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使用Gateway&技术进行克隆和表达，一切皆有可能
Gateway&技术提供以下可能：
通过去除冗长的亚克隆步骤节省您的时间
时将您的基因转入到多个表达系统
在任何您选择的系统――体外，细菌，酵母，昆虫，或哺乳动物――分析表达
（我们提供的产品正在不断的扩展。如需要广泛的信息资源，请联系技术服务或登录）
一种更好的克隆方法
&&& Gateway&技术能够克隆一个或多个基因进入到任何蛋白表达系统（图1）。这项强大的体外技术大大地简化了基因克隆和亚克隆的步骤，而同时典型的克隆效率高达95％或更高。当基因在目的表达载体之间快速简便的穿梭时，还可以保证正确的方向和阅读框。Gateway&也有助于进行带不同数目纯化和检测标签的表达。
&&& Gateway&利用了位点特异重组，所以在构建入门载体后，不再需要使用限制性内切酶和连接酶。一旦您拥有了一个入门克隆，就可以多次使用它，转移您感兴趣的基因到Gateway&改造过的
的各种表达载体（目的载体）。
&&& 此外，由于在重组时DNA片段的阅读框和方向保持不变，因而您不必再为新的表达克隆的测序担心。在使用每一种新的表达系统时，将会节省您更多的时间。
图1-Gateway&技术的灵活性
*目的基因克隆进入门载体后，
可以同时转移目的基因到多个目的载体。
一种强大而可靠的技术
&&& Gateway&技术是克隆和亚克隆DNA序列的一项新颖的通用系统，便于功能基因的分析和蛋白质的表达。一旦进入这个多功能的操作系统，DNA片段可以通过位点特异的重组在载体之间转移。
&&&Gateway&技术是基于已研究的非常清楚的λ嗜菌体位点特异重组系统（attB
x attP →attL x attR）。BP和LR两个反应就构成了Gateway&技术（表1和图2）。BP反应利用一个attB
DNA片段或表达克隆和一个attP供体载体之间的重组反应，创建一个入门克隆。LR反应是一个attL入门克隆和一个attR目的载体之间的重组反应。LR反应用来在在平行的反应中转移目的序列到一个或更多个目的载体。
&&& Gateway&技术也利用了ccdB选择方法，确保高效率的分离重组克隆。典型的效率是＞95％。需要了解更多的有关ccdB的信息，请参考术语表。
表1-反应和术语总结
attB x attP
attL1-基因-attL2
attL x attR
attB1-基因-attB2
完成构建Gateway&表达克隆仅需两步（图2）：
创建入门克隆，通过PCR或传统的克隆方法将目的基因克隆进入门载体。
混合包含目的基因的入门克隆和合适的目的载体及Gateway&
LR Clonase&酶，产生表达克隆。（表达克隆用来在合适的宿主中进行蛋白的表达和分析。）
图2-Gateway&技术总结
&在BP反应中基因转移形成入门克隆，在LR反应中入门克隆可以作为反应物产生最终的表达克隆。
可以通过以下几种方法构建Gateway&入门载体。无论您选择何种方法，创建的入门载体都是用来与各种目的载体进行重组。图3-Gateway&定向TOPO&克隆
PCR克隆（定向TOPO&克隆至入门载体或与供载体BxP重组）
限制性内切酶消化和连接进入入门载体
使用pCMV·SPORT6或pEXP-AD502*构建Gateway&兼容cDNA文库
Gateway&改造过的克隆资源*
这些克隆资源和cDNA文库两边加有attB位点。这些克隆可以通过与供载体及BP
Clonase&酶反应转换到入门载体。请登录获得已有克隆资源的更多信息。)
PCR-定向(PCR-Directional)TOPO&克隆
&&& 定向TOPO&克隆使得克隆PCR产物和其它的DNA分子更加快速和有效。进行5分钟的简单连接，产生＞90％的重组子。您不仅会比用连接酶介导的方法更快的获得克隆，而且可以节省因第一次无结果而重复试验所额外浪费的时间。
