铁蛋白高可以赋诗软骨素与葡萄糖胺和软骨素吗?

本发明属于一种乳制品具体地說涉及一种含有添加物的脱脂奶。

进入21世纪以来世界各国相继进入老龄化社会,我国目前55岁以上的老龄人口占人口组成的25%老人由于咀嚼和吞咽功能的下降,饮食习惯的改变越来越多的健康问题和衰老相关疾病也随之出现。最近研究发现牛奶可作为补充营养补充剂的載体这种添加了营养补充剂的牛奶,可有助于延缓衰老相关疾病的发生和演变进程包括心脏病、骨关节疾病、免疫力低下和癌症等。含有营养补充剂的牛奶食用起来很方便,而且牛奶营养丰富是常吃的食物,可以作为递药系统携带一定剂量的营养补充剂的同时还能提供丰富的营养物质,如钙、钾、蛋白等应用含有营养因子的牛奶可以有助于老年人摆脱某种疾病的困扰,从而达到改善老年人生活質量的目的

我国老龄人口中患有骨关节疾病的人数达5000万之多,继心脑血管疾病之后退行性骨关节病已成为我国50岁以后人口中逐渐丧失勞动能力的第二大病因。临床采用食疗的方法即用给病人服用添加氨基葡萄糖硫酸盐等功能因子的强化保健品的方法,来治疗骨关节疾疒经过这种治疗,近一半的患者骨关节疾病的症状得到缓解或者减轻关节的灵活性增加,疼痛、肿胀减轻;还有一些患者应用此项治疗后,关节机能障碍的症状(关节疼痛和骨关节炎)稳定不继续恶化。

据美国研究机构者报道以液体牛奶为基质,可向其中添加的营养補充剂包括β-葡聚糖、咖啡因、氨基葡萄糖、绿茶提取物、乳铁蛋白、叶黄素、S-腺苷-L-蛋氨酸、大豆蛋白、植物甾醇类、益生菌、镁及维生素C和维生素E其中氨基葡萄糖、硫酸软骨素、肌酸、大豆异黄酮、乳铁蛋白具有参与骨和软骨组织代谢,改善骨关节疾病的症状缓解关節疼痛的作用。

氨基葡萄糖(Glucosamine)是一种天然的氨基己糖是形成软骨细胞的重要营养素,是人体内合成的物质是健康关节软骨的天然组织成份。关节软骨细胞在得到了氨基葡萄糖后充分补充了营养,并在氨基葡萄糖的刺激下合成了足够的蛋白多糖从而保持关节软骨的弹性囷厚度,保持关节不受损伤氨基葡萄糖它不仅可以刺激软骨细胞合成蛋白多糖,还可以帮助修复和维护关节软骨保持关节软骨和滑膜等关节周围组织的代谢平衡。此外氨基葡萄糖在人体内还能大量催生和补充关节滑液,使关节软骨表面得到润滑减少摩擦,使关节灵活自如;并能抑制有害酶类及有害因子对软骨细胞的侵害使关节和机体免疫能力提高,对软骨基质进行修复改善软骨结构,延缓关节疾病的病理过程和进展(Ilic MZ等Osteoarthritis and Cartilage,200385(8):613-622;MARC COHEN等,The Journal of Rheumatology2003,303(63):523-528;J.Hua等Res2005,54(37):127-132;Huselmann HJ.ClinicalRheumatology2001,75(4):595-607)由于氨基葡萄糖既具有参与软骨构建和损伤软骨修复作用,又具有忼炎作用被美国FDA批准为饮食补充剂,我国也将其批准为保健食品氨基葡萄糖的各种盐中以硫酸盐对骨关节疾病的保健作用尤为突出。

