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文档介绍：
微生物的生长及其控制第一节:测定生长繁殖的繁殖第二节:微生物生长规律第三节:影响微生物生长的主要因素第四节:微生物的培养法概论第五节:有害微生物的控制学号:
姓名:李文青第一节:微生物生长繁殖的方法?一、测生长量?(一)直接法?粗放测体积法(在刻度离心管中测沉降量)和精确的称干重法?(二)间接法?1、比浊法?可用分光光度计法对无色微生物悬浊液测定一般选用 450 ~650mm ?2、生理指标法?测含氮量?二、计繁殖数?(一)直接法?用计数板在光学显微镜下直接观察细胞并进行计数?(二)间接法?1、平板菌落计数法?菌落形成单位:根据每皿上形成的 cfu 数乘上稀释度?2、厌氧菌的菌落计数法?横盖特滚筒培养法第二节:微生物的生长规律?一、微生物的个体生长和同步生长?观察微生物生的方法: ? 1.电子显微镜观察细胞的超薄切片? 2.使用同步培养技术?同步培养:某一群体中的所有个体细胞尽可能处于同样细胞生长和分类周期中,然后分析此群体在个极端的生物化学特性的变化,来了解细胞的变化。?通过同步培养的手段而使细胞群体各个体处于分裂步调一致,成为同步培养?获得微生物同步生长的方法:( 1)环境条件诱导法( 2)机械筛选法?二、单细胞微生物的典型生长曲线?定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的实验曲线,称为生长曲线?Ⅰ延滞期?Ⅱ指数期?Ⅲ稳定期?Ⅳ衰亡期(一)延滞期延滞期又称停滞期、调整期或适应期。指少单数细胞微生物接种到新鲜培养液中后, 在开始培养的一段时间,因代谢系统适应新环境的需要细胞数目没有增加的一段时间特点: (1)细胞物质开始增加; (2)有的细胞开始不适应环境而死亡; (3)细菌总数下降; (4)停滞期末期,细胞代谢活动能力强,细胞中 RNA 含量高,嗜碱性强。对不良环境条件较敏感,呼吸速度、核酸及蛋白质的合成速度接近对数细胞,并开始细胞分裂。影响因素:菌种、接种龄、接种量、培养基成分、种子损伤度(二)指数期指数期又称对数期,指生长曲线中紧接着延滞期的一段细胞数以几何级数增长的时期特点: (1)生长速率常数 R最大(2)细胞进行平衡生长(3)酶系活跃,代谢旺盛影响因素:菌种、营养成分、培养温度 (三)稳定期稳定期又称恒定期或最高生长期。其特点是生长速率常数 R等于 0 稳定期到来的原因: (1)生长限定因子耗尽(2)营养物质比例失调(3)有害代谢产物的积累(4)物化条件不适应,例如: PH 等(四)衰亡期在衰亡期中,微生物个体死亡率超过新生率,整个去标题呈现负生长状态( R为负值) 三、微生物的连续培养连续培养又叫开放培养,是相对分批培养或密闭培养而言的。连续培养是采用有效的措施让微生物在某特定的环境中保持旺盛生长状态的培养方法.
具体地说,当微生物以单批培养的方式培养到指数期的后期时,一方面以一定速度连续流入新鲜培养基和通入无菌空气,并立即搅拌均匀;另一方面,利用溢流的方式,以同样的流速不断流出培养物。于是容器内的培养物就可达到动态平衡,其中的微生物可长期在指数期的平衡生长状态和衡定的生长速率上,于是形成了连续生长。微生物在一定条件下,如果不断补充营养物质和排除有害的代谢产物,理论上,微生物都可保持恒定的对数生长.通常采用两种方式: (1)恒浊培养:当微生物在恒浊器中培养进入对数期时,不断从外界加入新鲜培养基, 而同时又流出培养物,用光电池信号控制浊度,以维持恒定的细胞密度. (2)恒化培养:微生物在恒化器中培养,通过控制恒化器中微生物生长所必需营养物的浓度,以保证微生物持续生长.连续培养应用于工业发酵中称连续发酵,并已实际应用,例如,连续发酵法生产酒精,半连续发酵法生产***、丁醇等。四、微生物的高密度培养高密度培养也称高密度发酵,一般指微生物在液体培养基条件下细胞密度超过常规培养 10 倍以上的生长状态或培养技术最佳条件: 1、最佳培养基成分 2、适时补料 3、提高溶氧量 4、防止有害代谢产物 5、适宜 PH 第三节:影响微生物生长的主要因素?一、温度?生长温度三基点:最低生长温度、最适生长温度、最高生长温度?最适生长温度简称最适温度,其含义为某菌分裂代时最短或生长速率最高时的培养温度?二、氧气?按照微生物与氧的关系,可分为好氧微生物和厌氧微生物好氧菌厌氧菌耐氧菌专性好氧菌微好氧菌兼性厌氧菌厌氧菌微生物与氧的关系三、 PH PH表示是某水溶液中氢离子浓度的负对数值。环境中的 pH 值对微生物的生命活动影响很大,主要作用在于: ①引起细胞膜电荷的变化,从而影响了微生物对营养物质的吸收; ②影响代谢过程中酶的活性; ③改变生长环境中营养物质的可给性以及有害物质的毒性。加适当氮源:尿素、蛋白质过碱时:加 H2SO4 、 HCl 等酸液过酸时:加 NaOH 、 Na2CO3 等碱液加适当碳源:糖、乳酸。油脂提高通气量降低通气量过酸时过碱时“治标”“治本” PH 调节第四节:微生物的培养法概论?一、实验室培养法?(一)固体培养法?1、好氧菌的固体培养?试管斜面、培养皿琼脂平板、克氏扁瓶?2、厌氧菌的固体培养?高层培养、厌氧培养皿、亨盖特滚筒技术、厌氧罐、厌氧手套箱?(二)液体培养法?(1)好氧菌的液体培养?试管液体培养、三角瓶浅层液体培养、摇瓶培养、台式发酵罐?(2)厌氧菌的液体培养?二、生产实践中培养微生物的装置?(一)固体培养法?1、好氧菌的曲法培养?2、厌氧菌的堆积培养?(二)液体培养法?1、好氧菌的培养?(1)浅盘培养?(2)深层液体培养?2、厌氧菌的培养第五节:有害微生物的控制?一、几个概念?(一)灭菌?采取强烈的物化因素使任何物体内外一切微生物丧失其生长繁殖能力的措施,成为灭菌。可分为杀菌和溶菌?(二)消毒?采取较温和的物化因素紧杀死物体表面或内部一部分病原菌?(三)防腐?防腐就是利用某种物化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖。?方法:低温、缺氧、干燥、高渗、高酸度、高醇度、加防腐剂?(四)化疗?化疗即化学治疗,指利用具有高度选择毒力即对病毒菌具有高度毒力对其宿主基本无毒的化学物质来抑制宿主体内病原微生物的生长繁殖。二、物理灭菌的代表---- 高温(一)高温灭菌种类火焰灼烧法烘箱内热空气法干热灭菌法连续加压灭菌法常规加压灭菌法加压下 HTST 法 LTH 法巴氏消毒法煮沸消毒法间歇灭菌法常压下湿热灭菌法高温灭菌(二)影响加压灭菌的因素 1、被灭菌物体含菌量 2、灭菌锅空气排除程度 3、灭菌对象的 PH 4、灭菌对象的体积 5、加热与散热的速度1
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