求***，就急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急急！！！！三、计算题：（共32分）l、直接写出下面各题的得数：（5分）34×5＝
0.37＋＝　　
0.99÷1.l＝　
0.6÷35 ＝
0.375÷ ＝
254＋98＝2、解方程：（12分）1.2X－0.8X－6＝16
8∶X ＝5∶0.4 4X十0.7×3＝
5X＋3X＝2643、下面各题，怎样算简便就怎样算。（15分）3.7× ＋5.3×0.75＋
9.9＋99.9＋999.96.8÷4－1.2×25%＋4 ×0.25　　　　　　　（＋）×24×15四、操作题（共14分）l、一个长方形运动场长为200米，宽为120米，请用的比例尺画出它的平面图和它的所有对称轴。（4分）2、①、将下面的三角形ABC，先向下平移5格，再向左平移4格。（2分）
②、将下面的三角形ABC，绕C点逆时针旋转90°。（2分）③、将下面的三角形ABC，按2：1放大。（2分）。④、在三角形ABC的C点南偏东45°方向2厘米处画一个直径3厘米的圆（长度为实际长度）。（2分）3、画图分析（2分）：有一个水池里竖着一块牌子，上面写着“平均水深1.5米”。某人身高1.75米，他不会游泳，如果不慎掉入水池中，他是否有生命危险？为什么？五、解决实际问题：（24分）l、下面各题，只列出综合算式，不解答。（8分）①、六一儿童节，同学们做纸花，六年级做了120朵，五年级做了100朵，六年级比五年级多做百分之几？②、六年级有男生80人，比女生多，女生有多少人？③、王庄去年总产值为23.5万元，今年比去年增加了20％，今年的产值是多少万元？④、小林的妈妈在农业银行买了6000元国家建设债券，定期3年，年利率为2.89％，到期她可获得利息多少元？2、学校食堂五月份烧煤9.3吨，六月份烧煤9吨，两个月平均每天烧煤多少吨？（4分）3、一辆汽车从甲地开往乙地，前3小时行了168千米，照这样的速度又行了5小时，正好到达乙地，甲乙两地相距多少千米？（4分）4、一个装满汽油的圆柱形油桶，从里面量，底面半径为l米。如用去这桶油的后还剩628升，求这个油桶的高。（列方程解）（4分）5、如果参加2008年奥运会的足球队有32支，自始至终用淘汰制进行比赛。①、全部比赛一共需要多少场？（2分）②、如果每天安排3场比赛，全部比赛大约需要多少天？（2分）
三、计算题：（共32分）l、直接写出下面各题的得数：（5分）34×5＝ 170 ，
0.37＋＝，　
0.99÷1.l＝0.9 ，
1÷119 ＝1/119，
0.6÷35 ＝1/175，
0.375÷ ＝
40×101＝4040
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标题: 求助6×His tag的问题，急！！！
摘要: 求助6×His tag的问题，急！！！有一个基因，买不到其蛋白产物的抗体。想在基因上加一个6×His tag，有几个问题想请教各位战友：1
tag是加在N端还是C端好？2
tag 前端、后端需不需要加别的碱基？3
直接把6个组氨酸的编码序列设计入PCR引物中可以吗？4
想要加蛋白酶酶切位点怎么办？5
有哪些注意事项？谢谢各位大侠了！！！！！！ 关键词:[组氨酸 碱基 抗体 编码序列 酶切位点]……
有一个基因，买不到其蛋白产物的抗体。想在基因上加一个6×His tag，有几个问题想请教各位朋友：1. tag是加在N端还是C端好？2. tag 前端、后端需不需要加别的碱基？3. 直接把6个组氨酸的编码序列设计入PCR引物中可以吗？4. 想要加蛋白酶酶切位点怎么办？5. 有哪些注意事项？谢谢各位大侠了！！！！！！
1. Most time, People put tag at the N terminus. You can put tag at C terminus too (but you need to delete the stop codon of your
Another thing is you need to think about the effect of the tag on your gene when you put tag at different position.2. if you want to put tag at N terminus of your gene,
you need ATG as thestart codon before the tag,. Some People like to add some bases after the tag which is called linker sequence. You can do that if you want.3. Yes, you can put 6X His on your primer.4.Put the enzyme site at
the postion you want in the primers. or you can do the mutation to introduce the site.5. You can also add Flag, HA or Myc as tag for your gene.Hope that helps.
对于问题4想要加蛋白酶酶切位点怎么办？补充一点：可以自已将现有的载体进行改造加入你需要的蛋白酶片段，也可以选用含你想要的蛋白酶的载体。
谢谢各位的指点，在此一并谢过。感激不尽！！！
补充一下：1、如果你的目的蛋白有确定的三维结构，请注意HisTag如果被埋在蛋白内部对于以后的纯化会很不利。2、HisTag最好用Met隔开，如果它影响到表达蛋白的活性，需要在后步切去。
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