叶菜中叶酸含量的HPLC测定条件优化及不同处理方式对叶酸保留效果研究--《西北农林科技大学》2016年硕士论文
叶菜中叶酸含量的HPLC测定条件优化及不同处理方式对叶酸保留效果研究
【摘要】：叶酸是人体在利用糖分和氨基酸时的必要物质,是机体细胞生长和繁殖所必需的物质,它对人体的健康作用日益被人们所认识。本文以常见的叶菜类蔬菜菠菜、生菜、白菜等为试材,研究高相液相色谱法测定叶酸条件以及不同处理方式下叶酸含量,得出如下结论:1.试验中通过对液相条件流动相、流速、柱温、波长等条件的优化,确定了高效液相色谱法测定叶菜中叶酸以及五甲基四氢叶酸的检测方法。液相条件为:流速0.4ml/进样量20μL;检测波长285柱温25℃;梯度洗脱条件:0min-5min6%乙腈+94%磷酸盐缓冲液;5min-25min由原始比例线性变化到25%乙腈+75%磷酸盐缓冲液,渐变得到该比例后维持2min,在27min-28min流动项比例线性变回原始的浓度比例。验证试验表明该方法具有灵敏度高,准确度好,线性范围宽(r0.9996)的特点。2.对叶酸的提取进行了单因素试验和正交试验。单因素主要研究提取温度、提取时间、料液比、提取次数对提取量的影响。由正交试验得出最佳的叶酸提取条件是:温度为90℃,提取时间为10min,料液比为1:5,提取次数为3次。该提取工艺比较简单,提取率达到97%。3.通过研究三种处理方式(清炒、水煮、鲜切)下八种蔬菜:菠菜、小白菜、大白菜、甘蓝、紫甘蓝、生菜、青菜、油麦菜中叶酸含量,得出叶菜在日常生活中最佳食用方式。保留率依次为:清炒(55.66±5.30)%、水煮(63.77±4.88)%、鲜切(83.275±2.45)%,变异系数分别为:7.65、9.52、2.94。由此可见鲜切较其他两种方式对叶酸保留效果更佳,鲜切作为新兴的即食蔬菜加工方式会成为一种新的时尚。在室温和4℃贮藏,后者叶酸保留效果较好。在贮藏前两天,4℃贮藏中叶酸降低慢,但是在两天之后降低较快,所以新鲜蔬菜买回来不食用时应该存放在4℃条件下才能更好吸收利用蔬菜中含有的叶酸,白菜除外,宜在两天内食用。
【关键词】：
【学位授予单位】：西北农林科技大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2016【分类号】：R151.3;O657.72【目录】：
摘要5-6ABSTRACT6-11第一章 文献综述11-19 1.1 引言11-14
1.1.1 叶菜在消费饮食中的地位11-12
1.1.2 叶酸简介12-14 1.2 叶酸生理活性研究进展14
1.2.1 叶酸的代谢14
1.2.2 叶酸的功能14 1.3 叶酸测定方法研究进展14-17
1.3.1 微生物法15
1.3.2 紫外分光光度法15
1.3.3 荧光分析15
1.3.4 高效液相色谱法15-17 1.4 加工方式对叶酸含量的影响17 1.5 本课题研究的目的意义17-18 1.6 本课题主要研究内容18-19
1.6.1 高效液相法测定叶菜中叶酸含量18
1.6.2 对叶酸的提取条件进行优化研究18
1.6.3 研究不同处理方式以及贮藏对叶酸含量的影响18-19第二章 高效液相色谱法测定叶酸含量19-30 2.1 材料19-20
2.1.1 供试材料19
2.1.2 试剂19
2.1.3 仪器与设备19-20 2.2 方法20-22
2.2.1 色谱条件20
2.2.2 标准溶液配制20
2.2.3 样品制备20
2.2.4 叶酸的定性定量分析20-21
2.2.5 检测限和定量限21
2.2.6 回收试验21
2.2.7 精密度试验21
2.2.8 稳定性试验21
2.2.9 质量控制21-22 2.3 结果与分析22-29
2.3.1 色谱条件的选择22-25
2.3.2 定性定量分析25-27
2.3.3 测定方法的验证27-29 2.4 讨论29 2.5 小结29-30第三章 提取条件优化研究30-38 3.1 材料30-31
3.1.1 供试材料30
3.1.2 试剂30-31
3.1.3 仪器与设备31 3.2 方法31-33