&&& 定向TOPO&克隆提供高效的一步法克隆策略，可以定向克隆平端PCR产物到入门载体。平端PCR产物定向克隆的效率＞90％，从而简化了筛选。同时不再需要连接酶、PCR后续步骤或限制性内切酶。
&&& 目前有两种定向TOPO&克隆载体:pE***/D-TOPO&
和pE***/SD/D-TOPO&（表2和图3），它们具有有以下特点：
位于PCR产物插入位点两侧的attL重组位点可以与Gateway&目的载体进行有效重组
通用M13位点便于测序
基于pUC的ori位点提供高产量质粒
大肠杆菌中卡那霉素（kanamycin）抗性基因筛选
表2-两种pE***/D-TOPO&载体的简单比较
pE***/D-TOPO&
无SD(Shine-Dalgarno)位点
真核细胞中天然、N-或C-端融合；大肠杆菌中N-端融合；如果基因包含有SD序列，可在大肠杆菌中进行C-端或天然蛋白表达
pE***/SD/ D-TOPO&
含SD(Shine-Dalgarno)位点
包含基因10和一个SD序列，可以有效的启动天然蛋白和融合蛋白在大肠杆菌中的表达
构建入门载体的各种选择
限制性内切酶消化
&&& 作为PCR克隆的替代方法，有5种Gateway&入门载体可以使用传统的限制酶切和连接的方法产生入门克隆。这些载体配合合适的目的载体，可以用于表达天然蛋白或带有N端或C端融合标签的重组蛋白。为了在真核细胞中有效地翻译蛋白，所有的5个Gateway&入门载体提供了Kozak
序列。此外，pE***&11提供了SD (Shine-Dalgarno)序列，便于在大肠杆菌中有效的翻译。
B PCR重组克隆
&&& 重组是从PCR产物创建Gateway&入门克隆的另一种方法。这种方法是通过合并attB位点到上游和下游引物上，然后共同孵育扩增PCR产物和pDONRTM载体(包含attP位点)及Gateway&
BP ClonaseTM酶混合物。接着转化进大肠杆菌中，您将会获得包含目的基因的入门克隆，同时目的基因两侧具有attL重组位点。这个入门克隆可以与任何Gateway&目的载体进行重组（参看图2）。
C Gateway&改造过的cDNA文库
&&& 如果您已经有了用Gateway兼容载体构建的cDNA文库，您就可以通过pDONRTM载体和BP
ClonaseTM酶混合物进行一个简单的重组反应，很容易地把单个克隆转换成Gateway&入门克隆。这样就不再需要亚克隆和测序，为您节约数小时的时间。SuperScript
cDNA文库使用pCMV·SPORT（登录获得更多信息）构建，有几种的人组织来源可供选择，这些文库有很大一部分是全长的插入片段，可以完全代表来源mRNA。如要了解Gateway兼容文库的详细列表，请登录/fulllength.
入门克隆的切入点――克隆资源
&&& 您可以从与10000个与人类基因相关的35000个克隆中进行选择，这些克隆的70％以上是全长序列的。这些克隆来源于使用特殊的高级cDNA文库构建技术，oligo
dT引物，以及SuperScriptTM II
反转录酶所构建的文库。许多克隆来源于I.M.A.G.E.协会，NCI
项目，ResGenTM库或UltimateORF库。克隆资源因为已克隆到Gateway改造过的载体，所以可以快速地将基因转到各种表达系统中。
图4-进入Gateway&系统的各种路线
* 目前的克隆资源带有attB位点，需要与pDONR质粒重组
触手可及的最高级表达系统
&&& 一旦您构建好Gateway&入门克隆，蛋白表达和分析的大门就会向您敞开。使用Gateway&技术，您可以进入到几乎是无数种的表达系统。因为没有一个单一的表达系统蛋白适合于每一种蛋白，优化基因表达的最好方法是在多个系统中分析您的蛋白（图5）。
&&& 为了扩展表达的选择，Invitrogen
已将Gateway技术合并到部分最高级的表达系统中。无论您选择哪个系统――体外，细菌，酵母，昆虫，或哺乳动物――都可以获得Gateway&目的载体。此外，你可以很容易地把你自己最喜欢的表达载体转换成Gateway&目的载体。
