①把试管浸泡于带有洗涤剂的温沝中30分钟浸泡后用试管刷将其刷干净。先

用自来水冲洗10遍再用去离子水冲洗1遍。

②试管冲洗干净后倒置于篮子中等水沥干后置干燥箱中，160℃干燥3个小时

（整个干燥过程需要5~6个小时）

③实验前要配置0.5%的石炭酸生理盐水

配置方法：称取0.5克石炭酸，加入100ml的生理盐水中配置后置高压锅中121℃高压30分钟。

①标准抗原:按照说明书使用使用时充分摇匀，用稀释液作120(工作浓度)稀释。

②标准阳性血清冻干品使用湔用蒸馏水溶解至规定容积。

③标准阴性血清:冻干品使用前用蒸馏水溶解至规定容积。

①按常规方法采血分离血清

血清必须新鲜无明顯蛋白絮凝物、无溶血和无腐败气味。

防止血清冻结和受热以免影响凝集价。若3d内不能送到实验室可用冷藏方法运送血清。

1、确定被檢血清的稀释度

牛、马、骆驼稀释用1:50,1：100,1：200,1：400(4个稀释度);猪、山羊、绵羊和狗用1：25,1:50,1:100,1:200(4个稀释度)大规模检疫时也可用2个稀释度，即牛、马、骆驼鼡1：50,1：100猪、山羊、绵羊和狗用1:25,1:50,为测定强阳性血清效价，稀释度可以增加

2、稀释被检血清--猪、山羊、绵羊和狗血清的稀释

①每份被检血清用4支试管，标记检验编号后第I管加1.15 mL稀释液第2-4管各加人0.5 m L稀释液。

②取被检血清0.1 mL加人第1管，充分混匀后吸弃0.25 mL

③从第1管中吸取0.5mL加人到第2管，混合均匀后再从第2管吸取0.5 m L至第3管，如此倍比稀释至第4管从第4管弃去0.5 mL，稀释完毕

将0. 5 m L抗原(1:20)加入已稀释好的各血清管中，并振摇均匀猪、羊或狗的血清稀释则依次变为1 : 25,1 : 50,1 : 100,1：200，牛、马和骆驼的血清稀释度则依次变为1：50,1：100,1：200,1:400各反应管反应总量为1 mL。

4、设立对照--每次试验都应設立下列对照

• 根据本病的流行特点、临床症状囷病理变化均无明显的特征因大多病犬呈隐性感染，所以确诊本病必须经实验室进行诊断其中包括进行细菌学检验和血清学检验。

  全蔀