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孕酮电化学发光法检验报告单
女 | 23个月
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&&&&&&病情分析:&&&&&&你的末次月经是什么时候呢?&&&&&&一般情况下孕周和预产期都是按末次月经算的。&&&&&&早孕期有没有行B超检查呢?&&&&&&根据早孕期的B超结果推算孕周最准确,还可大概推算同房受孕的时间。&&&&&&指导意见:&&&&&&孕酮有维持妊娠的作用,在孕期是持续升高的,但不能根据孕酮水平推算孕周。
已经B超咯!大小2cm和1?8cm。医生那上面的数据我孕酮达标吗?我孕酮指数是多少?
15:27医生回答:
你的血孕酮值是多少呢?
15:31医生回答:
符合相应孕周水平。
单子上面就100.800。看不懂所以在这里请教
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使用微信扫码支付1元一种电化学发光免疫测定方法
专利名称一种电化学发光免疫测定方法
技术领域本发明涉及免疫学领域,特别涉及一种电化学发光免疫测定方法。
背景技术化学发光免疫分析是以标记发光剂为踪物信号建立的一种非放射性标记免疫分析法,具有灵敏度高、线性范围宽、分析速度快、操作简便、容易实现自动化的优点。目前在临床上常用的化学发光免疫试剂为I、碱性磷酸酶和辣根过氧化物酶与鲁米诺大的反应体系。其主要缺点是碱性磷酸酶和辣根过氧化物酶在温度变化下活性影响较大,实验结果受环境变化比较大。
2、吖啶酯和吖啶酯的衍生物与过氧化氢的碱性溶液中的发光反应。主要缺点是其为闪光发光,发光时间短,只能在全自动的仪器中实现,结果计算方式复杂,且实验结果的稳定性不易把握。3、吡啶钌和三丙胺的电化学发光体系。电化学发光反应(electro-chemiluminescence, ECL)是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,抗原抗体复合物与吡啶钌的结合物在三丙胺作用下用电化学激发,发生氧化还原反应发出光子,可以经过光电倍增管采集。这一过程在电极表面周而复始地进行,产生许多光子,使光信号得以增强。电化学发光分析中应用的常用标记物为,可通过化学反应与抗体或不同化学结构抗原分子结合,制成标记的抗体或抗原。吡啶钌具有水溶性,且高度稳定,保证电化学发光反应的高效和稳定,而且避免了本底噪声的干扰。吡啶钌与免疫球蛋白结合的分子比超过20仍不会影响抗体的可溶性和免疫活性,且分子量小,空间位阻小,即便小分子的核酸也能标记。现有的电化学发光法多采用三丙胺TPA为反应物,三丙胺缺点为反应慢、浓度高、受电极材料影响大,发光效率有限,不能做到成本最优化。
本发明要解决的技术问题为提供一种发光效率高、反应迅速、适用范围广的电化学发光免疫测定方法。为了实现上述发明目的,本发明采用如下技术方案一种电化学发光免疫测定方法,包含以下步骤步骤I :将吡啶钌标记的待测蛋白第一抗体、生物素化合的待测蛋白第二抗体与待测样品充分反应,或将吡啶钌标记的待测蛋白抗体、生物素化合的待测蛋白与待测样品下充分反应;步骤2 :加入链霉亲和素包被的磁性微粒充分反应形成抗原抗体磁性微粒复合体,将反应液吸入流动池,所述抗原抗体磁性微粒复合体通过磁性微粒吸附于电极表面;步骤3 :加入二丁基乙醇胺溶液,加电压启动ECL反应,用光检测器采集扫描到的光信号;
步骤4 :配制梯度浓度的标准溶液,根据发光强度变化值对数与浓度对数绘制剂量反应曲线,通过换算得出待测标本中的待测蛋白浓度。ECL基本原理是发光底物及反应参与物在电极表面失去电子而被氧化。电子供体失去一个H+而成为强还原剂,将发光底物还原为激发态,随即释放光子而恢复为基态的发光底物。这一过程在电极表面周而复始地进行,不断地发出光子而常保持底物浓度的恒定。三丙胺TPA缺点为反应慢、浓度高、受电极材料影响大,二丁基乙醇胺的发光效率明显好于TPA,其在钼电极和金电极上的发光强度对比图如图5所示。本发明选择二丁基乙醇胺DBAE为共反应物,以吡啶钌作为标记物,标记抗原或抗体、或核酸,通过免疫反应及ECL反应,即可进行电化学发光免疫测定。本发明所述吡啶钌结构为
