Takara 双酶切buffer用表-5
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因此本实验中我们用M Buffer来进行HindⅢ和EcoRⅠ 的双酶切。 ? ? 从琼脂糖凝胶中回收DNA ? 在酶切的过程中,除产生我们所需要的目的片 段外,还会产生一些小...同时双酶切还是分别单酶切? - 实验交流 - 生物秀
标题: 同时双酶切还是分别单酶切?
摘要: [同时双酶切还是分别单酶切?] 我正准备做酶切,我的两个酶分别是NdeI和HindIII,这两个酶的反应条件都是37度,但最佳buffer不一样,请问我该同时切还是分步切呢?有经验的给各建议,谢谢! 关键词:[酶切 环境温度]……
我正准备做酶切,我的两个酶分别是NdeI和HindIII,这两个酶的反应条件都是37度,但最佳buffer不一样,请问我该同时切还是分步切呢?有经验的给各建议,谢谢!回复每个公司,都有一个,该酶在不同buffer中的活性表。
如果两个酶在该buffer中,活性大于75%,基本上,就可以双酶切了。
双酶切,节省时间,出错,也容易找到错在那里。回复不是有通用buffer吗
我用Hind3和Pst1双酶切时,就是用的buffer-otang
好象是的,仅供参考啊回复双酶切没问题,NdeI和HindIII在2*BufferY+/Tangotm中的活性都在50%以上。回复温度一样的话双酶切比较省时间啦,不一定非要同时都在最佳活性时才双酶切,可以试试的~
你用的什么公司的酶?如果是TAKALA的应该有双酶切表可以查得用什么Buffer比较好的~ (你那两个是1*K Buffer)回复应该可以切回复他们的工作环境温度,时间,Buffer一样的话,理论上可以。我只这样做过一次,效果也可以。回复TAKARA的是可以双酶切的,Buffer需要自己查一下,回复可以同时双酶切 通用buffer是k buffer
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