牛奶中抗生素残留的几种常用检测方法_中华文本库
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牛奶中抗生素残留的几种常用检测方法
随着奶牛饲养业的发展，抗生素在预防和治疗奶牛疾病方面得到广泛的应用。生鲜牛奶中抗生素的来源主要是：第一，治疗泌乳期病牛时使用的抗生素会从奶牛体内移行到乳腺残留进入牛奶中，资料表明治疗后的奶牛，其挤出的牛奶5天内都有抗生素残留；其二，为了预防奶牛疾病并提高产量，在奶牛饲料中添加抗生素也会造成牛奶中抗生素的残留；第三，由于牧场管理不善，挤奶、储奶没有严格的卫生制度和配套的设施，人为添加或造成牛奶抗生素的污染。
牛奶中含有抗生素，不仅对人的健康造成很大的危害，而且对乳品加工企业带来经济损失（因无法生成酸奶和奶酪）。因此必须严格控制牛奶中抗生素残留，除了要做好科学饲养、精心管理；正确挤奶和预防疾病外，还要规范抗生素的使用，按国标中有关规定，用药后的奶牛5天后所产的牛奶才可作为原料乳，并且要检测其残留。世界粮农组织（FAO ）、世界卫生组织（WHO ）、欧盟（EC ）及美国的食品和药品管理局（FDA ）等对食品中抗生素最大残留量都有明确的规定，我国也有鲜奶中抗生素残留量检验标准（GB）。
目前，鲜奶中抗生素残留的检测方法大致分为三类：生物测定法（微生物测定法、放射受体测定法）、免疫法（放射免疫法、荧光免疫法、酶联免疫法）、理化分析法（波谱法、色谱及联用技术）。下面介绍几种常用的牛奶中抗生素残留检测方法。
TTC 法是我国鲜奶中抗生素残留量检验标准（GB）的检测法，属生物检测法。其测定原理基于抗生素对微生物的抑制作用。如果牛奶中含有抗生素，则加入菌种（嗜热链球菌）经培育2.5~3小时后, 加入TTC 指示剂(三苯基四氮唑) 不发生还原反应, 所以样品呈无色状态; 如果牛奶中不含抗生素, 则样品呈红色. 这样实验后样品颜色不变的为阳性, 样品染成红色的为阴性。
TTC 法的具体操作步骤:
1. 菌液制备:将单菌种(嗜热链球菌) 以脱脂乳为培养基, 在36±1℃培养箱中培养15小时后, 再以脱脂乳以至于1:1稀释待用;
2. 取待检样液9mL, 在80℃水浴加热5分钟后冷却到37℃以下, 加活菌液1mL, 在36℃±1℃水浴2小时, 加入4%的TTC 指示剂0.3mL, 36℃±1℃水浴培养30分钟;
3. 若样液颜色不变为阳性, 呈红色为阴性; 若阳性的样液, 再置于水浴中培养30分钟, 不显色的为阳性, 呈红色为阴性.
TTC 法测定各种抗生素的灵敏度为:青霉素:4ppb,链霉素:500ppb,庆大霉
素:400ppb,卡那霉素:5000ppb.它具有费用低, 易开展的优点; 缺点是耗时长，要求操作人员需有一定专业知识且实验过程中菌液的制备、水浴过程控制都要求严格遵守操作规程，否则易出现假阳性，以致出现检验结果的不稳定性。 Delvotest? sp法（戴尔沃检测法）
该法最早在香港传到广东的，其使用是基于20世纪80年代初香港要求广东出口的生奶必须“无抗”且要求采用Delvotest 法检测。该方法也是生物测定法，其试剂是由荷兰DSM 公司生产并由AOAC 认证。原理是利用微生物--嗜热芽胞菌在64℃条件下培养2.5～3小时后会产酸, 酸引起指示剂BCP(溴甲酚紫) 变为***;
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