抗衰老食物 帮你做无龄美女
核心提示：食物抗岁月侵袭的魔力，要远比那些瓶瓶罐罐里价值不菲的化妆品和保健品来得更省事、更有效。推荐的11种抗衰老最佳食物，除了让味蕾兴奋外，更能为你带来苗条的体型、年轻的心脏、非凡的免疫力、愉悦的心情吃出真正的无龄女人。
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　　绿菜花
　　呵护关键词：年轻心脏
　　绿菜花中含有一种植物染剂，即黄酮醇，它具有增强体质和防癌的作用。美国明尼苏达大学研究人员对34000名女性进行研究后证实，绿菜花所含的黄酮醇能很好地保护心脏，并降低心肌梗塞的发病率15%～20%，对绝经后容易患心肌梗塞的女性而言，无疑是个福音。不过，其他的生物黄酮醇，例如茶叶或苹果所含的生物黄酮醇，却没有这种特殊的防病效果。
　　除了绿菜花，核桃仁中所富含的不饱和脂肪酸也能有效地预防心肌梗塞，你每日最好能吃上12颗。此外，每日食用200克水果和蔬菜(约相当于两个苹果和一份蔬菜)的女性，其患心肌梗塞的风险大约能降低60% 。
　　呵护关键词：呵护乳房
　　鸡蛋具有预防的功效!这是美国乳腺癌研究专刊公布出的最新医学研究成果。他们声称，每日食用一个鸡蛋的年轻女性，其患乳腺癌的风险性将会下降18%。除了鸡蛋之外，植物脂肪和富含能促进肠蠕动的纤维素类食物也具有预防乳腺癌的功效。瑞典科学家还发现，黑麦片粥或黑麦糊也具有同样的功效。这是因为黑麦粒的外壳中含有一种称之为特殊的物质，它能够抑制癌细胞的生长。
　　每天早晨吃上一个水煮鸡蛋就能大大降低患乳腺癌地风险性，何乐而不为?黑麦糊和黑麦面包也应成为女性早餐的首选，除了能呵护乳房，还具有预防、减轻体重的功效。
　　花生酱
　　呵护关键词：永葆青春
　　或许花生酱不是人人都爱吃，不过，因为富含，所以它强大的抗氧化功能不容忽视，常吃能帮助女性抵抗岁月的侵袭。此外，花生酱还被誉为最佳能量食品，在体育运动比赛前2小时，运动员如果能吃上一片涂有2茶匙花生酱的面包，其所含的“好的”单式非饱和脂肪酸就能帮他持续地保持饱腹感，并向身体提供缓慢释放的碳水化合物，使之保持良好的体力和状态。
　　花生酱的功效还不仅限于此，最新医学研究表明，花生酱与其他(如核桃、榛子)一起食用，就能使女性大大降低患病(类型2)的风险性。
　　呵护关键词：调节情绪
　　如果你正为性趣日渐消退而苦恼的话，不妨试一试咖啡的催情效果。当然，咖啡在提高人的注意力、消除紧张情绪、预防早老性痴呆和帕金森症方面，作用也不容忽视。除此之外，它还能提高止痛片40%的效力。对咖啡因的反应因人而异，每个人应找出自己喝咖啡的最高。但一般来说，一天喝3杯为宜。
　　咖啡易使人体钙流失，但如果喝添加了牛奶或的咖啡,就能有效防止钙的流失。咖啡对皮肤也有害，因此，喝一杯咖啡之后，应喝1—2杯水。
　　呵护关键词：保持体形
　　过去，人们经常把食物的脂肪含量与体重增加画上等号，而美国大杏仁刚好能证明这一误区。研究显示，在每天的中加一把美国大杏仁不仅不会使体重增加，相反，还能帮助女性减肥。这是因为，首先，食用美国大杏仁等坚果会让人产生明显的饱腹感，饭前吃一小把，可减少对于其他高热食品的摄入;其次，大杏仁所含的膳食纤维可以降低脂肪吸收率，食用大杏仁并不会摄入营养标签上标明的那么多热量，所以不会导致体重增加。另外，一些研究还表明，每周食用美国大杏仁5次以上的女性，身体质量指数(BMI)在所有成年人中最低。
　　美国大杏仁确实是一种容易填饱肚子的轻松小食品。一把大杏仁(约23粒)，大约28克，含有160卡路里，同时富含类黄酮抗氧化剂，同时也是维生素E和矿物质镁的极好来源。女性可以将它当作一种健康的零食，尤其适合在餐前食用。
　　燕麦片
　　呵护关键词：降低胆固醇
