W***E~(TM)生物反应器灌注培养生产种子细胞的开发和应用--《生物工程学报》2012年03期
W***E~(TM)生物反应器灌注培养生产种子细胞的开发和应用
【摘要】：近年来,国内中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary,CHO)生产罐的培养规模已达上千升,国外已达上万升,最终的生产罐前需要多级摇瓶、种子罐进行种子细胞扩增,扩增效率较低,严重影响了抗体、融合蛋白等生物制品的生产效率。文中利用W***ETM波浪式生物反应器,通过灌注培养的方法,成功地实现了种子细胞的高效扩增。W***ETM波浪式生物反应器灌注培养方法制备种子细胞,CHO细胞密度高达2.28×107cells/mL时仍处于指数生长期且细胞活力大于95%,以此细胞作为种子细胞,4×105cells/mL接种于另一个W***ETM生物反应器进行流加培养,最大活细胞密度仍可达1.73×107cells/mL。通过此种扩增方式,1台W***ETM20/50即可为1 000 L或2 000 L的生产罐提供种子细胞,种子细胞的扩增倍数(Split ratio)可以达到1∶50～1∶100倍,与传统不锈钢罐种子细胞扩增倍数1∶2～1∶10相比,可以显著减少2～3级种子罐,种子细胞的扩增时间减少7～9 d,极大地提高生产效率。
【作者单位】：
【分类号】：Q813
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Influence of Environmental Factors on Seed Germination and Seedling Formation of Primula filchnerae环境因子对陕西羽叶报春种子萌发及成苗的影响
,,,,吴宪,,,
Keywords: ,,,,Dormancy陕西羽叶报春,,,,
陕西羽叶报春(Primula filchnerae)是百年绝迹、曾被植物界视为可能绝灭的二年生草本植物,其种子萌发和成苗是其种群续存的前提,也是其园林开发时繁育工作的理论依据.本研究发现,陕西羽叶报春种子细小,25℃、低光(2700 lx)和当年采集种子是其萌发的最适条件.然而,该条件的成苗率仅25%左右,成苗/萌发比也比其它处理低.29℃高温下陕西羽叶报春种子存在一定程度的休眠,赤霉素(GA3)处理后萌发率虽显著增加,始萌发时间缩短,但高浓度(200 mg/ L)GA3处理使种子成苗率和成苗/萌发比显著降低.经过2个多月的高温高湿(29℃下萌发)处理后,将未萌发的种子重新在最适温度25℃下萌发,发现它们的萌发率不受影响,但始萌发时间显著缩短.以上结果说明陕西羽叶报春种子成熟后,及时采收并适当让其高温休眠一段时间,萌发时先用低浓度(20 mg/L)GA3处理,不但可以显著提高萌发率,而且可提高成苗率和成苗/萌发比.
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