一种辅助检测和鉴定产组胺肠道菌的方法
专利名称一种辅助检测和鉴定产组胺肠道菌的方法
技术领域本发明涉及一种辅助检测和鉴定产组胺肠道菌的方法。
背景技术生物胺是一类主要由氨基酸脱羧或醛和酮氨基化形成的低分子量含氮化合物。主要有腐胺、尸胺、苯乙胺、精胺、亚精胺、组胺、色胺和酪胺。当人体摄入过量的生物胺时，可造***体神经系统和心血管系统的损伤。另外，生物胺还可与亚硝酸盐等食品防腐剂生成具有明显诱变性和潜在致癌性的亚硝胺而间接致癌。食品中的组胺主要是由携带氨基酸脱羧酶的微生物产生的。目前应用于食品中组胺检测分析方法主要有微生物学法、色谱法、分子生物学法。微生物学法的基本原理是根据组胺产生条件及菌株生长特性设计的特异性培养基。分子生物学方法快速可靠并不依靠培养基，弥补了其他方法的不足。聚合酶链式反应(PCR)作为分子生物学中常用方法，具有简便，快速，敏感，专一等特点已经成为重要的目标基因的检测方法。食品常常会受到肠道菌的污染，这其中会存在产胺菌，目前检测组胺的产生菌主要侧重于乳酸菌，而对于肠道菌则鲜有报道。
本发明的目的是提供一种辅助检测和鉴定产组胺肠道菌的方法。本发明提供的辅助鉴定产组胺肠道菌的特异引物对(扩增组氨酸脱羧酶hdc基因)，由序列表的序列1所示DNA和序列表的序列2所示DNA组成。该特异引物对仅对产组胺肠道菌的基因组DNA可以特异性扩增。本发明提供的辅助鉴定产组胺肠道菌的试剂盒，包括所述特异引物对和通用引物对；所述通用引物(扩增产胺菌的16S rDNA片段)对由序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成。所述试剂盒还包括可鉴别培养基；所述鉴别培养基的pH为5. 3，由水和溶质组成；每IOOmL所述鉴别培养基中含有如下溶质0. 5g胰蛋白胨、0. 5g酵母浸膏、 l.Og L-组氨酸、0.5g氯化钠、0. Ig碳酸钙、3.(^琼脂和0.0068溴甲酚紫。在含有溴甲酚紫指示剂和组氨酸的固体细菌鉴别培养基培养，产组胺细菌显示为紫色。所述特异引物对可用于制备辅助鉴定产组胺肠道菌的试剂盒。所述特异引物对和所述通用引物对可用于制备辅助鉴定产组胺肠道菌的试剂盒。本发明还保护一种辅助鉴定组胺产生菌的方法，包括如下步骤用所述特异引物对对待测菌的基因组DNA进行PCR扩增，如果得到PCR扩增产物待测菌为候选的产组胺肠道菌，如果没有得到所述PCR扩增产物待测菌为候选的非产组胺肠道菌。所述方法还可包括如下步骤以所述候选的产组胺肠道菌的基因组DNA为模板，用所述通用引物对进行PCR 扩增后进行测序，根据测序结果判断所述候选的产组胺肠道菌的种类。所述PCR扩增产物的大小具体可为420bp。所述的方法还可包括如下步骤将所述待测菌用鉴别培养基进行培养，挑取紫色的单菌落提取所述基因组DNA。用所述特异引物对对待测菌的基因组DNA进行 PCR 扩增时，所述 PCR 扩增的体系为10XEx TaqBuffer (Mg2+plus) 5 μ L, dNTP Mixture 4 μ L，每条弓丨物 2 μ L，Ex 丁&9(5"口1^，模板1口1^，ddH20 35. 6 μ L0 用所述特异引物对对待测菌的基因组DNA进行PCR扩增时，所述PCR扩增的程序为94°C 5min ；然后进行35 个循环，每个循环的程序为94°C 30s,52°C 45s,72°C 40s ；循环结束后，72°C 7min。用所述通用引物对进行PCR扩增时，所述PCR扩增的体系为=IOXEx Taq Buffer (Mg2+plus) 5 μ L, dNTP Mixture 4 μ L，每条引物 2 μ L，Ex Taq (5U/ml) 0· 4 μ L，模板 1 μ L，ddH20 35. 6 μ L0 用所述通用引物对进行PCR扩增时，所述PCR扩增的程序为94°C 5min ；然后进行35个循环， 每个循环的程序为94°C 30s,56°C 45s,72°C 40s ；循环结束后，72°C 7min。所述待测菌具体可为解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)。本发明还保护一种辅助鉴定待测样本中的产组胺肠道菌的方法，包括如下步骤 用所述特异引物对对待测样本的基因组DNA进行PCR扩增，如果得到PCR扩增产物待测样本为候选的含有产组胺肠道菌的样本，如果没有得到所述PCR扩增产物待测样本为候选的不含有产组胺肠道菌的样本。