　　燕麦颗粒浑身是宝，几乎包含人体所需的全部强力营养成分，比如植物蛋白质、、B2、膳食纤维、矿物质以及铁、锌等微量元素，它能为你的骨骼和牙齿补钙，并使你整天精神饱满。尤其是当你血液中胆固醇含量过高时，更应该在早餐时选择燕麦片，因为美国临床营养学家的研究证实，不分男女，只要每天吃一碗燕麦糊或燕麦粥，就能将高胆固醇水平降低10%以上，并使心肌梗塞病的发病率降低20%。倘若你选择的是内含水果、胡核仁、葡萄干、牛奶等混合的麦片糊，则能使心肌梗塞病的发病率降低50%。
　　在国外，燕麦片被誉为最受女性青睐的健康食品，燕麦片多在早餐食用。其制作方法如下：4汤匙燕麦片、2汤匙葵瓜子仁、2汤匙葡萄糖、1/2个香蕉、1/2个苹果、4小块杏干、200毫升牛奶或酸牛奶。水果切成小块，盛放在碗中与其他配料搅拌均匀后即可食用。
　　巧克力
　　呵护关键词：走出情绪低谷
　　情绪总是抑郁不快?来块巧克力吧，阴霾的心情就会好多了。因为巧克力具有消除抑郁心绪的奇效：巧克力所含的碳水化合物和脂肪在人的大脑中释放幸福激素和内啡肽，让人精神愉悦，而且巧克力中还含有一种物质苯(基)乙胺，其抗抑郁的功效早已被科学家们所证实。
　　西方国家正流行一种新的节制饮食疗法：巧克力节制饮食疗法。只要你身体力行两星期，无论是体重还是血压，都有下降。但先决条件是：巧克力所含的可可含量至少达70%。
　　(实习编辑：邓碧琴)
2下一页尾页植物蛋白酶提取纯化工艺；生物工程09-2班陈福泉学号：；一、实验目的；1、了解植物蛋白酶常用的提取纯化方法的基本原理和；2、掌握双水相和反胶束萃取的原理和操作步骤；；3、掌握蛋白质含量和蛋白酶酶活的检测方法；二、实验原理；植物蛋白酶常用的提取纯化方法有缓冲盐溶液提取、初；以pH6.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液为提取；三、实验材料；材料与
植物蛋白酶提取纯化工艺
生物工程09-2班
一、 实验目的
1、了解植物蛋白酶常用的提取纯化方法的基本原理和基本操作；
2、掌握双水相和反胶束萃取的原理和操作步骤；
3、掌握蛋白质含量和蛋白酶酶活的检测方法
二、 实验原理
植物蛋白酶常用的提取纯化方法有缓冲盐溶液提取、初步纯化的方法有有机溶剂法、乙醇粉法、丙酮粉法、盐析法、双水相法、反胶束萃取法等
以pH6.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液为提取溶剂所得酶活力较高，最佳工艺为：以pH6.0磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液25℃提取2次，料液比1∶1；应用硫酸铵盐析及透析袋透析对粗酶液进行纯化，粗酶液再以60%硫酸铵盐析24h，透析袋（14000）低温透析12h，冻干；酶学性质研究表明：生姜蛋白酶以酪蛋白为底物其最适pH值为6.0，30℃保温30min，酶活稳定。
三、 实验材料
材料与试剂
新鲜生姜、酪蛋白（化学纯）、考马斯亮蓝G-250、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、无水碳酸钠、碳酸氢钠、柠檬酸、硫酸铵、丙酮等试剂均为分析纯。
0.01%（w/v）考马斯亮蓝G-250溶液：将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50mL 90%vol乙醇中，加入85%正磷酸100mL，蒸馏水定容至1000mL。
0.5%酪蛋白溶液：称取0.5g酪蛋白，先用少量0.55mol/L碳酸钠溶液润湿，再加少量0.02 mol/L pH7.5的磷酸缓冲液稀释，水浴中煮沸溶解，定容至100mL。
四、 实验步骤
