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请问:为何提的RNA 260/230 很低,该如何解决?(降解) - DNA技术 - 生物秀
标题: 请问:为何提的RNA 260/230 很低,该如何解决?(降解)
摘要: [请问:为何提的RNA 260 230 很低,该如何解决?(降解)] 最近用trizol(invitrogen)提了几次RNA,260 280〉1 75但是每次的260 230 都很低,都在0 5左右,我是完全按照说明书的步骤作的,不知道什么原因,请各位提供指导!图示非变形胶跑了30min的结果,RNA是不是有降解呀?
关键词:[降解]……
最近用trizol(invitrogen)提了几次RNA,260/280〉1.75但是每次的260/230 都很低,都在0.5左右,我是完全按照说明书的步骤作的,不知道什么原因,请各位提供指导!图示非变形胶跑了30min的结果,RNA是不是有降解呀?
回复请各位朋友提供指导!回复RNA似乎没有降解,可能是加氯仿剧烈摇晃不充分,或者氯仿离心后取上清太多了回复谢谢roc0101,那是不是用DNA 污染呀?我反复颠倒了很多次呀?不是说不能剧烈震荡吗?出现这种情况的时候,还有办法提高RNA的质量吗?回复怎么没有人提供指导呀?回复怎么没有人提供指导呀?回复加入氯仿后一定要剧烈振荡还有,上清不要取太多回复260/230好像是rna/苯酚吧?记不清了回复分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度,如 A 260 / A 280 的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是 280 nm。纯净的样品,比值大于 1.8(DNA)或者 2.0(RNA)。如果比值低于 1.8 或者2.0,表示存在RNA、蛋白质或者酚类物质的影响。A 230 表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸 A 260 / A 230 的比值大于 2.0。A 320 检测溶液的混浊度和其他干扰因子。纯样品,A 320 一般是 0。你的OD260/230值低的原因就是核酸中存在污染物,很可能是你使用融解DNA的缓冲液有污染,或者是因为调零不准、比色皿没有洗干净等。回复上清取得不多,500ul左右,我看到有的地方说不能剧烈震荡,所以每次都没有用votex,就是直接反复颠倒n多次!谢谢!260/230好像是说含的异硫氰酸胍的偏高,会影响下游的操作,但是我一直不明白自己试验的问题出在哪里?应该注意哪些事项,朋友们碰到这种问题的时候怎么解决呀?回复从图中,看不出明显的rna 降解,你说的260/230比值不是很重要,只要260/280>1.8就行了,反转录和后面的pcr 都没问题,不需要担心.这个不是实验的trick回复你的28S条带之后为什么还有一条小的条带?这个代表什么?回复1.你的RNA没有讲解,但是有DNA以及蛋白质的污染,而且紫外不是很准确,跑电泳可以看出问题,你28S上面那条跑出孔的带就是DNA,而残留在点样空中的亮点是蛋白质,所以做好的办法是使用酚氯仿抽提取一次,步骤就是在你的样品中加入等体积酚,然后混匀,静止5分钟,加入200UL氯仿,后面的步骤同提取RNA是一致的,这样就可以驱除DNA以及蛋白质回复在Invitrogen说明书里有说加氯仿后要用手剧烈晃动,只反复颠倒效果应该不够。另外吸取上清时一般看到中间的蛋白层出现扰动就不要再吸了,再吸的话很容易造成污染。回复28S上面那个小条带有可能是mRNA。看起来这批RNA提的没有降解,只是纯度不够,看你下游要做什么了,反转的话没有问题呀。
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尿酸正常了还会痛风吗?
状态:就诊前
希望提供的帮助:
尿酸正常了还会痛风吗?是否是风湿痛,我还患有强直性脊椎炎。
所就诊医院科室:
广州南方医院 风湿科
用药情况:
药物名称:苯溴马隆
服用说明:1片/天,3年了。
你目前血尿酸已降到230,但近三个月来连续痛风发作,如果仅有痛风说明你为痛风活动期,必须控制的活动。可服用:非甾类抗炎药(NSAIDs):(如:安康信、英太青、扶它林等)可迅速改善疼痛,减轻关节肿胀。建议你先服用安康信、一天一次,一次一片。
但你又患有强直性脊椎炎,强直性脊椎炎活动期也可引起关节肿痛,建议你查:血常规、红细胞沉降率(ESR)、C—反应蛋白(CRP)、抗链球菌溶血素“O”(ASO),判断一下目前强直性脊柱炎是否不活动期?如果是活动期,可能要调整一下治疗方案。
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疾病名称:降尿酸后,关节反而隐痛&&
希望得到的帮助:请给我一些治疗建议,谢谢!