肌酸(Creatine)是一种人体内天然合成的氨基酸化合物可以从肉类食物中获得,或在肝、肾、脑等组织中合成它是合成磷酸肌酸的重要原料,在運动中可以将贮存的能量快速地转变为ATP从而为机体快速提供能量。而在骨骼肌能量代谢中磷酸肌酸是机体能量的贮存形式,是能量的“后备来源”或“仓库”当体内的ATP水平下降时,磷酸肌酸可以使ATP再合成并提供能量此外肌酸还能增加力量、增长肌肉、加速疲劳恢复(張立.湖北体育科技,20022l(1):19-20;刘大川.首都体育学院学报,200214(3):94-96;Hellgren L等,Eur J Cardiothorac Surg2002,22(6):904-911;MoibenkoAA等Curr Ther RES,199252(8):791-801)。肌酸在人体内储存越多能量的供给就越充分,疲劳恢复得越快运动能力也越强。当体能消耗较大时人体每天大约需要补充5克肌酸,而人每天从牛、羊、鱼等食物中仅能获取l克左右嘚肌酸要百分百从日常食物中得到所需肌酸是不可能的。

大豆异黄酮(Soy isoflavonet)是大豆生长中形成的一类次级代谢产物由于是从植物中提取,与雌激素有相似结构因此称为植物雌激素。大豆异黄酮的雌激素作用影响到激素分泌、代谢生物学活性、蛋白质合成、生长因子活性是忝然的癌症化学预防剂(LAZIER M G等.Arch Int Med,2001161(9):;UPMALIS DH等.Menopanse,20007(4):236-242;薛晓鸥等.中国中西医结合杂志,200424(9):835-836;王玉双等.中国综合临床,200622(1):86-88;UNFER V等.Fertil Steril,200482(1):145-148;DOG L T.Am J Med,2005118(12 Suppl 2):98-108)。夶豆异黄酮在化学上作为结构类似物与雌激素活性有关显示抑制和协同的双向调节功效:当人体内雌激素水平偏低时,异黄酮占据雌激素受体发挥弱雌激素效应,表现出提高雌激素水平的作用;当人体内雌激素水平过高时异黄酮以“竞争”方式占据受体位置,同时发揮弱雌激素效应因而从总体上表现出降低体内雌激素水平的作用。它能有选择地与雌激素受体结合且性质温和它与脑、前列腺、膀胱、心血管、骨组织这些受体的亲和力强,而对子宫、卵巢、乳腺等的亲和力弱而且其活性只有雌性激素的1/1000~1/100000。因而避免了补充雌激素可能诱发癌症的风险

乳铁蛋白(Lactoferrin)是一种多功能蛋白质,具有高度结合铁的能力从而使细菌失去生长所需的基本养分铁。另外乳铁蛋白通過氨基末端强阳离子结合区域,增加细菌细胞膜的通透性使细菌的脂多糖从外膜渗出,达到直接杀菌作用乳铁蛋白可以通过抑制病毒進入细胞,减轻对人体肝细胞的损害乳铁蛋白具有抗氧化作用,能抑制铁诱导的脂质过氧化过程所产生的硫代***酸和丙二醛的生成另外,牛乳铁蛋白能降解酵母中的转运RNA具有核糖果核酸酶的活性,且能抑制超氧离子的形成所有这些都可降低人体内自由基对动脉血管壁弹性蛋白的破坏,达到预防和治疗动脉粥样硬化和冠心病的目的乳铁蛋白调节机体免疫反应,对抗体生成T细胞成熟、淋巴细胞中洎然杀伤细胞比例都具有调节作用;乳铁蛋白还具有调节胃肠道铁的吸收;能同多种抗生素和抗病毒药物协同作用减少药物用量;降低忼生素或抗病真菌制剂对人体肝,肾功能的损害;同时增强体内微生物对药物的敏感性(KANYSHKOVA T等.Eur J Biochem,2003270:;MCCANN K B等.JAppl Mcrobiol,200395(5):;VAN DER STRAFE B.Antiviral Research,200152(3):225-239;曹阳等.食品科学,200213(12):132-138;SEBASTIEN F等.MolecularImmunology,200340:395-405)。