方法一：生姜蛋白酶提取液制备: 取定量新鲜生姜,切成小块后加入10 倍体积的pH 6. 0, 0. 2 mol/ L 磷酸缓冲液( 4 e ) , 于粉碎机中匀桨, 8 层纱布过滤后于4000 rpm 离心10 min, 吸取上清液, 加入高饱和度的( NH4) 2SO4 液使盐析体系中( NH4) 2SO4 终饱和度为60% , 4000 rpm 离心15 min。收集上层不溶物, 用少量pH 7. 50 的柠檬酸缓冲液溶解, 在4 e 下对同种缓冲液透析8 h。透析液定容, 即为生姜蛋白酶提取液。
方法二：生姜蛋白酶的提取 取外形完好、无机械损伤和腐烂、富含纤维的生姜，切成小块，与磷酸缓冲液（0.03mol/L，pH7.5，内含1 mmol/L EDTA和5mmol/L L-半胱氨酸）按料液比1：2打浆，所得浆液低速搅拌20m i n，搅拌过程中缓慢加入20％（m/v）固体硫酸铵，四层纱布过滤后，将姜汁4℃下静置2h，离心（4 800rpm，5min）去除沉
淀，上清液用1.5倍的无水乙醇进行沉淀，再次离心去除上清液后收集沉淀（即粗酶）。
生姜蛋白酶的反胶束萃取：在生姜蛋白酶提取液加入等体积的AOT-异辛烷阴离子反胶束或CTAB-庚烷/ 辛醇阳离子反胶束, 用磁力搅拌器以200 rpm 的速度进行搅拌5~10 min, 8000 rpm 离心10 min, 萃余液( 下层) 用考马斯亮兰法测定残留生姜蛋白酶酶活力和蛋白质量。
生姜蛋白酶的pI= 5. 4~ 5. 5, 在pH 5. 4 以上, 用AOT-异辛烷反胶束不能萃取出生姜蛋白酶, 但是却可以萃取出71. 86% 的杂蛋白。用CTAB 庚烷/ 辛醇反胶束二次萃取AOT-异辛烷萃余液, 其蛋白质萃取率为60125%。
双水相萃取 将不同分子量的聚乙二醇和成相盐按质量比配制一系列不同浓度及p H的双水相体系，每个双水相体系改变一个参数。由于备用溶液黏度很高，为减少误差，各组分含量均以质量分数（w）表示。加入一定量的聚乙二醇和下相盐后用去离子水调系统总质量至20g。充分溶解后倒入60m l的分液漏斗中进行分相，待分相完成后加入3m l的生姜蛋白酶粗酶液。将分液漏斗封口，反复倒置2～3m i n，每分钟10～15次，将体系各组分充分混合均匀后，室温下静置分相2h，使体系上下相分离完全。
资料表明，P E G-缓冲盐双水相萃取生姜蛋白酶的最佳萃取条件为：P E G分子量为4000，P E G浓度为20％，磷酸缓冲液的p H值为6.5，浓度为10％，生姜蛋白酶上相酶活力回收R和纯化倍数P F可达279.05％和1.86
生姜蛋白酶活力测定
绘制标准曲线
配制各取6 支刻度试管, 分别加入0. 4、0. 8、1.2、1. 6、2. 0、2. 4μg 牛血清白蛋白2 滴1:1 HCl,及3 mL 考马斯亮兰G-250 液, 室温下显色30 min后用蒸馏水定容至10 mL, 于595 nm 下测定OD595。以蛋白质质量为横坐标, OD595 为纵坐标绘制标
准曲线。其线性回归方程为:
Y= 01019X- 0. 001。
蛋白质浓度测定
取定量蛋白溶液, 加入pH= 6. 0 的磷酸缓冲液3 mL, 3 mL 考马斯亮兰G-250 液及2 滴1:1 HCl,室温下显色30 min 后用蒸馏水定容至10 mL, 于595 nm 下测定OD595, 根据标准曲线或线性回归方程计算蛋白质含量。
生姜蛋白酶活力
各取0. 2 mol/ L、pH= 6. 0 的磷酸缓冲液3 mL,分别加入0. 2%牛血清白蛋白溶液2 mL 及1 mL 生姜蛋白酶溶液, 于60 e 下反应15 min, 反应完成后
加入2 滴1B1 HCl 以终止反应, 对照则在加入生姜蛋白酶溶液之前加入同量1B1 HCl 以阻止反应发生。加入3 mL 考马斯亮兰G- 250 液显色30 分钟后定容至10 mL。分别于分光光度计上测定OD595,以反应前后OD595 差表示生姜蛋白酶活力。以每分钟内每mL 蛋白酶提取液水解1 μg 牛血清白蛋白为生姜蛋白酶的活力单位。生姜蛋白酶活力=
