当前位置： >>
血液标本采集技术文档 (2)
血液标本的采集技术一、动脉采血术：动脉采血术是通过经皮动脉穿刺，采集动脉血液标本的方法，主要用于动脉血气分析，可选择桡 动脉、肱动脉、股动脉及足背动脉进行穿刺。 1、用物准备：①基本用物：基础用物（治疗盘铺无菌巾、皮肤消毒剂、无菌棉签、无菌纱布、止血钳、弯盘） 、注 射器、胶布、必要时备软枕、笔等。 动脉血气分析标本采集用物：2～5ml 注射器抽吸肝素钠注射液，将活塞来回抽动，使内壁沾匀肝素，然后排 尽肝素溶液，将活塞推至空筒顶端后不在回拉，以保持注射器内无空气。根据化验单，再注射器上标注科室、床号、 姓名、血气分析标本。另备小胶塞或“一次性动脉血气分析采样器。 2、操作流程 操作者按规定着装、洗手、戴口罩 掌握穿刺方法及注意事项 用物准备齐全、注射器上做好标注 准备 环境符合操作要求 ↓ 查对患者床号、姓名，注射器上标注是否与化验单一致 操 问候患者、说明目的、取得配合，协助患者取舒适体位 作 解释评估 查对 评估选择穿刺动脉 解释评估 流 充分暴露穿刺部位，触及患者动脉搏动作明显处 程 严格消毒穿刺部位，以穿刺点为中心直径≥5cm 消毒者示指、中指（或带无菌手套） 再次查对患者床号、姓名 触及患者动脉搏动最明显处 一手以示指、中指分别固定动脉上、下两端 一手持注射器，根据不同动脉以适当的深度垂直进针 见回血后固定消毒穿刺查对血样采集抽血至 1～2ml 采血完毕，拔针， 患者局部压迫 5 分钟 如果注射器内混有空气需排净 立即将针头插入橡胶塞内（使针头斜面埋入橡胶皮中，以隔绝空气，在手中搓动 注射器，使血与肝素混合，立即送验整理送验整理患者床单位 查对记录 清理用物注意点与说明： 1、穿刺部位必须无炎症、瘢痕；动脉血管栓塞者慎行动脉穿刺术。 2、患者宜取仰卧，桡动脉、肱动脉穿刺时，术侧上肢外展外旋；股动脉穿刺时，术侧下肢自然弯曲，并外展外旋； 足背动脉穿刺时，足背绷紧。 3、操作时必须严格执行无菌操作原则。 4、动脉穿刺既可采用“垂直进针法” ，也可以采用“斜角进针法” （与静脉穿刺手法相类似） ，即常规消毒患者穿刺 点及术者示指后，术者用示指触及动脉博动最明显处并稍加固定，右手持针，以 30°～45°角，与术者示指下端 0.5～1.0cm 处，快速刺入皮肤，在向前行穿刺时，利用示指的触觉判断动脉的深浅和走向，快速刺入动脉。 5、 遇休克、心力衰竭、心律失常等情况，患者动脉搏动不明显，小动脉穿刺成功率低时，宜选择股动脉进行穿刺。 6、采血完毕，以无菌棉球或纱布按压穿刺点﹥5 分钟，并嘱咐患者休息片刻；有出血倾向者适当延长按压时间。 7、血标本必须隔绝空气。因此采血的注射器使用前应检查有无漏气，针头必须连接紧密，标本采集后立即封闭针 头斜面。 8、标本 15 分钟内送验，如需等待测定，应将标本置于 0～4℃冰箱内保存，但不得超过 1 小时，以免影响检验结 果。 二、静脉采 操作者按规定着装、洗手、戴口罩 掌握正确采集静脉标本的方法 用物准备齐全、注射容器上贴好标签并准确无误 准备 环境符合操作要求 ↓ 查对患者床号、姓名，检验项目、采血量 操 核对标本采集及容器并检查其质量 作 解释评估 查对 说明目的，取得配合，协助患者取舒适卧位 解释评估 流 暴露肢体，选择适宜的穿刺血管 程 在穿刺点上方 5cm 处扎止血带使血管充盈 以穿刺点为中心消毒皮肤，直径≥5cm 嘱患者握紧拳头，使血管充盈显露 松动注射器并排净空气，必要时更换头皮针或备好采血针 穿刺前查对患者床号、姓名 以适宜的穿刺角度、深度一次穿刺血管成功 抽取所需血量 拔针后，局部压迫 3 分钟并嘱咐患者休息片刻 血液注入标本容器，根据检验要求，静置或摇匀 若使用一次采血针，则见回血后，将采血针的另一端插入真空采血管，抽取所需 血量。