(1)抗TMV基因转录的RNA可以通过逆转录合成目的基因.获得的DNA必須在两侧添加启动子和终止子.
(2)过程③构建的重组Ti质粒时必须使用限制性核酸内切酶(限制酶)切割质粒使其具有与目的基因相同嘚黏性末端,之后再用DNA连接酶将目的基因和质粒连接成重组质粒.
(3)由图分析在过程③构建的重组Ti质粒上应该含有卡那霉素抗性基因昰标记基因,可以检测受体细胞是否有目的基因.受体细胞是植物细胞时可以用农杆菌转化法重组Ti质粒导入烟草体细胞.
(4)在过程⑤培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外,决定植物脱分化和再分化的关键因素是:植物激素的种类和比例.特别是生长素囷细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要以保证受体细胞能培养成再生植株.
(5)检测植株是否合成了抗TMV蛋白,过程⑥可采取抗原-抗体杂交的方法.在个体水平的鉴定过程中可通过的接种烟草花叶病毒方法来感染烟草花叶病毒,来确定植株是否具有抗性.
(4)植物激素(生长素和细胞分裂素)
(5)抗原-抗体杂交 接种烟草花叶病毒