所述方法还可包括如下步骤以所述候选的含有产组胺肠道菌的样本的基因组DNA为模板，用所述通用引物对进行PCR扩增后进行测序，根据测序结果判断所述候选的含有产组胺肠道菌的样本中产组胺肠道菌的种类。所述PCR扩增产物的大小具体可为420bp。所述方法还包括如下步骤通过VRBGA培养基对待测样本中的各肠道菌菌株进行纯化，获得纯培养的菌株；将各个纯培养的菌株分别用所述鉴别培养基进行培养，挑取紫色的单菌落提取所述基因组DNA ；所述VRBGA培养基的pH为7. 4士0. 2范围内， 由水和溶质组成；每升所述VRBGA培养基中含有如下溶质3. Og酵母提取物、7. Og蛋白胨、 5. Og氯化钠、1. 5g3号胆盐、10. Og乳糖、10. Og葡萄糖、0. 03g中性红、0. 002g结晶紫、15. Og 琼脂。用所述特异引物对对待测样本的基因组DNA进行PCR扩增时，所述PCR扩增的体系为10XEx Taq Buffer (Mg2+plus) 5 μ L, dNTP Mixture 4 μ L，每条弓|物 2 μ L，Ex Taq(5U/ mDOjyL，模板lyL，ddH20 35. 6 μ L0用所述特异引物对对待测样本的基因组DNA进行 PCR扩增时，所述PCR扩增的程序为94°C 5min ；然后进行35个循环，每个循环的程序为 940C 30s,520C 45s,72°C 40s ；循环结束后，72°C 7min。用所述通用引物对进行PCR扩增时， 所述 PCR 扩增的体系为10XEx Taq Buffer (Mg2+plus) 5 μ L, dNTP Mixture4 μ L，每条引物 2yL, Ex Taq(5U/ml)0. 4yL，模板lyL，ddH20 35. 6 μ L0用所述通用引物对进行PCR扩增时，所述PCR扩增的程序为94°C 5min ；然后进行35个循环，每个循环的程序为94°C 30s、 56°C 45s、72°C 40s ；循环结束后，72°C 7min。所述待测样本具体可为含有解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)的样本。所述特异引物对可用于辅助鉴定产组胺肠道菌或辅助鉴定待测样本中的产组胺肠道菌。所述特异引物对和所述通用引物对可用于辅助鉴定产组胺肠道菌或辅助鉴定待测样本中的产组胺肠道菌。利用本发明提供的引物对或方法不仅可以对发酵食品(如酱油、腐乳等)中的产组胺肠道菌进行检测，还可以运用于任何与产组胺肠道菌鉴别相关的检测。本发明方法简单、快速、易于识别，可以在同一块平板上区分产组胺肠道菌和不产组胺菌，并通过使用分子生物学的方法进一步鉴定，更加准确、可靠。本发明特别适用于评估发酵食品中组胺形成的风险性，对日常生产能有效、及时的进行质量控制，是一种很有应用前景的食品卫生检测技术。
图1为鉴别培养基平板上的阳性菌落和阴性菌落；1代表阴性菌；2代表阳性菌。图2为PCR法检测组氨酸脱羧酶基因的琼脂糖电泳结果图；1、2为平板鉴定阳性且PCR鉴定为阳性的菌株；3为平板鉴定为阳性但PCR鉴定为阴性的菌株。
具体实施例方式以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。实施例1、引物的设计和制备根据NCBI上的各种产组胺肠道菌的组氨酸脱羧酶编码基因(hdc基因)的保守区域设计特异引物对(由引物LBl和引物LB2组成)。选择针对各种产组胺菌的16S rDNA的通用引物对(由引物B-for和引物B-for组成)。合成特异引物对和通用引物对。LBl (序列表的序列 1) :5，-AAGATACCCATTACTCCGTG-3，；LB2 (序列表的序列幻5，-TCTACAGAGATCCGATCGAC-3，。B-for(序列表的序列；3) :5，-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3，；B-rev (序列表的序列 4) :5，-AAGGAGGTGATCCAGCCGCA-3，。