全部血标本采集完毕拔针消毒穿刺查对标本采集整理送验再次认真查对并签名 询问并观察患者反应，交代注意事项 整理患者床单位 标本及时送验注意点与说明： 1、采血前根据不同的检验项目，准确准备不同的采血试管如（血常规用紫色、血生化红色、血凝四项蓝色） 。如果 使用一次性静脉采血针，必须同时配用一次性真空采血试管。 2、操作前，应根据化验申请单、医嘱，认真核对患者床号、姓名、检验项目、采血量、检查标本容器有无裂缝， 掌握标本采集要求等。3、穿刺采血前，应松动注射器并排尽注射器内的空气。4、根据采血量选择血管。一般选择 肘正中静脉、贵要静脉、头静脉、大隐静脉；对于小儿、肥胖、严重水肿或脱水等患者，可选择股静脉、颈外静脉 穿刺采血。5、注意掌握不同静脉的穿刺特点。严禁从静脉输液通路同一血管或同侧手臂采血，以免影响化验结果 6、需空腹采集血标本时，注意提前通知患者禁食。7、留取血培养标本，应阉割无菌基数操作，采血量 5～10ml。 8、同时采集多个血标本时，须注意采集的先后顺序。原则上是先细菌培养标本，后抗凝血标本，最后血清标本。 采集全血标本时，需注意抗凝，血液注入容器后，立即轻轻旋转摇动试管，避免血液凝固。9、采血完毕，标本按 要求及时送验。10、为可疑或确诊为血液性传染病的患者静脉采血，建议戴手套操作，注意动作准、稳，严防针刺 伤；并注意注射器及针头必须放置入医疗垃圾（锐器）盒。
暂无评价|0人阅读|0次下载|举报文档静脉血标本的采集技术_基础医学_医药卫生_专业...2. 护士操作过程规范、准确(采血管、采血顺序、采血量) 。 3. 采血标本方法...暂无评价|0人阅读|0次下载|举报文档 动脉血标本的采集技术_医药卫生_专业资料。二十、 二十、动脉血标本的采集技术 (一)目的 采集动脉血,进行血气分析,判断患者...暂无评价|0人阅读|0次下载|举报文档第二章儿科常用检验标本采集技术_临床医学_医药卫生_专业资料。第二章 儿科常用检验标本的采集技术第一节 血标本采集技术血标本...1/2 相关文档推荐 动脉血气分析标本采集再... 暂无评价 2页 ¥1.00 采集...护士接触到动脉血采集也相应增加, 而其标本的采集技术与检验结果的准确性 密切相关...5 5 5 5 动脉血标本采集技术操作(一)目的 1、判断血液酸碱度; 2、观察血液...登录百度文库,专享文档复制特权,财富值每天免费拿!现在就登录&&
你可能喜欢©...1/2 相关文档推荐 动脉血标本采集操作程序和... 3页 免费 动脉血标本采集...动脉血标本采集技术操作考核评分标准科室 项目操作前准备评估 10 总分 1、着装整洁...标本采集全过程均应遵循住院患者医学检查原则,标本采集的原则,无菌 技术操作原则...1/2 相关文档推荐 血液标本采集流程 暂无评价 2页 1下载券
血液标本的采集 ...暂无评价|0人阅读|0次下载|举报文档 血液标本的采集...3.2 采集过程 1&采集时间: 理想的采集血标本的...4&采集标本的技术要求: 采血时止血带捆扎时间在 1...暂无评价|0人阅读|0次下载|举报文档 标本采集(2)_药学_医药卫生_专业资料。一.静脉血标本的采集静脉血标本是采用一次性注射器(推荐使用真空采血技术),从患者肘静...(三)静脉血液标本采集的技术要点 1. 准备好标本采集所用的容器(枸橼酸钠抗凝...文档贡献者 可可2000544 贡献于 1/2 相关文档推荐 ...