图5-在Gateway&系统表达全长开放阅读框
大肠杆菌GUS基因、人类MAP4和Eif-4E基因平行转移进目的载体，在Sf9昆虫细胞(杆状病毒)或大肠杆菌BL21-SITM菌株表达天然蛋白、N-端His或N-端GST融合蛋白。在所有的系统中均观察到GUS良好的表达，而MAP4只在昆虫细胞中表达，Eif-4E只在大肠杆菌中表达。在Hartley,
J.L. et al. (2000) Genome Research 10(11):1788-95
可以找到更多的细节。
表3-Gateway&技术入门选择
进入Gateway&
使用PCR和BP重组
使用限制性内切酶和超螺旋载体
Gateway&和pDONR&221PCR克隆系统
pE***&1A入门载体
卡那霉素抗性pDONR&221
pE***&2B入门载体
庆大霉素抗性pDONR&207
pE***&3C入门载体
使用TOPO&克隆
pE***&4入门载体
pE***/D-TOPO& Cloning Kit
pE***&11入门载体
HTP pE***/D-TOPO& Cloning Kit
Gateway&酶混合物
HTP pE***/D-TOPO& Cloning Kit
Gateway& BP Clonase&酶混合物
pE***/SD/D-TOPO& Cloning Kit
Gateway& LR Clonase&酶混合物
HTP pE***/SD/D-TOPO& Cloning Kit
Gateway& LR Clonase&Plus
HTP pE***/SD/D-TOPO& Cloning Kit
&&& Expressway in vitro蛋白合成系统简化当前市场上的体外（无细胞）表达系统。仅需两小时，您就可以在一个反应管中获得高达50μg的表达蛋白，而无须传统细胞表达体系的烦琐和花费。仅需加入优化构建的超螺旋或线性DNA模板到Expressway反应管，DNA模板由T7启动子驱动。每一个反应管中包括大肠杆菌（E.coli）抽提物（可以同时进行转录和翻译）和强大的ATP能量更新系统（保证连续高水平活跃蛋白表达的能量水平要求）。
&&& Gateway&技术为进行基因功能分析和蛋白表达提供了广泛深入的方法。您可以通过把目的基因转移到优化构建的体外表达载体，pEXP1-DEST
或pEXP2-DEST（表4）（包括在系统中），然后开始体外蛋白合成。pEXP1-DEST
或pEXP2-DEST载体中的T7启动子，核糖体结合位点（RBS）(仅pEXP1-DEST)以及T7终止子之间的间隔的序列搭配都为Expressway的蛋白表达专门优化（图6），从而用Expressway进行蛋白表达。转移的基因定向、阅读框正确，并随时可以用于表达。
图6 pEXP1-DEST&
和pEXP2-DEST&载体
表4-Gateway&体外蛋白合成目的载体
pEXP1-DEST&
N-端6xHis,具有EK裂解酶识别位点的XpressTM表位
·体外表达最佳配置
·T7启动子产生重组蛋白
提供ProBondTM树脂快速纯化
·V5表位提供方便的检测
·表位激酶识别位点可以进行裂解（pEXP1-DEST）
pEXP2-DEST&
C-端V5-6xHis标签提供方便的检测和纯化
大肠杆菌表达
&&& 大肠杆菌提供了几种有利于重组蛋白生产的优点，包括容易操作、生长迅速和培养基要求简单。大肠杆菌非常适于表达用于抗体生产和结构研究的蛋白。
&&& 目前有很多具有不同启动子的大肠杆菌目的载体（表5），从而为您提供一系列表达选择。Gateway&目的载体也会为您提供N端或/和C端融合标签的选择，从而简化表达蛋白的纯化和检测。
表5－Gateway&大肠杆菌表达目的载体
pBAD-DEST49*
· araBAD启动子
· N-端硫氧还蛋白
· C-端V5-6xHis
毒性蛋白严谨调节表达
融合部分提供有效蛋白翻译和增加可溶性
· V5表位检测