( 酶反应液OD595-空白OD595) / mL 酶液
·min- 1, 即μg牛血清白蛋白/ mL·min- 1。
1．***夹心式垂直板电泳槽：目前，夹心式垂直板电泳槽有很多型号，虽然设置略有不同，但主要结构相同，且操作简单，不易泄漏。同学们可根据具体不同型号要求进行操作。主要注意：***前，胶条、玻板、槽子都要洁净干燥；勿用手接触灌胶面的玻璃。
2．配胶：根据所测蛋白质分子量范围，选择适宜的分离胶浓度
3．制备凝胶板：
（1）分离胶制备：按表配制20ml 10%分离胶，混匀后用细长头滴管将凝胶液加至长、短玻璃板间的缝隙内，约8cm 高，用1ml 注射器取少许蒸馏水，沿长玻璃板板壁缓慢注入，约3—4mm 高，以进行水封。约30min 后，凝胶与水封层间出现折射率不同的界线，则表示凝胶完全聚合。倾去水封层的蒸馏水，再用滤纸条吸去多余水分。
（2）浓缩胶的制备：按表配制10ml 3%浓缩胶，混匀后用细长头滴管将浓缩胶加到已聚合的分离胶上方，直至距离短玻璃板上缘约0.5cm 处，轻轻将样品槽模板插入浓缩胶内，避免带入气泡。约30min后凝胶聚合，再放置20—30min。待凝胶凝固，小心拔去样品槽模板，用窄条滤纸吸去样品凹槽中多余的水分，将pH8.3 Tris-甘氨酸缓冲液倒入上、下贮槽中，应没过短板约0.5cm 以上，即可准备加样。
4．样品处理及加样
各标准蛋白及待测蛋白都用样品溶解液溶解，使浓度为0.5~1mg/mL，沸水浴加热3 分钟，冷却至室温备用。处理好的样品液如经长期存放，使用前应在沸水浴中加热1 分钟，以消除亚稳态聚合。一般加样体积为10－15μL（即2－10μg 蛋白质）。如样品较稀，可增加加样体积。用微量注射器小心将样品通过缓冲液加到凝胶凹形样品槽底部，待所有凹形样品槽内都加了样品，即可开始电泳。
将直流稳压电泳仪开关打开，开始时将电流调至10mA。待样品进入分离较时，将电流调至20－30 mA。当蓝色染料迁移至底部时，将电流调回到零，关闭电源。拔掉固定板，取出玻璃板，用刀片轻轻将一块玻璃撬开移去，在胶板一端切除一角作为标记，将胶板移至大培养皿中染色。
6．染色及脱色
将染色液倒入培养皿中，染色1h 左右，用蒸馏水漂洗数次，再用脱色液脱色，直到蛋白区带清晰，即用直尺分别量取各条带与凝胶顶端的距离。
1.相对迁移率mR =样品迁移距离（cm）/染料迁移距离（cm）
2.以标准蛋白质分子量的对数对相对迁移率作图，得到标准曲线，根据待测样品相对迁移率，从标准曲线上查出其分子量。
五、注意事项
1. 不是所有的蛋白质都能用SDS-凝胶电泳法测定其分子量，已发现有些蛋白质用这种
方法测出的分子量是不可靠的。包括：电荷异常或构象异常的蛋白质，带有较大辅基的蛋白质（如某些糖蛋白）以及一些结构蛋白如胶原蛋白等。例如组蛋白F1，它本身带有大量正电荷，因此，尽管结合了正常比例的SDS，仍不能完全掩盖其原有正电荷的影响，它的分子量是21,000，但SDS-凝胶电泳测定的结果却是35,000。因此，最好至少用两种方法来测定未知样品的分子量，互相验证。
2．有许多蛋白质，是由亚基（如血红蛋白）或两条以上肽链（如-胰凝乳蛋白酶）组成的，它们在SDS 和巯基乙醇的作用下，解离成亚基或单条肽链。因此，对于这一类蛋白质，SDS-凝胶电泳测定的只是它们的亚基或单条肽链的分子量，而不是完整分子的分子量。为了得到更全面的资料，还必须用其它方法测定其分子量及分子中肽链的数目等，与SDS-凝胶电泳的结果互相参照。
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glbpql0026
不一样，从结构功能方面分析好了
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