3.2.1 提取工艺31
3.2.2 提取工艺操作要点31
3.2.3 色谱条件31-32
3.2.4 菠菜中叶酸HPLC测定方法32
3.2.5 叶酸以及五甲基四氢叶酸提取因素试验设计32-33 3.3 结果与分析33-36
3.3.1 提取时间的对提取效果的影响33
3.3.2 提取温度对提取效果的影响33-34
3.3.3 料液比对提取效果的影响34-35
3.3.4 提取次数对提取效果的影响35
3.3.5 正交试验35-36 3.4 讨论36-37 3.5 小结37-38第四章 加工处理对叶酸含量的影响38-46 4.1 材料38-39
4.1.1 供试材料38
4.1.2 化学试剂38
4.1.3 仪器与设备38-39 4.2 方法39-41
4.2.1 色谱条件39
4.2.2 样品制备39
4.2.3 样品加工39-40
4.2.4 对照组处理40
4.2.5 存放时叶酸测定40-41 4.3 结果与分析41-45
4.3.1 对照组叶酸含量41
4.3.2 加工处理组与对照组叶酸含量对比41-42
4.3.3 贮藏过程中八种叶菜中叶酸含量变化42-45 4.4 讨论45 4.5 小结45-46第五章 结论与展望46-48 5.1 液相条件的优化研究46 5.2 提取条件的确定46 5.3 多种处理条件下叶酸测定46-47 5.4 展望47-48参考文献48-52致谢52-53作者简介53
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京公网安备75号我国渔民在南海海域捕捞权保护问题研究--《福州大学》2014年硕士论文
我国渔民在南海海域捕捞权保护问题研究
【摘要】：在现代国际海洋法制度下,一国渔民在海洋,特别是一些敏感海域进行日常捕捞作业不再单纯只是渔民个人的行为,而是被赋予了宣示一国海洋主权和管辖权的政治色彩。世界各沿海国家都把海洋生物资源看作是一种重要的战略资源,竞相争夺。面对愈演愈烈的南海侵渔事件,我国不仅应当重视对本国渔民个人捕捞权的保护,更应该将其视为国家海洋权利的一项重要内容,并放置于国际关系中加以争取与维护。本文主要采取比较分析,查阅文献资料的研究方法,较全面地分析我国渔民在南海海域捕捞权保护问题,文章总共分为五个部分。文章的引言部分,主要是对文章写作背景和意义的介绍。由于渔民捕捞行为在国际海洋法制度下的特殊性,面对近年来在南海海域我国渔民不断受到周边国家袭扰事件,而国内外对于渔民捕捞权保护制度缺失的现状,因此,对渔民捕捞权保护问题的研究具有一定的现实意义和必要性。第一章是关于在南海海域我国渔民捕捞权基本概况的介绍。通过对当前不同国家涉及捕捞权的相关立法比较分析,从而明确我国南海渔民享有捕捞权的内涵和性质。进而对我国渔民享有捕捞权的海洋法基础、受侵根源及受侵现状进行一定分析,得出对我国渔民捕捞权的保护具有现实性意义和必要性。第二章是对当前国际社会各国有关解决渔业纠纷实践进行简要的回顾分析,为保护我国渔民在南海海域捕捞权,解决我国与南海各周边国家愈演愈烈的渔业纠纷寻求可供借鉴的成功经验。第三章是在借鉴他国解决渔业纠纷的成功实践经验的基础上,结合南海渔业纠纷自身存在的特点,对我国南海渔民捕捞权的保护不仅需要国家行为做出保障,也需要渔民群体自身的完善和发展,提高自我竞争力。此外,在作为渔业纠纷根源的南海海洋划界争议最终达成一致前,可以先行开展南海渔业合作的过渡性渔业安排,并提出了具体的合作方案。文章的最后,再次强调了南海周边各国对我国渔民的侵渔行为,其实质是企图通过扩张本国的渔业管辖权而达到侵犯我国海洋主权,扩大其本国海洋管辖权的目的。总结文章针对我国渔民南海捕捞权保护问题所提出的建议具有一定的可性性和现实意义。但在实际操作过程中,仍须考虑各种不确定因素,进一步斟酌完善。
【关键词】：
【学位授予单位】：福州大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2014【分类号】：D993.5【目录】：
摘要3-4Abstract4-8引言8-10第一章 我国渔民在南海海域的捕捞权基本概况10-28 一、渔民捕捞权的概念和性质10-13