实施例2、发酵食品中产组胺肠道菌的检测及鉴定一、样本处理无菌称取市售的酱油成曲20g，无菌条件下剪碎后置于装有180ml灭菌生理盐水的三角瓶中，充分混勻，在均质器上震摇IOmin(稀释度为10—1)；然后用灭菌生理盐水进行 10倍梯度稀释，作为各个样本稀释液(稀释度依次为10_2、10_3、……)。二、从样本中分离肠道菌结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂培养基(VRBGA培养基)的配制将3. Og酵母提取物、7. Og蛋白胨、5. Og氯化钠、1. 5g3号胆盐、10. Og乳糖、10. Og葡萄糖、0. 03g中性红、 0. 002g结晶紫、15. Og琼脂用蒸馏水定容至IOOOmL,加热溶解，调pH至7. 4士0. 2。将样本稀释液涂布于VRBGA培养基，37°C培养24h ；从培养基上挑取各个形态不同的单菌落划线接种于VRBGA培养基，37°C培养24h ；连续进行2次在新的VRBGA培养基上转接菌落(划线接种)并采用相同条件培养，得到纯化的菌株16株。三、利用鉴别培养基初筛鉴别培养基的配制将5g胰蛋白胨、5g酵母浸膏、10. Og L-组氨酸、5g氯化钠、Ig 碳酸钙、30. Og琼脂和0. 06g溴甲酚紫用水定容至IOOOmL,调pH至5. 3士0. 1 ；121°C灭菌 IOmin0将步骤二得到的菌株分别采用点接种法接种至鉴别培养基，30°C培养36h。照片见图1，紫色的菌落为候选的产组胺肠道菌菌落。共3株菌株显示为紫色菌落。四、PCR鉴定分别挑取步骤三得到的3株菌株，提取基因组DNA，以基因组DNA为模板，用LBl和LB2组成的弓I物对进行PCR扩增。PCR 扩增体系(50 μ L) :10 XEx Taq Buffer (Mg2+plus) 5 μ L, dNTP Mixture (各 2. 5mM) 4 μ L，LBl 和 LB2 各 2 μ L, Ex Taq (5U/ml) 0· 4 μ L，基因组 DNA 1 μ L, ddH2035. 6 μ L。PCR扩增程序94°C 5min ；然后进行35个循环，每个循环的程序为94°C 30s、 52°C 45s,72°C 40s ；循环结束后，72°C 7min ；降温至 4°C，结束。将PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳。结果见图2，显示一条的特异条带的菌株为PCR鉴定阳性的菌株。步骤二得到的3株纯培养的菌株中，有2株PCR鉴定为阳性。将 PCR扩增产物进行测序验证，结果表明该特异性条带均为420bp。四、序列鉴定分别将PCR鉴定为阳性的2株菌株的基因组DNA为模板，用B_for和B_rev组成的引物对进行PCR扩增，将PCR扩增的产物进行测序。PCR 扩增体系(50 μ L) :10 X Ex Taq Buffer (Mg2+plus) 5 μ L, dNTP Mixture (各 2. 5mM) 4 μ L，B-for 和 B_for 各 2 μ L，Ex Taq (5U/ml) 0· 4 μ L，模板 1 μ L, ddH2035. 6 μ L。PCR扩增程序94°C 5min ；然后进行35个循环，每个循环的程序为94°C 30s、 56°C 45s,72°C 40s ；循环结束后，72°C 7min，降温至 4°C，结束。PCR鉴定为阳性的2个菌株的测序结果分别见序列表的序列5和序列表的序列 6，均与解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica) (GENBANK ACCESSION NO. HM)的同源性最高，均为99 %。测序结果表明，两株菌均为解鸟氨酸克雷伯菌 (Raoultella ornithinolytica)。经形态、生理生化和分子鉴定，该两株菌确实为解鸟氨酸拉乌尔菌(Raoultella ornithinolytica)。
1.辅助鉴定产组胺肠道菌的特异引物对，由序列表的序列1所示DNA和序列表的序列 2所示DNA组成。
2.辅助鉴定产组胺肠道菌的试剂盒，包括权利要求1所述的特异引物对和通用引物对；所述通用引物对由序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成。