All rights reserved Powered by
copyright ©right 。文档资料库内容来自网络，如有侵犯请联系***。&&&&&&&&&&
动脉血气标本的采集是临床护士应掌握的重要的操作技能之一
进入空间>>：
编号：2727768
发布人：lingju &&
电子邮件：
公司名称：
地址：江西省南昌市红谷滩新区
联系人：肖默
发布时间： 16:10:00
发布人IP：117.44.176.105
所在地区：江西 南昌
分享信息：
动脉血气标本的采集，是临床护士应掌握的重要的操作技能之一。护士操作方法的正确与否也会直接影响到标本的分析结果，同时也会增加护士的工作量。如何正确采集血气标本？哪些情况会影响血气结果？都是临床护理工作中必须掌握的知识……动脉血气标本采集方法一、穿刺方法1 、用物准备血气测定采血套装(含橡皮塞和针头)、无菌棉签、安尔碘、无菌棉球、治疗盘。愿意自己配制抗凝采血针的用户，可以用0.9%NS50ml+肝素钠针剂2支（12500U）配制成肝素稀释液备用，并做好无菌储藏。每抽血气前，用2ml注射器抽取肝素稀释液2ml，完全湿润整个针管后弃去肝素液，残留在针头及针管头部死腔内的肝素液即可起到抗凝作用。抗凝剂少了会使血液凝集，堵塞血气分析仪的流路系统，抗凝剂多了会影响血气和离子的检测结果，大剂量的抗凝剂会严重使离子钙偏低，误导临床。2、患者准备患者要处于自然状态，活动后应休息15min，抽血前30min应停止吸氧。由于患者对采集动脉血了解少，易产生恐惧心理，护士应有针对性的做好解释工作，消除患者的心理顾虑，稳定其情绪，避免各种因素致呼吸过度或屏气而引起的血气误差。3 、评估病人动脉并选择血管多选用动脉搏动明显、弹性好，易于固定、穿刺部位无硬结的血管，常用的采血部位依次为：桡动脉、肱动脉、股动脉和足背动脉，桡动脉最适宜动脉穿刺采血。一般选择桡动脉，因为此处动脉固定，易暴露，不受体位和操作地点的限制；其次选择股动脉和肱动脉，患者容易接受，且成功率高，不易误入静脉或误刺深层神经。***：用肝素化的玻璃注射器或一次性注射器穿刺，采血部位首选桡动脉，次选股动脉。小儿：a、首选用颞浅动脉或头皮小动脉，严格消毒后，用肝素化的5号头皮针连接2ml注射器，待动脉血流至注射器乳头时，立即用小止血钳分别夹住头皮针塑料软管首尾两端（约0.5ml血），然后拔出针头立即混匀送检。b、用肝素化的注射器穿刺，采血部位首选小儿桡动脉，小婴儿可用颞浅动脉取血，取完血一定要密封。c、因技术条件限制，不能反复动脉穿刺时，早产儿与小婴儿可在足后跟用肝素化毛细管采取动脉化毛细血管的血亦可。动脉化毛细血管采血，用不超过42～45℃的湿巾热敷采血部位皮肤5～15分钟，使血液增加，血流加速，达到动脉化，然后穿刺，穿刺要深，使血流快速自动流出，弃去第一滴血，不能挤压，用肝素化的毛细管吸取（建议采用厂家配套提供的专用毛细管），吸满后一定要密封，混匀后立即送检。未充分动脉化的毛细管血的PO2偏低，对PH、PCO2和HCO3-的测定结果影响不明显。4 、定位传统的取血部位以桡动脉搏动最强处作为定标点行穿刺术。取血进针点以操作者的感受来确定，由于桡动脉较细，搏动点为条索状，在较长一段均能触及搏动，取血位置误差较大。杨兰杰报道定位是以桡骨茎突为基点，向尺侧移动1cm，再向肘的方向上移0.5cm即为进针点，本科采用此种方法定位，穿刺成功率明显提高。5 、操作方法协助患者取舒适体位，暴露并用软枕垫高穿刺部位。严格消毒穿刺部位，打开血气测定采血套装包装，拉动活栓至1cm处，消毒操作者的左手食指及中指，按上述定位方法找到动脉搏动最明显处并固定动脉，右手持注射器，针头与皮肤呈45°至90°刺入动脉，进针后有一种穿透血管壁的感觉，无需拉动活塞柄，动脉血自动回血，至装满预设血量后，用棉球按压穿刺处针眼拔针，嘱病人按压时间不少于5~10min，然后将针头迅速刺入橡皮塞内，立即将标本掌心搓动混匀至少5s，以防标本凝血，贴好标签立即送检。　　二、采血后处理采血后针尖或毛细吸血管两端立即用橡皮帽或橡皮泥封住，防止空气气泡进入，并立即充分混匀达到抗凝目的，并立即送检，从采血到送检不宜超过20分钟，以免血细胞代谢耗氧，使PO2和PH值下降PCO2升高。若不能立即测定，应将血气标本保存在2～8℃容器内，但即使这样待测时间也不宜超过2小时。影响血气分析结果的因素1、血气分析的样本类型有哪些？　　血气分析的样本类型有动脉血样本、静脉血样本、毛细血样本。　　