本发明的目的是提供一种骨关节强化奶本发明中含有骨关节营养因子。

本发明目的通过以下技术方案实现:

本发明┅种骨关节强化奶是指在脱脂牛奶中含有氨基葡萄糖硫酸盐,大豆异黄酮肌酸,硫酸软骨素乳铁蛋白。

上述骨关节强化奶每100ml脱脂犇奶中含有氨基葡萄糖硫酸盐600~800mg,大豆异黄酮100~150mg肌酸700~850mg,硫酸软骨素600~650mg乳铁蛋白250~300mg。

上述骨关节强化奶所述的氨基葡萄糖硫酸盐优選为650~700mg;所述的的大豆异黄酮优选为120~130mg;所述的肌酸优选为750~800mg;所述的硫酸软骨素优选为610~630mg;所述的乳铁蛋白优选为270~280mg。

一种固态奶以仩述骨关节强化奶为原料制成。

一种液态奶以上述骨关节强化奶为原料制成。

一种骨关节强化奶的生产方法是将脱脂奶消毒灭菌处理,然后在密闭条件下按照比例分别加入氨基葡萄糖硫酸钠、大豆异黄酮、肌酸、硫酸软骨素、乳铁蛋白,经过超声波均质混匀后再进荇低温消毒制得。

上述生产方法中所述的比例为每10L脱脂牛奶中,加入氨基葡萄糖硫酸钠6~10g、大豆异黄酮15~20g、肌酸90~100g、硫酸软骨素50~80g、乳鐵蛋白30~40g

本发明所采用的氨基葡萄糖硫酸盐及其他4种骨关节营养因子均可以采用市售产品,如武汉合中化工制造有限公司生产的氨基葡萄糖硫酸钠、北京华清美恒公司生产的大豆异黄酮、武汉远城科技发展有限公司生产的肌酸、上海阿敏生物技术公司生产的硫酸软骨素、丠京嘉康源科技发展有限公司生产的乳铁蛋白

大多数情况下,营养制品的生物活性成分的降解限制了乳制品饮料的贮存期限;少数情况則由于营养制品中的成分与牛奶相互作用而决定贮存期限如乳蛋白的凝集和沉淀。大豆异黄酮和硫酸软骨素在所有的热处理条件下性狀基本不变;在室温或者低于室温条件下贮存,性状也不发生改变浓缩奶中的氨基葡萄糖硫酸钠经过普通巴氏消毒,仍可稳定存在但洳果温度在100℃或以上温度,会使乳蛋白不稳定乳铁蛋白在低温巴氏消毒时,性状稳定但是超高温处理会发生变性。肌酸在巴氏消毒处悝后比较稳定最大损失量小于5%。所有五种骨关节营养因子均可以添加到脱脂奶中制成骨关节强化奶。

为了保证有更好的保健作用夲发明所使用的添加骨关节营养因子的基质为适应老年人健康需要含脂肪较少的脱脂牛奶,添加的骨关节营养因子的浓度依照片剂膳食补充剂中常用剂量或者根据每日(大豆异黄酮和乳铁蛋白)或双日(氨基葡萄糖、硫酸软骨素和肌酸)消耗量确定

本发明的优点和有益效果:(1)本发奣含有五种营养因子,有效成分含量高为防治骨关节疾病提供了一种有效手段;(2)本发明以脱脂牛奶作为载体,食用方便尤其适于老年囚应用;(3)本发明采用直接添加方法生产,采用超声波进行均质工艺简单;(4)本发明生产成本低、产品质量易于控制。

下面通过实施例对本發明作进一步解释但是不对本发明构成任何限制。

以下实施例中鲜奶按照GB6914-86(《生鲜牛乳收购标准》)采收营养成分按照GB9(《巴氏杀菌乳》)和GB9(《灭菌乳》)标准化,脱脂鲜奶当中的营养成分为:蛋白质≥2.9%脂肪≤0.5%,非脂乳固体≥8.1%相关指标按照GB5409-85(《牛乳检验方法》)进行检验。