3.如下(a)或(b)在制备辅助鉴定产组胺肠道菌的试剂盒中的应用(a)权利要求1所述特异引物对；(b)权利要求1所述特异引物对和通用引物对；所述通用引物对由序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成。
4.辅助鉴定产组胺肠道菌的方法，包括如下步骤用权利要求1所述特异引物对对待测菌的基因组DNA进行PCR扩增，如果得到PCR扩增产物待测菌为候选的产组胺肠道菌，如果没有得到所述PCR扩增产物待测菌为候选的非产组胺肠道菌。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于所述方法还包括如下步骤以所述候选的产组胺肠道菌的基因组DNA为模板，用通用引物对进行PCR扩增后进行测序，根据测序结果判断所述候选的产组胺肠道菌的种类；所述通用引物对由序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成。
6.如权利要求4或5所述的方法，其特征在于所述方法还包括如下步骤将所述待测菌用鉴别培养基进行培养，挑取紫色的单菌落提取所述基因组DNA ；所述鉴别培养基的pH 为5. 3，由水和溶质组成；每IOOmL所述鉴别培养基中含有如下溶质0. 5g胰蛋白胨、0. 5g 酵母浸膏、1. Og L-组氨酸、0. 5g氯化钠、0. Ig碳酸钙、3. Og琼脂和0. 006g溴甲酚紫。
7.辅助鉴定待测样本中的产组胺肠道菌的方法，包括如下步骤用权利要求1所述特异引物对对待测样本的基因组DNA进行PCR扩增，如果得到PCR扩增产物待测样本为候选的含有产组胺肠道菌的样本，如果没有得到所述PCR扩增产物待测样本为候选的不含有产组胺肠道菌的样本。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于所述方法还包括如下步骤以所述候选的含有产组胺肠道菌的样本的基因组DNA为模板，用通用引物对进行PCR扩增后进行测序，根据测序结果判断所述候选的含有产组胺肠道菌的样本中产组胺肠道菌的种类；所述通用引物对由序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成。
9.如权利要求7或8所述的方法，其特征在于所述方法还包括如下步骤通过VRBGA 培养基对待测样本中的各肠道菌菌株进行纯化，获得纯培养的菌株；将各个纯培养的菌株分别用鉴别培养基进行培养，挑取紫色的单菌落提取所述基因组DNA ；所述VRBGA培养基的 PH为7. 4士0. 2范围内，由水和溶质组成；每升所述VRBGA培养基中含有如下溶质3. Og酵母提取物、7. Og蛋白胨、5. Og氯化钠、1. 5g3号胆盐、10. Og乳糖、10. Og葡萄糖、0. 03g中性红、0. 002g结晶紫和15. Og琼脂；所述鉴别培养基的pH为5. 3，由水和溶质组成；每IOOmL 所述鉴别培养基中含有如下溶质0. 5g胰蛋白胨、0. 5g酵母浸膏、1. Og L-组氨酸、0. 5g氯化钠、0. Ig碳酸钙、3. Og琼脂和0. 006g溴甲酚紫。
10.如下(a)或(b)在辅助鉴定产组胺肠道菌或辅助鉴定待测样本中的产组胺肠道菌中的应用(a)权利要求1所述特异引物对；(b)权利要求1所述特异引物对和通用引物对；所述通用引物对由序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成。
本发明公开了一种辅助检测和鉴定产组胺肠道菌的方法。本发明提供了辅助鉴定产组胺肠道菌的特异引物对，由序列表的序列1和序列2所示DNA组成，对产组胺肠道菌的基因组DNA可以特异性扩增。将样品在含溴甲酚紫和组氨酸的固体细菌鉴别培养基培养，筛选出潜在产组胺细菌；之后扩增组氨酸脱羧酶hdc基因进一步鉴定；最后扩增产胺菌的16S rDNA片段可以鉴定其种类。本发明方法简单、快速、易于识别，可以在同一平板上区分产组胺肠道菌和非产组胺肠道菌，并通过分子生物学方法进一步鉴定，更加准确、可靠。本发明特别适用于评估发酵食品中组胺形成的风险性，对日常生产能有效、及时的进行质量控制，是一种很有应用前景的食品卫生检测技术。
文档编号C12Q1/04GKSQ
公开日日 申请日期日 优先权日日
发明者钱雨林, 闫寅卓, 陈晶瑜, 韩北忠, 鲁绯 申请人:中国农业大学后使用快捷导航没有帐号？