(一) 捕捞权的概念10-12
(二) 捕捞权的性质12-13 二、我国渔民在南海海域享有捕捞权利的国际海洋法基础13-20
(一) 海洋自由的应有之义13-14
(二) 传统捕捞权的历史支持14-16
(三) 领海制度下的捕捞权16-18
(四) 专属经济区制度下的捕捞权18-20 三、我国渔民在南海海域捕捞权受侵根源：海洋划界争议20-24
(一) 南海海洋划界争议概况20-21
(二) 争端各方的主张及其法律依据21-24 四、我国渔民在南海捕捞权受侵现状24-27
(一) 严重威胁我国渔民的人身安全与自由24-25
(二) 对我国渔民造成巨大的财产损失25-26
(三) 我国渔民南海传统捕鱼场不断丧失26
(四) 掠夺我国渔业资源的非法侵渔行为频发26-27 五、小结27-28第二章 当前国际社会可供借鉴的渔业纠纷实践28-41 一、西方国家关于渔业纠纷等海洋争端解决的经验28-32
(一) 英国和美国间的“北大西洋沿岸渔业权案”28
(二) 冰岛与英国、联邦德国间的“渔业管辖权案”28-29
(三) 澳大利亚与东帝汶之间的“帝汶海争端”29-30
(四) 俄罗斯与挪威间关于巴伦支海和北冰洋海域的划界争端30-32 二、中国与周边国家渔业争端解决的实践经验32-38
(一) 中日、中韩渔业合作协定32-34
(二) 《中越北部湾渔业合作协定》34-36
(三) 《南海各方行为宣言》36-38 三、已有的南海共同开发方案38-40
(一) “环形方案”38-39
(二) “一人一份”方案和“人人有份”方案39
(三) “南海海域三层级”方案39-40 四、小结40-41第三章 保护我国渔民在南海海域捕捞权的建议41-48 一、坚持和平解决海洋争端的国际法原则41-42
(一) 搁置主权争议原则41-42
(二) 各争议方自我克制原则42
(三) 避免南海争端国际化原则42 二、维护我国南海渔民捕捞权的国际举措42-46
(一) 利用《联合国海洋法公约》维护我国渔民切身利益42-43
(二) 积极推进南海区域渔业合作发展43-46 三、维护我国南海渔民捕捞权的国内举措46-47
(一) 政府的资金和政策支持46
(二) 组建南海渔业自律组织46-47
(三) 促进我国南海渔民自我完善和发展47 四、小结47-48结语48-49参考文献49-52谢辞52-53个人简历和在学期间研究成果53
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京公网安备75号具有FtsZ抑制活性的小分子香草醛类衍生物--《南京大学》2014年硕士论文
具有FtsZ抑制活性的小分子香草醛类衍生物
【摘要】：近些年来,多重耐药革兰氏阳性和革兰氏阴性致病菌的患病率呈明显上升趋势,导致出现了一系列威胁生命的感染性疾病并成为导致人类死亡的第二大因素,现在很多有效的药物也失去了治疗作用。因此寻找新的抗菌靶点变得越来越紧迫。最近很多研究证明FtsZ(丝状的温度敏感蛋白Z)是一种很有前途的靶蛋白,这是一种高度保守的细菌细胞骨架蛋白,也是一种跟微管蛋白类似的GTP酶。FtsZ蛋白几乎存在于所有的细菌中,并且在细菌分裂的早期起着非常关键的作用。该蛋白形成Z环后吸引一系列相关蛋白,最后收缩导致细胞分裂。因此作用于FtsZ蛋白的药物能够阻止细菌的二次分裂并导致细菌的死亡。香草醛(4-羟基-3-甲氧基苯甲醛)是一种膳食调味剂,香草醛因其具有抗菌活性,用其作为天然防腐剂已经引起越来越多人的关注,香兰素已被研究证明其还有抗突变,抗真菌活性等许多的活性。席夫碱为包含-C=N-结构的化合物,通常是由伯胺和活性羰基合成,众所周知席夫碱含有抗细菌,抗真菌,抗癌和抗病毒活性。目前这类化合物中的亚胺基团已经被证明对席夫碱的生物活性起着非常重要的影响。鉴于以上发现,借助于计算机辅助药物设计技术,用香草醛与各种取代的芳香伯胺设计合成了21个香草醛类衍生物4a-4u,并对所有的化合物进行了大肠杆菌ATCC35218,铜绿假单胞菌ATCC13525,枯草芽孢杆菌ATCC6633和金***葡萄球菌ATCC6538的抗菌活性评价。