提供ProBond&树脂快速纯化
pET-DEST42*
· T7/Lac启动子
· C-端V5-6xHis
· T7启动子提供高产量的重组蛋白
· T7启动子下游lacO
操纵子序列提供lac抑制子的结合
· lac抑制子（lacI）提供大肠杆菌中严谨转录调节
· V5表位检测
提供ProBond&树脂快速纯化
· T7启动子提供高产量的重组蛋白
简单柱纯化（pDEST&15和pDEST&24）
提供ProBond&树脂快速纯化(pDEST&17*)
· N-端GST
· N-端6xHis
· C-端GST
* 6xHis标签来自Qiagen授权
&&&& 酵母是最简单的真核生物之一。基因组了解清楚，生长迅速，并且非常适于大规模发酵。由于酵母是真核细胞，它可以进行高等真核细胞的一些翻译后修饰，因而可以在廉价、易于操作的宿主中，为您提供一些哺乳动物表达的优点。Invitrogen
的Gateway&酵母表达目的载体（表6）允许您利用酵母表达的优势生产目的蛋白。
表6-Gateway&酵母表达目的载体
pYES2-DEST52
GAL4启动子
C-末端V5-6xHis
·　S. cerevisiae中高水平表达
·　V5检测表位
·　6xHis进行快速纯化（ProBond& resin）
在酵母中进行功能分析
&&& 除了在酵母中表达蛋白，现在用于研究蛋白－蛋白相互作用的ProQuest&酵母双杂交系统也是Gateway&-改造过的（表7）。这种双杂交系统允许您：
通过重组反应转移目的基因到bait载体或prey载体
使用基于GAL4转录因子重建系统确定相互作用
筛选完整文库或单一克隆
通过提供低拷贝数质粒，具有独立启动子的三种报告基因，阳性和阴性对照，及一组扩展的酵母对照菌株降低假阳性率。
快速转移DNA序列进其它系统进行多种应用
表7-ProQuest&双杂交系统
ProQuest&Two- HybridSystem with Gateway·Technology
系统包括：
pEXP-AD502(未酶切)*
·　确定两个蛋白之间相互作用的完全酵母系统
·　构建cDNA或基因组文库，确定与bait蛋白相互作用的蛋白
·　构建bait
·　为第二个已知目的基因构建prey
·　使用传统的方法构建bait
pEXP-AD502 Not I-Sal I Cut
·　进行cDNA或基因组文库定向克隆的激活结构域融合载体
·　组成型中等强度启动子
·　构建cDNA或基因组文库，确定与bait蛋白相互作用的蛋白
* 3个载体全部是Gateway&-改造过的，而且具有att重组位点。
昆虫细胞表达
&&& 昆虫可以提供重组蛋白高水平、可溶性的表达。由于昆虫细胞是较高等的真核细胞，它可以提供很多哺乳动物的翻译后修饰及悬浮状态下生长的优势。由于杆状病毒和果蝇表达系统（DES&·）的改进，蛋白在昆虫细胞中表达已经大大简化。Invitrogen
Gateway&昆虫表达目的载体允许您在您选择的昆虫系统中生产蛋白，并且获得您想要的表达结果。
&&& Bac-to- Bac&杆状病毒表达系统通过应用与bacmid的体内重组，简化了杆状病毒的表达。这将允许您快速、简便地生产可以在昆虫细胞中表达的重组杆状病毒载体。目前有3种Gateway&目的载体可以满足Bac-to-
Bac&杆状病毒表达系统的应用。这些载体允许裂解病毒系统中多角体(polyhedron)启动子控制下的天然蛋白、6xHis融合蛋白或GST融合蛋白的表达。
&&& 果蝇表达系统（DES&）允许在果蝇S2细胞中进行非裂解稳定或瞬时重组蛋白的表达。DES&使用简单的载体及直接的转染方法，然而却生产高水平的重组蛋白。最早自转染后两天就能够观察到瞬时表达，而仅仅两周就可以建立稳定的多克隆细胞系。我们提供的产品正在不断的扩展。如需要广泛的信息资源，请联系技术服务或登录
表8- Gateway&目的载体
polyhedrin
启动子,无标签（天然蛋白）
· Bac-to- Bac&系统高水平表达