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QQ小野人, 积分 5, 距离下一级还需 45 积分
疾风的玩家小心了，不要随意相信那些什么辅助网站，辅助什么的，都是骗人的，我就是前车之鉴，我的号已经被洗了，金币，材料，只要是可交易的都会被盗走图是辅助的，都是假的，我因为一时的贪心，号被洗了，大家当心了，说神魔免费的都是假的，我只是下载了一下就直接毁了，他直接能叫你游戏窗口小伙伴们游戏是公平的，我今天只是想说下，也希望疾风官网可以阻止辅助的泛滥，也希望能尽快调查吓我的号，能不能找回，qq，冰霜部落，65级的血妖，名字坟头唱High歌
16:28 上传
别上当了，不然你会后悔的
最后登录注册时间阅读权限200精华1积分2030255帖子
我以为的遗忘，原来躺在你手上。
谢谢楼主的好意
这个是专门的举报地址
麻烦亲填写一下详细的信息（网站地址）
我们会进行收集统一处理的
关于你的账号问题，亲可以看一下这个被盗找回的FAQ。
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(?oˇ?ˇo?)有事说事?????????别人参公鸡
感谢楼主的反馈，可以到举报专帖提交一下，官方会核实处理。
建议先联系***问一下
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咕噜队长, 积分 4245, 距离下一级还需 755 积分
本帖最后由
21:46 编辑
劝你重新装一次系统，现在所有的杀毒软件都似摆设，也就是清清电脑**防一防最常见的盗号木马什么的这种简单病毒，稍微高级一点而且隐藏很深的病毒就无能为力了完全查不出来，根据我的经历分为两种一种是直接搞坏你的系统，还有一种像流氓一样时不时的断你的网即使你用一些断网急救修复的软件也没用，修得了一时修不了一世过两三天照样断你的网，或者偷偷下载一些软件....................就是各种玩死你让你不能好好上网。
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我最想要的，不是你我的重逢，而是一回头，你就还在我身边
楼楼可以参考楼上版主给出的链接进行举报哦
反馈区E组考核版主-小宇
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QQ土人 , 积分 285, 距离下一级还需 315 积分
本帖最后由 孙飞888 于
06:44 编辑
用辅助被洗号活该&&还找回尼嘛笔&&连傻笔都知道人家能弄出来高科技辅助啥的能不带病毒木马盗号么
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神器还是毒药？辅助瞄准详细解析
对FPS略知一二的玩家知道，FPS在脱离键鼠操作的时候在设置中会多出一个辅助瞄准。因为大部分都是用键盘和鼠标来玩射击游戏，手柄和触屏相对不习惯且操作要求较高，所以一般射击游戏都会添加这个功能来帮助玩家能顺利通关游戏。穿越火线手游端也不例外！
对FPS略知一二的玩家知道，FPS在脱离键鼠操作的时候在设置中会多出一个辅助瞄准。因为大部分都是用键盘和鼠标来玩射击游戏，手柄和触屏相对不习惯且操作要求较高，所以一般射击游戏都会添加这个功能来帮助玩家能顺利通关游戏。穿越火线手游端也不例外，相信玩家们受到它的帮助也不少。但是玩家们发现，辅助瞄准并不是一味的能&辅助&你，有时反而成了一个致命陷阱。为什么呢?容我慢慢道来。
一、辅助的分类
在设置里你可以看见两种辅助。一种是辅助瞄准，一种则是狙击辅助。顾名思义，辅助瞄准是针对于步***，手***等;狙击辅助则帮助你在使用狙击镜的时候瞄准。以下是辅助的效果图：
1.辅助瞄准：
　2.狙击辅助：
二、辅助的优缺点
由上面两个效果图，我们可以看到，开启了辅助瞄准的十字准星可以跟踪人物轨道，向人物转移，最后能准确的锁定在人物胸部位置。可能你会说，这样不是很厉害么，怎么会变成毒药呢?别急，让我来说。
首先，从玩家角度来说。无论是哪位fps玩家在玩射击游戏时都会有下意识的聚焦感，也就是想把准星对准目标后来达到击杀目的。(如同辅助瞄准)但是，鱼和熊掌往往不可兼得。亲爱的小伙伴们你是不是出现过一下的情况?