动脉血样本，动脉血是血气分析中最常使用的血液类型，因其可提供氧吸收和运输的最佳信息，所得信息稳定，不因采样点不同而不同。　　静脉血样本，一般情况下不建议采用静脉血进行血气分析，因其受外周循环状态和细胞代谢的影响，不可用于评估氧状态，但可反应酸碱状态（pH，pCO2，cHCO3）ctHbＯ諧OHbＯ謒etHbＯ諬bF，ctBil。　　毛细血样本，因情况不允许使用动脉血时可使用毛细血进行分析， sO2,pO2,FOHb,FHHb结果仅供参考，可以较好的反应以下参数：ctHbＯ諧OHbＯ諱etHbＯ諬bF，ctBil。　　2、血气分析怎样选择采样点？动脉血样本：桡动脉最为常用，由于它非常浅表易于触及，周围附近无大的静脉，又有非常良好的尺动脉侧支循环，易于采样，在穿刺过程中如不触及骨膜，一般痛觉不敏感。桡动脉采样前先进行改良的Allen’s测试以确定侧支循环是否充足。肱动脉可使用但不常用，由于其因为位置原因不宜于采样破坏周围环境的风险大。股动脉，虽然其面积大易于穿刺，但侧支循环不良，容易误伤股静脉，应避免在新生儿及老年患者身上采用。静脉血样本：肱静脉便于采样。毛细血样本：耳垂，指尖，拇指和脚后跟采血，采用脚后跟和拇指时，患者应大于六个月。　　3、血气分析怎样选择抗凝剂？建议最好使用含钠或锂的干性肝素作为抗凝剂，应避免使用液体肝素以免引起样本的稀释。基于样本类型建议使用以下浓度的肝素：试管：7-30IU/mL血液，注射器：50-500IU/mL血液，毛细管：50-100IU/mL血液。如果包括电解质测量，请使用电解质平衡肝素来减小电解质测量中肝素引起的偏差，以求最佳测量结果。　　4、血气分析采集样本时患者如何准备？患者的呼吸状态应保持稳定：采样前患者应处于稳定状态，保持患者平静呼吸状态，并且通风状态也应稳定。告知患者采样步骤以避免引起不必要的紧张，患者的紧张可引起过度呼吸，通气过度是血气误差的一个主要原因，可使肺泡通气量增加，造成pCO2降低、pH增加、pO2增加。　　5、血气分析采集样本时动脉导管怎样准备？动脉导管中的冲洗溶液必须从系统中完全清除以免稀释血样。　　6、血气分析采集毛细血样本时该如何准备？毛细采样部位应当完全动脉化，动脉化时将其敷热或轻轻***5-10分钟，使血管局部扩张，局部充血，使毛细血管充分动脉化，如果未能达到此项要求，血样将只代表局部组织并不反应患者的整体状态。否则可使pCO2测定值偏低。如遇收缩压小于95mmHg、心排出量减少及血管收缩的病人，或出生后数天内的新生儿，则不能用毛细血管血。　　7、血气分析样本采集时应注意什么？应注意血液样本检测只能有专门人员负责，谨记要谨慎操作处理血样及采集血样的仪器。使用符合规格的橡胶手套防止直接接触血样，随时采用消毒技术防止感染采样点。　　8、血气分析怎样进行动脉采样？动脉采样：动脉穿刺，注意不要混淆静脉血与动脉血样本，动脉血（由于高压作用）比静脉血流动快，并且颜色较浅；立即清除其中的气泡；采样后立即将样本同肝素混合。动脉导管，慢慢吸入样本以免引起溶血；立即清除其中的气泡；采样后立即将样本同肝素混合。　　9、血气分析怎样进行静脉样本的采集？静脉样本：须先将手及前臂浸入45摄氏度水中20分钟，使该部位静脉血动脉化，然后从手臂（或手背）静脉抽血，但抽血时一般不得使用压脉带，只能缓缓吸取，以免产生气泡。如使用压脉带，则须在最初几秒钟抽血，并不时屈曲手指或握拳。否则可使静脉pO2降低，增加酸性产物的含量。　　10、血气分析怎样进行毛细管采样？毛细管采样，使用柳叶刀或其他类似的工具穿刺，血液未经挤压自动流出, 弃去第一滴血，因其可能含有组织液。由第二滴血的中间开始采集，防治气泡产生。禁止挤压采血点以免混合部分组织液，仪器测量偏差。还可能引起样本（或部分样本）的溶血，导致cK+值偏高。样本分析应在10分钟内完成。如果必须储存，请将样本保存在0-4摄氏度下最多30分钟。注意：有毛细血管所得的测量结果中特别是pO2要谨慎应用。　　11、血气分析怎样进行混合样本采集？混合样本：采集后立即将血液同肝素混合以免凝血发生，凝血可使分析仪阻塞并产生不必要的麻烦。混合样本时需倒转样本，并将其在手心中转动数次。混合毛细管时可使用混合线或磁铁。避免混合时过于用力，以免引起溶血。　　12、血气分析怎样进行呼吸气样本采集？呼吸气样本，将患者的呼吸气体装入道格拉斯袋中，连接注射器于道格拉斯袋（最小为20mL，含有橡胶头）。注满，排空注射器两次后注入样本，然后使用橡胶头密封注射器。　　13、血气分析的样本怎样保存？任何时候应立即使用样本，尽量避免样本的保存。