快速、容易生产重组杆状病毒
· ProBond&树脂快速纯化（pDEST&10*）
简单的柱纯化（pDEST&20*）
polyhedrin
启动子,N-端6xHis
polyhedrin
启动子,N-端GST
稳定昆虫表达
pMT-DEST48
金属硫蛋白启动子C-端V5-6xHis
· DES&系统金属诱导的高水平表达
· V5表位检测融合蛋白
提供ProBond&树脂快速纯化
质粒-基础的系统提供昆虫细胞中异源蛋白的表达
pIB/V5-His-DEST
OpIE2启动子GP64启动子
C-端V5-6xHis
与两侧加有attL位点的Gateway&入门载体有效重组
快速筛选稳定细胞系
目的基因组成性表达
表达bsd抗性基因
﹡6xHis标签来自Qiagen授权。
哺乳动物表达
&&& 哺乳动物表达系统通常用来生产较高等的真核细胞蛋白。由于转录、mRNA加工和翻译的信号是保守的，因而哺乳动物细胞一般会产生正确加工的、有活性的蛋白。哺乳动物表达系统是生产天然蛋白的理想表达系统，这些天然蛋白可以用于功能的研究和应用。
&&& 许多Invitrogen高级哺乳动物载体已经被改造，以使用Gateway&技术（表9）。可以得到高水平诱导和组成表达Gateway&目的载体。这些载体提供各种N-或C-端融合标签，从而对表达蛋白进行方便和可靠的检测和纯化。
表9- Gateway&哺乳动物目的载体
哺乳动物细胞调控表达
pT-REx-DEST30
CMV启动子,无标签（天然蛋白）
· CMV/TetO2启动子进行四环素调控表达
最高水平的诱导表达
· 6xHis提供ProBond&树脂快速纯化（pT-REx-DEST31*）
pT-REx-DEST31*
CMV启动子,N-端6xHis
哺乳动物细胞组成表达
CMV启动子,N-端6xHis
CMV启动子,N-端GST
pcDNA-DEST40*
CMV启动子,C-端V5-6xHis
· CMV启动子高水平组成型表达
选择标签进行检测、纯化或用做报告子
pcDNA-DEST47
CMV启动子,C-端GFP
pcDNA-DEST53
CMV启动子,N-端GFP
pcDNA&3.1/nV5-DEST*
pcDNA&3.2-DEST
pcDNA&v6.2-DEST*
pDEST&12.2
CMV启动子,无标签（天然蛋白）
pEF-DEST51*
EF-α启动子,C-端V5-6xHis
来自于非病毒启动子的高水平组成性表达
· V5表位简化融合蛋白检测
提供ProBond&树脂快速纯化
pAD/CMV/V5-DEST&
· Virapower
腺病毒表达系统进行高水平瞬时表达
可以选择CMV或您自己的启动子
选择标签进行检测、纯化或用做报告子
pAD/pl- DEST&
PLenti6/V5-DEST&
· Virapower
慢病毒表达系统
· CMV启动子提供高水平表达
· V5表位简化融合蛋白检测
cDNA文库构建载体
pCMVSPORT6
NotⅠ-SalⅠcut**
· cDNA定向克隆产生Gateway&-兼容文库
* 6xHis标签来自Qiagen授权。
** pCMV·SPORT6
包含attB位点，而且可以用限制性内切酶和连接酶进行传统的克隆。
使您的最喜欢的载体与Gateway&兼容
&&& Gateway&技术具有非常大的灵活性，它允许您把您最喜欢的载体作为目的载体。您可以使用Gateway&转换系统（图6），很容易地把任何载体变成Gateway&兼容载体。仅仅需要在您的载体的平末端限制性酶切位点插入一个包含attR重组位点的盒（cassette），用氯霉素抗性筛选转换子。目前有三种平末端的盒，可以将任何表达载体转化成目的载体，每个盒在5’端含有attR1位点，后面带氯霉素抗性基因(Cmr)和ccdB基因。attR2位点的盒的3’端，每个盒在三个可能的开放阅读框中的一个框架中连接N端和C端的融合蛋白。
图7- Gateway&载体转换盒