是不是很尴尬?这还不算&&
当有些玩家开着辅助瞄准，感觉上辅助准星对准了人，但是打上去后一点效果都没有。不是狙击还好，如果是狙击近身时发生这种情况，你也只好双手合十，祈祷对面不会开***吧。为什么会对不准?原因有以下几个：
目标不会是死靶子(除蹲点的例外)，是玩家都会知道通过走位来躲子弹，辅助瞄准都是半辅助，不会实时追随，速度是跟不上人行走速度的。下面是弹道测试图：
结合我所说的聚焦感，由于玩家急于收下眼前的人头，手会下意识的去瞄准目标，毕竟不是鼠标控制，不少人由于不习惯操作容易在手型上犯错，结合辅助瞄准速度的话。最后的结果会偏离你的首要目标，无论是在团队模式里还是爆破模式里，浪费几颗子弹而导致被击杀的例子不计其数。另外，辅助瞄准还有另外一个弱点，就是对目标的选择困难问题，有时你在攻击一个目标时，出现了另外一个目标从他面前走过，瞄准准星竟然去追随新的目标，让你进入尴尬境地。一系列弱点证明了准星的辅助并不意味着全部，适当的技术要求和技巧控制是掌握它的关键。我我研究了几个小诀窍，在这里给大家分享一下。
三、巧用辅助的技巧
1.辅助瞄准篇
一旦在哪里出错就一定要靠速度补回来，快速的视角切换来刷新辅助不失为一个好方法，所以我我把准星灵敏度上调到90度
你不需要担心过高的灵敏度会导致的视角转向过度，辅助在此时反而起了稳定视角的作用。另外在对***中，我建议不要通过转射击视角即右摇杆来瞄准，将其对准大概位置，然后调整左摇杆(最好顺着敌人移动方向)。因为有我们的辅助瞄准，玩家的单边操作就等同于双手操作，是个非常适合新手的方法。这种方法有个很简单的击杀方式，如下图所示：
没错，就是边墙卡点。有墙的保护和阻挡，你只要保持视线平行，爆头是分分钟的事情。即使没打中，你也只需要担心别人的手雷问题，一定是你有先手优势，对***是不可能快过你的。
虽然输了，但是KD说的过去，对吧(笑)~
　　2.狙击瞄准篇
对于狙击的设置略与辅助瞄准不同，要减少狙击***的失误次数，那就要在射击时充满自信。我调高了开镜灵敏度，在狙击射击上做了改动，将其改成单击开火。准星灵敏度也可以同第一个方法(副武器防身)
狙击开镜灵敏度上不需要调太高，以便自己微调。狙击***也以像步***一样在墙后卡点，只要对面一堆压过来(笑)。
要知道，辅助本质上并没有好坏，如果是毒药也是玩家自己给自己喝的。别以为FPS不需要动脑子，只要你运用正确的技巧和方式，辅助瞄准何尝不是一个神器呢?
以上就是我的评测和个人经验，希望大家能结合我的理论得到帮助。
手机看攻略，电脑玩游戏两不误！
加点再也不需要切来切去啦~
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