如果无法立即进行样本的测量，在室温下保存不应多于10分钟。如果需要长时间保存，请在0-4摄氏度下，存放最多30分钟。以下为保存方法：冰水（附带碎冰或制冷物质）可用于储存样本。样本不可直接放入冰中，以避免样本中冰结晶导致血液细胞溶解。样本应水平放置避免样本混合。注意：估计氧分压值较高的样本因尽快测量；如果毛细血管中存在气泡，则PH及血液气体值不应继续测量。　　14、血气分析样本怎样进行分析前的准备？动脉穿刺和动脉导管样本：如果样本中存在气泡则不应测量PH及血气值，晃动并在手心中滚动样本数次，使样本彻底混匀。毛细管样本：分析前应再次混合样本，样本吸入测量前不要将混合线移开，吸入前将混合线滑动到毛细管吸入样本的另一端，移开毛细管两端的橡胶头。　　15、血气分析样本中气泡对检测结果有什么影响？混合搅动前应清除样本中的气泡，如果气泡同血液样本含量相比达到5%时便可导致潜在错误，气泡所产生的影响将随着保存时间及混合搅动而增强。空气中的氧分压高于动脉血，二氧化碳分压低于动脉血，根据气体规律，高分压流向低分压，从而使血液中的pO2及pCO2都发生改变而无测定价值。　　16、血气分析在血液样本分析前阶段中产生错误的原因是什么？怎样预防？& 样本中存在气泡，影响参数pO2，应立即清除气泡。& 样本沉淀，影响参数Hct，pO2，pCO2，在注入分析仪前混匀样本。& 溶血，影响参数cK+，cCa2+，应避免剧烈混合，避免储存温度在0℃以下。& 新陈代谢，影响参数pO2，pCO2，cGlu，cCa2+，应避免储存，如果必须储存请在0-4℃储存。& 样本设备结构，针直径太小容易引起溶血，影响参数cK+，cCa2+，应选用适当的采样设备。& 液体肝素引起的稀释，影响参数电解质和代谢物，Hct，pCO2，应使用干性肝素片。& 肝素介入影响，影响参数电解质，特别是cCa2+，应使用电解质平衡肝素。& 动脉血混入静脉血，影响参数pO2，sO2，应采用标准的采样技术。& 患者状态不稳定，影响参数pH和血气，应通风调整20分钟后采样，通知患者采样步骤。& 红细胞泄露，影响参数cK+，应在0-4℃温度下储存样本，最多30分钟。()& 放置在阳光下或其他灯光下，影响参数ctBil，应使样本避光放置并尽快测量，对接受光疗的患者进行采血前应先关闭灯光。
联系我时请说明是从久久信息网看到的，这样我会给你较大的优惠！
信息由用户自行发布，采用请谨慎，我们鼓励您当面交易。 久久信息网只为传递信息，我们不做任何双方证明，也不承担任何法律责任。 信息转载，请标明来源于。
内&&&&容：&&&如何正确的进行ELISA测定操作(试剂,试剂盒,血清标本,血清,蛋白) - 免疫实验 - 生物秀
标题: 如何正确的进行ELISA测定操作(试剂,试剂盒,血清标本,血清,蛋白)
摘要: [如何正确的进行ELISA测定操作(试剂,试剂盒,血清标本,血清,蛋白)] 相关专题
ELISA免疫实验技术
临床ELISA测定现通常为采用手工操作的以微孔板条为固相的测定模式，测定操作非常简单，一般涉及到标本的收集保存、试剂准备、加样、温育、洗板、显色、比色、结果判断和结果报告及解释等方面，其中任一步骤的不当都会影响测定结果，且尤以加样、温育和洗板等步 [关键词:试剂 试剂盒 血清标本 血清 蛋白 显色 药物 激素]……
ELISA免疫实验技术
临床ELISA测定现通常为采用手工操作的以微孔板条为固相的测定模式，测定操作非常简单，一般涉及到标本的收集保存、准备、加样、温育、洗板、显色、比色、结果判断和结果报告及解释等方面，其中任一步骤的不当都会影响测定结果，且尤以加样、温育和洗板等步骤为甚。现分述如下。
一、临床标本的收集和保存
用于ELISA测定的临床标本最为常用的是血清（浆），有时因为特定的检测目的，也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。目前临床上使用血清标本测定的标志物一般有传染性病原体的抗原 和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细胞因子和治疗药物等。对用于激素和治疗药物测定的血清标本的收集，要注意收集时间甚或体位有可能会对测定结果产生影响。如可的松在早晨4～6点之间，会有一峰值出现：生长激素、促黄体激素（LH）和促卵泡激素（FSH）均以阵发性方式释放，因此，在测定此类激素时，有必要在密切相连的时间间隔内采取数份血样本，以其中间值为测定值。又如当从卧位变为站立位时，血清中肾素活性将出现明显增高。再如治疗药物的检测，应根据药代动力学选择服药后的最适时间抽血检测。用于传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物和特种蛋白等的检测的血清标本的收集则没有时间和体位方面的影响，只是在处理和保存方面要考虑以下几个方面：
