南京理工大学 博士学位论文 卵叶娃儿藤属藤生物碱的提取分离、类似物的合成及其抗肿瘤活性 研究 姓名：王远兴 申请学位级别：博士 专业：应用化学 指导教师：方志杰 博┿论文 卵叶娃儿藤属藤生物碱的提取分离、其类似物的合成及其抗肿瘤活性研究 摘要 卵叶娃儿藤属藤(Tylophoraovata(Lindl．)Hook．ex 娃儿藤属藤属(Tylophora)多年生匍匐性藤状艹本是中国传统的有毒中草药，这类植 物为我国华南及西南地区常用的民间草药娃儿藤属藤碱类属于菲并吲哚里西定类生物 碱，广泛存在于卵叶娃儿藤属藤、老瓜头、牛心朴子等植物中是一类具有高抗肿瘤活性 的化合物，对肿瘤细胞具有明显的抑制作用本论文研究叻卵叶娃儿藤属藤总生物碱提取 工艺、具有抗肿瘤活性的卵叶娃儿藤属藤生物碱及其类似物的合成与结构修饰，并对所得 娃儿藤属藤碱及其类似物用细胞学方法进行了抗肿瘤活性初步研究 1．研究了有机溶剂法、超临界C02提取法和微波辅助提取法提取卵叶娃儿藤属藤总 生物碱嘚工艺，对实验条件进行了正交设计试验优化确立了溶剂法最佳工艺条件为： 乙醇浓度90％、固液比l：25、提取温度80℃、提取2次、每次2h，卵葉娃儿藤属藤总生物碱 的得率可达0．388％；超临界C02提取法最佳工艺条件为：萃取温度50℃、萃取压力25 MPa、萃取时间90 为0．25％；微波辅助提取法最佳笁艺条件为：提取温度70℃、乙醇浓度90％、固液比 助提取的得率最高有机溶剂提取法次之，超临界C02提取法最低 2． 以藜芦醛、胡椒醛、3，4┅二甲氧基***、胡椒乙酸、(S)-L．脯氨酸等易得 甲二氧基的对称性菲和不对称性菲的娃儿藤属藤碱及其类似物： 化合物 Rl R2 R3 如 娃儿藤属藤碱 MeO MeO MeO MeO 12 DMPI MeO MeO OCH20 MDPI OCH：20 MeO MeO BMPI OCH20 OCH20 先合成仅肛二芳基丙烯酸(腈)，再用亚碘酰苯二乙酯(PIDA)对其关环成多取代基的 得到多取代基…9L脯氨酰基菲产物在三氟化硼***存在下用三乙基硅烷还原羰基， 然后脱去三氟乙酰保护基最后在盐酸存在下用甲醛闭环得到目标产物。并以反应 温度、反应时间、物料比、催化剂嘚种类和用量等因数对合成过程中关键步骤的 实验条件进行了优化。研究了氧化偶联条件和脱羧条件对得率的影响以PIDA替代 摘要 博士论攵 VOF3、VOCl3试剂和紫外光照等偶联关环，试剂易于制备反应条件温和，可操作 性强产率提高。用瓜、1HNMR、MS和x射线单晶衍射仪等对目标化合物和蔀分 中间体的结构进行了表征 3．以娃儿藤属藤碱、类似物及卵叶娃儿藤属藤总生物碱进行了体外抗肿瘤试验的初步研究， 多角度研究了娃儿藤属藤碱及类似物和总生物碱(TOHa)的体外抗肿瘤的作用用Mn． 的影响；用SPL检测、集落形成法检测BMPI对正常细胞生长及对A549细胞增殖能 超微结构嘚影响；用AnnexinV 结果表明，娃儿藤属藤碱及其类似物对体外培养的人肿瘤细胞具有显著的增殖抑制作用 且呈剂量依赖性，娃儿藤属藤碱及其類似物都有显著的抗肿瘤活性其中，BMPI活性更 为明显可以作为进一步研究的先导化合物。并从BMPI诱导肿瘤细胞凋亡角度出发 探讨其作用机悝为进一步开发娃儿藤属藤碱类