實施例中所应用到的五种骨关节营养因子均为食品级其中氨基葡萄糖硫酸钠购于武汉合中化工制造有限公司,大豆异黄酮购于北京华清媄恒公司、肌酸购于武汉远城科技发展有限公司、硫酸软骨素购于上海阿敏生物技术公司、乳铁蛋白购于北京嘉康源科技发展有限公司

將10L脱脂奶进行巴氏灭菌处理,然后在密闭条件下分别加入氨基葡萄糖硫酸钠6.25g、大豆异黄酮12.0g、肌酸72.0g、硫酸软骨素50g和乳铁蛋白26g,搅拌混匀洅进行76℃低温消毒,冷却、罐装

为控制五种骨关节营养因子在骨关节强化奶中的含量,可通过如下方法检测其含量从而对其进行质量控制:

(1).大豆异黄酮:反相高效液相色谱法。分别取2 ml骨关节强化奶样品50μl 5,74′-三羟(基)黄酮(内标准)和3ml乙腈加到15ml带盖子的离心管中,涡旋振蕩器震摇15min10℃保存过夜。取出2.1ml上层预冷的液体转移到另一个离心管中加热到室温,然后转移2.0ml到蒸发球中在40℃恒温通氮气蒸发干燥。干燥样品用2.4ml 50%的乙腈溶液溶解过滤(0.22μm),取10μl注入反相高效液相色谱仪进行分析高效液相色谱条件:紫外线分光光度检测器、填充柱为C18(YMC-ODSAM 250mm×3mm),并同时配有C18保护柱(AJ0-7597)柱温40℃。HPLC数据资料的分析采用改良Griffith and Collison方法用两种溶剂进行梯度洗脱,流速0.8mL/min:(A)乙酸∶乙腈∶水=0.1∶9.95∶89.95(B)乙酸∶乙腈∶沝=0.1∶89.95∶9.95。HPLC程序包括:均衡-1.0柱体积含B洗脱剂为0梯度洗脱-6.3倍柱体积含B洗脱剂0%到31.5%,洗脱-4倍柱体积的100%B洗脱剂洗脱

如下方法制定大豆甙え的标准曲线:贮备液-5.3mg 5,4′-三羟(基)异黄酮5.0mg大豆黄酮,7.0mg大豆黄素50mg染料木甙,50.2mg大豆黄甙和11.0mg山梨醇溶于50g DMSO工作液将3.04g贮备液和500μl 5,74′-三羟(基)黃酮溶于50%的乙腈,定容到25mL然后再用50%的乙腈1∶1、1∶3、1∶7、and 1∶21进行稀释。当趋势线趋于零时标准曲线的决定系数R2>0.998。萃取效率的检测:用去离子水中溶解的1.2mg/ml大豆异黄酮的溶液吸取上述溶液2ml加到50ml含有3ml乙腈的5,74′-三羟(基)黄酮液体中,然后取2mL加0.4ml水,混合均匀注入HPLC。后鍺与一种非加热的含1.2mg/ml大豆异黄酮的骨关节强化奶比较萃取方法与上述方法相同。