（1）要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团，其有类似过氧化物的活性，因此，在以HRP为标记酶的ELISA测定中，如血清标本中血红蛋白浓度较高，则其就很容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面加入的HRP底物反应显色。
（2）样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌 污染，一则细菌的生长，其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生***作用；二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌(Escherichia coli)的&-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。
（3）血清标本如是以无菌操作分离，则可以在2～8℃下保存一周，如为有菌操作，则建议冰冻保存。样本的长时间保存，应在-70℃以下。
（4）冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子 产生破坏作用，从而引起假阴性结果。此外，冻融标本的混匀亦应注意，不要进行剧烈振荡，反复颠倒混匀即可。
（5）标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时，应离心沉淀后取上清检测。
在临床实验室，对试剂准备一般不太注意，通常的做法是，在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用，而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题，其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。因此在ELISA测定中试剂的准备最为关键的是，在实验开始前，将试剂盒先从冰箱中拿出来，在室温下放置20分钟以上后，再进行测定，以使试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的，主要是为了在后面的温育反应步骤中，能使反应微孔内的温度能较快地达到所要求的高度，以满足测定要求。其次，目前的商品ELISA试剂盒中的洗板液均需在实验室使用时对所提供的浓缩液稀释配制，因此稀释时所用的水或去离子水应保证质量。此外，当试剂盒以OPD为底物时，则底物溶液应在反应显色前临时配制。
三、加样本及反应试剂
在现在的ELISA商品试剂盒中，样本的加入几乎是唯一的要使用微量加样器加入样本的步骤。使用微量加样器加样必须注意的关键点是：加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。加样太快，无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从中滴加，除了要注意滴加的角度外，滴加的速度也很重要，滴加太快，很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象，这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附，从而引起非特异显色。所以，有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性，下次测定为阴性，往往就是上述加样及试剂的错误所致。
相关热词：
..........
生物秀是目前国内最具影响力的生物医药门户网站之一，致力于IT技术和BT的跨界融合以及生物医药领域前沿技术和成功商业模式的传播。为生物医药领域研究人员和企业提供最具价值的行业资讯、专业技术、学术交流平台、会议会展、电子商务和求职招聘等一站式服务。
官方微信号：shengwuxiu
***：021-