液相色谱分离速度提高及选择性优化
安捷伦液相色谱柱介绍与选择

液相色谱方法开发中如何选择色谱柱 液相色谱方法开发中如何选择色谱柱？

1.根据样品特性选择分离模式 2 色谱柱的适应性和选择性 2.色谱柱的适应性和选择性 3.色谱柱规格的选择

硅胶的正相色谱 溶于正己烷 用不同键合相的正相色谱

溶于甲醇或甲醇/水 或乙腈或乙腈/水

用不同键合相的反相色谱 用不同键合相的反相色谱

低分子凝胶渗透色谱 用不同键合相的反相色谱

抑制电离反相键合相色谱 离子对键合相的反相色谱

离子化 硅胶基质的反相色谱 离子交换色谱 溶于有机溶剂 凝胶渗透色谱 凝胶过滤色谱 溶于水 大孔填料的离子交换色谱 用大孔填料的反相色谱

分离模式的选择实例-三聚氰胺分析

三聚氰胺是强极性，弱碱性化合物（pKa=8），微溶于水。

模式一：离子对键合相的反相色谱 对应国标方法GB/T 第一法（反相离子对方法） 流动相：离子对试剂（辛烷磺酸钠）溶液：乙腈 ＝ 92:8 色谱柱：ZORBAX SB-C8 4.6x250mm,5um 模式二：硅胶基质的反相色谱（HILIC） 对应安捷伦开发的HILIC模式方法 流动相： 10mM乙酸铵：ACN=11：89 色谱柱：Zorbax Rx-Sil,

液相色谱方法开发中如何选择色谱柱？

1 根据样品特性选择分离模式 1.根据样品特性选择分离模式 2.色谱柱的适应性与选择性
适应性：色谱柱的耐受范围 选择性 不同色谱柱对同一样品的分离不同 选择性：不同色谱柱对同一样品的分离不同

不同反相色谱柱的pH适应范围

选择性、柱效、保留对分离度的影响

选择性对分离度的影响最大

? 优化键合相 ? 优化流动相