溶予商浓度的有机溶；｝ｌＩ中。箍蠢舞热稳宠性较嫠，巍蒸潍或遘酸翱德骧纂｛｛孽凝下，搀会镬葵巾瓣多羲瀑镑窳瓣瑟逸 残搂失。《慕）糕溺纸罄爨莉气穰惫灌等分翳ＴＩ＇Ｓ藩攀糖缀残，茇蠛寮是巍阿拉氆耱、糠萄糖、术糖、举乳糖和半乳糖酸酸组成。纸层柝与气树俄谱分析的结果接近，只魑由于半翼赣醛酸缀链大，攀易气像繇寒戆爨蜂，萁簿象诧爨惫，Ａｒａ；Ｍａｎ：Ｇａｌ：Ｇｌｃ噶。２４：３．３８：２３．８２：２４．５６，它们的平均分子爨为９５０００。豢，●分毒死化厦理化性质的研究参考文献参考文献１．陈宗道主编．茶叶化学工程学．珏南师范大学出版社．１９９９２．Ｍａ∞”ｌｋｉ Ｓｕｚｕｋｉｅｔａ１．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ２－Ｏ－（ｆｌ－Ｌ－Ａｒａｂｉｎｏｐ煳ｏｓｙｌ）－Ｍｙｏ—ｌｎｏｓｉｔｏｌｏｎｉｎｔｅａｐｌａｎｔ（Ｃａｍｅｌｌｉａ ｓｉｎｏｎｓｉｓ），Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ１３５～１３９Ｔｅａ ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｊａｐａｎ，１９９１３．陈宗道等．微生物与普洱茶发酵．茶叶科技，１９８５（４）：４￣７ ４．汪东风等．茶叶多糖及其药理作用进展．天然药物研究与开发，１９９６（３）：６３＂－６７５．Ｗａｎｇ ｄｏｎｇｆｅｎｇｅｔ ａ１．Ｓｔｕｄｙｏｆｐｈａｒｍａｃａｎｔｉｃａｌ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｉｎ 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