而且对四种细菌均具有比较好的抗菌活性的药物进行了FtsZ蛋白抑制活性的测试,其中化合物4u表现出最强的抗大肠杆菌ATCC35218的活性,最小抑菌浓度MIC值为0.28μg/mL,比阳性对照卡那霉素的抗菌活性还要强,卡那霉素的最小抑菌浓度MIC值为0.4μg/mL。化合物4u也展现了最强的FtsZ蛋白抑制活性,其聚合IC50值为2.1μM,阳性对照氯霉素的聚合IC50值为104.00 μM。为了进一步了解合成化合物与靶蛋白FtsZ活性位点的结合模式,对它们进行了小分子对接模拟实验,结果表明化合物4u与靶标蛋白FtsZ具有最低能量结合值。化合物4u与FtsZ蛋白通过五个键相互作用,此外FtsZ蛋白第143位天冬氨酸所带的正电荷与化合物4u的苯环形成π-cation相互作用。
【关键词】：
【学位授予单位】：南京大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2014【分类号】：TQ460.1【目录】：
缩略语表6-7摘要7-9Abstract9-11第一章 文献综述11-23 1.1 FtsZ抑制剂研究现状11-17
1.1.1 FtsZ在细菌细胞分裂中的作用11-12
1.1.2 FtsZ简介12-15
1.1.3 FtsZ抑制剂的研究进展15-17
1.1.3.1 抑制FtsZ的GTP酶活性15
1.1.3.2 影响FtsZ原丝形成15-16
1.1.3.3 抑制Z环的组装16-17 1.2 香草醛类化合物的研究进展17-19
1.2.1 医药领域17-18
1.2.1.1 香草醛的抗菌作用17-18
1.2.1.2 香草醛的抗癌作用18
1.2.1.3 香兰素的抗氧化与抗炎作用18
1.2.2 其它领域18-19 1.3 席夫碱类化合物的研究进展19-23
1.3.1 席夫碱的合成机理19
1.3.2 席夫碱的生物活性19-23
1.3.2.1 席夫碱的抗疟活性19-20
1.3.2.2 席夫碱的抗细菌活性20-21
1.3.2.3 席夫碱的抗真菌活性21-22
1.3.2.4 席夫碱的抗病毒活性22-23第二章 目标化合物的设计23-35 2.1 FtsZ的晶体结构23-24 2.2 文献调研24-28
2.2.1 席夫碱结构的引入24-25
2.2.2 苯-1-甲氧基-2-羟基骨架结构的引入25-28 2.3 药物设计及合成思路28 2.4 分子对接模拟设计28-35
2.4.1 Discovery Stutio分子模拟简介28-30
2.4.2 Discovery Stutio分子对接实验方法30-32
2.4.2.1 实验软件及蛋白30
2.4.2.2 实验步骤30-32
2.4.3 分子对接虚拟筛选的结果32-35第三章 香草醛类衍生物的化学合成35-44 3.1 实验仪器及试剂35-36
3.1.1 实验仪器35
3.1.2 实验试剂35-36 3.2 香草醛类衍生物的合成实验36-44
3.2.1 合成路线36-38
3.2.2 结构表征38-44
3.2.2.1 化合物4a-4u的~1H NMR及MS参数38-41
3.2.2.2 化合物4u的单晶X-射线衍射分析41-44第四章 香草醛类衍生物的生物活性筛选44-52 4.1 抗菌活性实验44-46
4.1.1 菌株44
4.1.2 试剂及仪器44
4.1.3 抗菌活性实验步骤44-46 4.2 FtsZ抑制活性实验46-48
4.2.1 FtsZ抑制活性实验材料46
4.2.2 FtsZ抑制活性实验方法46-48
4.2.2.1 FtsZ的纯化46-47
4.2.2.2 对FtsZ的聚合光散射法47
4.2.2.3 FtsZ抑制剂的研究47-48 4.3 生物活性实验结果与讨论48-51
4.3.1 抗菌活性48-50
4.3.2 FtsZ抑制活性50
4.3.3 统计学分析50-51 4.4 结论51-52参考文献52-59硕士期间发表论文情况59-60致谢60-61
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