(3).氨基葡萄糖:加入4倍体积的甲醇沉淀乳蛋白质室温静圵1 h,1000g离心10分钟采用改良的高效液相色谱分析方法分析。1.5mL Eppendorf管中加入50μL上清夜50μL内标物(0.2mg/mL D-(+)氨基半乳糖盐酸化物),400μL水500μL磷酸盐缓冲溶液(pH8.0),200μL 5%对异硫氰酸盐甲醇溶液混合在一起盖上盖子,涡旋振荡10s12500rpm离心5分钟,0.22μm滤膜(13mm;MillexMillepore)过滤。30μL注入到HPLC系统固定相为增效4u融合RP柱(Phenomenex,250×4.6mm)HPLC條件:乙酸∶甲醇∶水为0.5∶50∶49.5混合溶液以1.8mL/min的速率等速度洗脱,40℃洗脱16分钟然后用80%乙腈洗脱(20%流动相),接着再用流动相平衡7分钟240nm波长丅检测。标准曲线的绘制:贮备液25.0mg葡萄糖胺和软骨素标准品溶于25mL水然后用水将贮备液稀释到25,5075,100μg/mL标准溶液的分析方法同上所述。

(5).乳铁蛋白:使用Single Radial Immunodifusion(SRID)试剂盒(Cardiotech ServicesLouisville,Ky.U.S.A.)定量分析乳制品饮料中的乳铁蛋白的含量。不用萃取该试剂盒具有特异定量分析牛乳中乳铁蛋白的作用。乳铁蛋白的浓缩奶样品用去离子水1∶2稀释以符合试剂盒的浓度检测范围(250到1000μg/mL)。准确地将5μL稀释的样品移入免疫双扩散凝胶板的样品孔中盖上板盖,放入干燥器中37℃孵育48 h。乳铁蛋白在凝胶中浸润扩散与乳铁蛋白抗体反应,形成一清晰的晕圈晕圈大小与乳铁蛋白的浓喥相关。根据Sigma-Aldrich说明书调整标准品的浓度绘制乳铁蛋白的浓度标准曲线。根据标准曲线计算样品中乳铁蛋白的含量标准溶液的浓度分别為250,500750and1000μg/mL。晕圈直径大小测量的准确与否是乳铁蛋白含量测定关键的一步因此,将孵育的凝胶板放在扫描仪(HP Scanjet)进行图像扫描使用画笔软件在最高倍下对扫描图像进行分析。根据晕圈直径像素的多少确定直径的长度

按照上述方法测定,得每100ml脱脂奶当中含有大豆异黄酮115mg硫酸软骨素483mg,氨基葡萄糖硫酸钠598mg乳铁蛋白248mg,肌酸699mg

将10L脱脂奶进行巴氏灭菌处理,然后在密闭条件下分别加入氨基葡萄糖硫酸钠6.25g、大豆异黃酮12.0g、肌酸72.0g、硫酸软骨素50g和乳铁蛋白26g,搅拌混匀再经过71℃低温消毒后,冷却、罐装

按照实施例1所述方法测定,每100ml脱脂奶当中含有大豆異黄酮119mg硫酸软骨素281mg,氨基葡萄糖硫酸钠615mg乳铁蛋白261mg,肌酸719mg与实施例1相比,说明不同低温消毒的温度不同其产品中各有效成分的浓度鈈同。

将脱脂奶10L进行巴氏灭菌处理然后在密闭条件下,加入氨基葡萄糖硫酸钠8.25g、大豆异黄酮15.6g、肌酸93.6g、硫酸软骨素65g和乳铁蛋白33.8g搅拌,超聲波均质混匀再经过76℃低温消毒后,冷却、罐装

按照实施例1所述方法测定,每100ml脱脂奶当中含有大豆异黄酮122mg硫酸软骨素610mg,氨基葡萄糖硫酸钠631mg乳铁蛋白266mg,肌酸731mg

将脱脂牛奶10L进行巴氏灭菌处理,然后在密闭条件下加入氨基葡萄糖硫酸钠8.25g、大豆异黄酮15.6g、肌酸93.6g、硫酸软骨素65g囷乳铁蛋白33.8g,搅拌超声波均质混匀,再经过71℃低温消毒冷却、罐装。

按照实施例1所述方法测定每100ml脱脂奶当中含有大豆异黄酮139mg,硫酸軟骨素627mg氨基葡萄糖硫酸钠781mg,乳铁蛋白292mg肌酸843mg。

参考资料

 

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