病情描述:偶尔关注了下尿酸,经检查400,但是没有不适症状,觉得还是高点,就吃马隆片,每天半片,吃了7天,检查后降到了300,就继续吃,相当于巩固一下,吃了差不多40天,过程中身体各个关节不定时,位置...
疾病名称:我是痛风患者&&
希望得到的帮助:吃什么药
请给我一些治疗建议,谢谢
病情描述:手脚关节都有痛过
手脚关节都有痛过
投诉类型:
投诉说明:(200个汉字以内)
潘解萍大夫的信息
各种风湿病,如红斑狼疮、类风湿性关节炎、痛风性关节炎、干燥综合征、强直性脊柱炎、多发性肌炎、皮肌炎等...
潘解萍,女,主任医师,硕士生导师。1975年毕业于苏州医学院医疗系,2001年晋升为主任医师。1997年~2008年...
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广东省第二人民医院
风湿免疫科
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副主任医师
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山东大学齐鲁医院
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副主任医师
湘雅二医院
风湿免疫科CF为什么老是莫名其妙出230?
作者:soulmate 来源:本站原创 发布时间: 15:28:34
  问:CF为什么老是莫名其妙出230?
  答:没开挂的话就是系统问题 或者被挤下 BUG ,一些地图的问题,看rp了,我有时也会出现。
  更多CF热门资讯,请关注。欢迎进入与更多玩家讨论~
与CF问答相关的文章查看: 2508|回复: 15
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二等兵, 积分 505, 距离下一级还需 95 积分
腾讯公司能不能换个大一点的服务器,人一多就卡的进不去,动不动就出230,玩着玩着就集体退出,这么有钱的公司就不能搞个大点的服务器,生不带来,死带不走的东西,赚TM够40代人花的废纸了,就尼玛在这抠抠搜搜的。
有人会说是网络的问题,我尼玛20兆宽带,高配置的电脑,GTA4都能通畅玩,一个蛋大的CF卡的玩不了
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现在的人真是难伺候死了!
中校, 积分 113620, 距离下一级还需 6380 积分
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你是我的小呀小苹果怎么爱你都不嫌多
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假如我爱你,碰巧你也爱着我,如此甚好。
少校, 积分 72870, 距离下一级还需 7130 积分
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ID:飞越心空
孩子撸管老不射 多半是废了!
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像我发的这帖子,分分钟钟点就会被管理给删除,这是对他们的主子大不敬
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          苏阳,         10/23?          
230也有可能是网络不稳定导致的
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再者说了,人家有这权限,咱一普普通通一老百姓,胳膊拧不过大腿啊,咱也只能发发牢骚,这牢骚分分钟就看不见了
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删除吧 发泄完了 也就不生气了&&之后的事情都无所谓 看看这管理的心情如何哇&&心情好了只删帖 心情不好了 把IP都封了 让你丫得瑟& & 最后的结果代表&&
我尼玛有权限 你有么
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就跟2014年的中?人民***一样,我有***,你有么,我可以分分钟除掉你,死无对证,现在各种罪都必须死,因为什么呢,因为我有权,武器在我手上,上面查下来,就说***走火了,罪不至死
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腾讯的各个游戏的管理员也同样是这样的想法
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当然,有时候发发牢骚都会让一个人再见不到第二天的太阳,咱上面有人,顺着IP地址就过来了,罪过就是你对腾讯大不敬,被秘密逮捕或者秘密处决
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楼主真行啊 老马看了也说不出话了吧
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羽川英乃 发表于
楼主真行啊 老马看了也说不出话了吧
我是想让那些对腾讯忠诚的亲们看看,腾讯对你又是如何敷衍的
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一等兵, 积分 705, 距离下一级还需 495 积分
没办法咱们只是平民
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二等兵, 积分 505, 距离下一级还需 95 积分
可惜老马是看不到了
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    我就是太阳,  无需凭借谁的光。
上校, 积分 149000, 距离下一级还需 11000 积分
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