1.ー种电化学发光免疫測定方法,包含以下步骤
步骤I:将吡啶钌标记的待测蛋白第一抗体、生物素化合的待测蛋白第二抗体与待测样品充分反应,或将吡啶钌标记的待测蛋白抗体、生物素化合的待测蛋白与待测样品下充分反应;
步骤2 :加入链霉亲和素包被的磁性微粒充分反应形成抗原抗体磁性微粒复合体,将反应液吸入流动池,所述抗原抗体磁性微粒复合体通过磁性微粒吸附于电极表面;
步骤3 :加入ニ丁基こ醇胺溶液,加电压启动ECL反应,用光检测器采集扫描到的光信号;
步骤4 :配制梯度浓度的标准溶液,根据发光强度变化值对数与浓度对数绘制剂量反应曲线,通过换算得出待测标本中的待测蛋白浓度。
2.根据权利要求I所述的电化学发光免疫測定方法,其特征在于,所述待测样品为血清、尿液、组织液。
3.根据权利要求I所述的电化学发光免疫測定方法,其特征在于,所述待测蛋白为肿瘤标志蛋白。
4.根据权利要求I所述的电化学发光免疫測定方法,其特征在于,所述待测蛋白包括T3三碘甲状腺原氨酸、ASA抗精子抗体、肌钙蛋白I、T4甲状腺素、ACA抗心磷脂抗体、CKMB、TSH、AEA抗子宫内膜抗体、FT3游离三碘甲状腺原氨酸、AOA抗卵巢抗体、FT4游离甲状腺素、ATB抗滋养层细胞抗体、Anti-TM甲状腺微粒体抗体、ZP抗透明带抗体、Anti-TG抗甲状腺球蛋白抗体、抗HCG抗体、人胎盘催乳素、Anti-TPO甲状腺过氧化物酶抗体、HCG、T0X弓形虫抗体、FSH、AFP甲胎蛋白、CEA癌胚抗原、PSA前列腺特异性抗原、FPSA游离前列腺特异性抗原、CMV巨细胞病毒抗体、LH促黄体生成激素、HSV-I单纯疱疹病毒抗体、PRL催乳素、HSV-2单纯疱疹病毒抗体、TES睾酮、RV风疹病毒抗体、PRO孕酮、Ferritin铁蛋白、TOX-Ag弓形体循环抗原、E2雌ニ醇、CA125、E3雌三醇、CA153、CA199、HBsAg、NSE神经特异性稀醇化酶、HBsAb、CA50、HBeAg、β 2微球蛋白、HBeAb、柯萨奇病毒抗体、HBcAb、BGP骨I丐素、D-Pyr脱氧吡啶酚、维生素D、胰岛素、PCIIIIII型前胶原、C-肽、IV型胶原、胰岛素抗体、LN层粘连蛋白、胰高血糖素、HA透明质酸、GAD-AB谷氨酸脱羧酶抗体、Fn纤维连接蛋白、流感病毒B、副流感病毒、EB病毒、麻疹病毒、肺炎支原体、结核杆菌、烟曲霉菌、腮腺炎病毒、HCV病毒、流感病毒Α、艾滋病病毒、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、埃可病毒以及胃泌素前体释放肽、CYFRA21-1、AFP、APT、CA242、CA724、CA50、f-PSA、t_PSA、Free β -hCG、SCCA。
5.ー种电化学发光免疫測定试剂盒,包含以下组分吡啶钌标记的待测蛋白第一抗体、生物素化合的待测蛋白第ニ抗体、链霉亲和素包被的磁性微粒、ニ正丁基こ醇胺溶液。
6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,还包含洗涤液。
7.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在干,所述洗涤液为pH7.4,0. 05mol/L含O.05%的Tween-20的磷酸盐缓冲液。
本发明公开了一种电化学发光免疫测定方法,包含将吡啶钌标记的待测蛋白第一抗体、生物素化合的待测蛋白第二抗体与待测样品充分反应;加入链霉亲和素包被的磁性微粒充分反应,将反应液吸入流动池,形成的抗原抗体磁性微粒复合体通过磁性微粒吸附于电极表面加入二丁基乙醇胺溶液,加电压启动ECL反应,用光检测器采集扫描到的光信号;配制梯度浓度的标准溶液,根据发光强度变化值对数与浓度对数绘制剂量反应曲线,确定待测蛋白浓度。本发明所述电化学发光法分析方法灵敏度高,特异性强,测定范围宽,试剂稳定无毒害,反应时间短,具有推广前景。
文档编号G01N21/76GKSQ
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发明者秦军 申请人:北京联众泰克科技有限公司关注今日:2 | 主题:336547
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