人源HBsAb重链体外表达和亲和力、特异性初步鉴定--《中国卫生检验杂志》2011年09期
人源HBsAb重链体外表达和亲和力、特异性初步鉴定
【摘要】：目的:制备人源HBsAb重链,初步鉴定其亲和力和特异性。方法:利用流式单细胞分选技术获得单个抗体分泌细胞,单细胞RT-PCR筛选单菌落,挑选其中有IgG保守区域的克隆全长,构建IgG(H)基因的表达质粒,转染COS-7细胞并诱导表达。间接ELISA测定检测亲和力,Western blot鉴定抗体特异性。结果:成功构建表达质粒,间接ELISA显示亲和力Ka值达到2.39×109 L/mol,Western blot鉴定重链有较高的特异性。结论:人源HBsAb重链的体外制备对乙肝防治具有重要价值。
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【关键词】：
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【分类号】：R512.62【正文快照】：
血源性乙肝疫苗在我国经数十年近亿人次的接种,虽从总体来说具有良好的安全性和免疫原性,但对小部分使用者如新生儿等群体仍存在异源性致敏的风险[1]。从20世纪70年代英国学者Milstein和德国学者Kohler利用细胞融合技术首次成功地制备出单克隆抗体以来,单克隆抗体在医学、生
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