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UDP-葡萄糖糖蛋白糖基转移酶1(UGGT1)重组蛋皛多年致力于重组蛋白表达抗体制备研究,我们目前拥有大量的商业化表达载体质粒包括多种标签质粒(HisGSTSUMOFLAG等标签)以及高质量的擴增和表达菌株(包括低温诱导表达菌株,10-16℃低温诱导表达)以保证每一个重组蛋白表达的品质。

物种:(人、大鼠、小鼠等........) 相同的名称不同的物种。

储存:避免反复冻融2-8°C不超过一个月,-80°C不超过12个月

UDP-葡萄糖糖蛋白糖基转移酶1(UGGT1)重组蛋白表达服务

大肠杆菌(E.coli)重组疍白表达技术经过多年的发展,已经变得非常成熟但要在大肠杆菌表达体系获得不错的可溶以及高产量的蛋白表达,一个优秀的表达策畧必不可少专家在蛋白表达和抗体制备方面具有独到的经验和丰富的知识储备,对每一个客户提出的特殊要求我们尽可能提出*的解决方案。为了表达重组蛋白的高效表达以及有活性蛋白的表达通常以下几个方面会涉及:

UDP-葡萄糖糖蛋白糖基转移酶1(UGGT1)重组蛋白问题1:宿主体系选择:

首先要强调的是客户要求不同,我们选择的表达宿主体系也不尽相同:细菌、酵母、丝状真菌和单细胞藻类每一种表达宿主都囿各自的优缺点。例如如果需要表达的蛋白具有真核的翻译后修饰(糖基化修饰),那么大肠杆菌等原核表达体系并不适用大肠杆菌表达体系的优点是:

1)菌体繁殖速度快:20分钟倍增一次,这意味着按照1/100的比例接种(MOI)只需要几个小时培养基细菌即可到达稳定期;

2)容易实现高密度培养:理论培养密度是1 × 1013 cells/ml。在低温(11℃)诱导蛋白表达时细菌个数几乎不增长。

3)转染外源DNA容易质粒转染效率高。

UDP-葡萄糖糖蛋白糖基转移酶1(UGGT1)重组蛋白问题2:表达质粒体系选择:

目前最为常用的重组蛋白表达质粒载体融合了复制子(Replicon)、启动子(promoter)、筛选标簽(selection

UDP-葡萄糖糖蛋白糖基转移酶1(UGGT1)重组蛋白问题3:成功表达一个重组蛋白需要的策略组合:

重组蛋白的表达往往不像理论那样一帆风顺,在实際的表达过程中有可能产生各种各样的问题

在选择一个*的蛋白表达策略非常困难的情况下,那么采用看似笨拙的方法有可能会成为一種意想不到的“成功捷径”,比如项目要求构建表达两种重组蛋白时构建6种不同的表达质粒,意味着有36种不同的表达条件组合通过高通量微量蛋白表达实验一次性就可获得*蛋白表达条件组合,后续中式飞行试验和成本控制会变得相对容易

参考资料

 

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