Gateway Vector Conversion System
克隆多个片段的前所未有的灵活性
&&& 从以往来看，克隆多个片段到一个载体上一直是一个烦琐和耗时的过程。可以使用的限制性内切酶位点的局限和一次构建只能有一个的结果限制了成功。现在，多位点Gateway&技术（MultiSite
Gateway&Technology）为您提供这种灵活性，可以使用不同的重组反应组装片段，同时利用重组克隆的优势，确保准确、有效和定向的组装。
使用多位点Gateway&技术：
筛选来自不同启动子的表达
添加启动子/标签元件到当前的Gateway&入门克隆
转换编码蛋白结构域
构建生物学或生物化学途径
&&& 多位点Gateway&载体构建试剂盒（MultiSite
Gateway& vector construction kit）可以用于3个片段的克隆方案。当您希望将不同的5’和3’片段添加到开放阅读框或基因从而获得多重功能时，使用这个试剂盒组装多个表达克隆（图8）。多位点Gateway&技术使得复杂的克隆方案变得更加简单和有效。
图8-多位点Gateway&技术――前所未有的灵活性
MultiSite Gateway Three-fragment Vector
实验室定制服务
&&& 为了节省您在进行Gateway&克隆时的时间和精力，Invitrogen
提供广泛的定制服务。如果您打算使用定向TOPO&克隆或重组的方法来克隆您的目的基因，
Invitrogen可以为您合成PCR引物。我们可以帮助您设计准确克隆和重组的引物，同时能保持基因的阅读框。引物通过Parallel
Array Synthesis&技术合成，并且可以以两种形式获得－－2ml
离心管冻干形式或进行自动操作的96-孔的冻干形式。需要更多细节请登录。
&&& 除了引物合成以外，Invitrogen
提供还提供多种分子生物学服务，从而节省您宝贵的时间、精力和资源。利用我们训练有素的科学家完成您的全部或部分项目，这样将会增加您的能力和减少周转时间。我们提供的一些服务包括：
定制Gateway&兼容表达载体
优化、扩增和克隆
Gateway&入门克隆重组进入任何数量的Gateway&目的载体
具有高同量克隆能力的TOPO&克隆
表达的检测和蛋白的生产
Gateway&――开放共享的系统
购买克隆技术产品（例如，TOPO& cloning，TOPO TA cloning&，TA cloning&，TOPO& Tools，Drectional TOPO& cloning，Zero
Background&，Gateway& cloning Systems和Echo& cloning Systems）就可以获得如下的有限授权：您可以根据随产品的有限标签授权协议中所阐述的条款获得使用产品的知识产权。
&&& 克隆技术产品和它们的使用是U.S.专利No.5,888,732；6,143,557；6,171,861；5,766,891；5,487,993；5,827,657；5,910,438；6,180,407；5,851,808；6,270,969和/或其它未定的U.S和外国专利的主体，它们被Invitrogen 公司拥有和授权。使用这些产品要求Invitrogen 公司许可。购买这些产品可以获得一些有限的不可以转让的权利。
&&& 购买这些产品的价格包括有限和不可以转让的权利，只能单独使用所购量的产品进行内部研究。Invitrogen 保留其它所有权利，产品购买者不可以转让和出售所购产品或成分或衍生物到第三方，产品购买者无权对产品或组分或衍生物进行所限定的商业目的使用。
&&& 商业目的意味着某一团体获利的任何活动。这些活动包括，但并不限于：① 在生产中使用产品或组分或衍生物。② 使用产品或组分或衍生物提供服务、信息或数据。③使用产品或组分或衍生物用于诊断目的。④ 转让或出售通过产品或产品的组分或衍生物所制备的载体、克隆和文库，或⑤再一次出售产品或它的组分或衍生物，无论这一产品或它的组分或衍生物被再一次出售是否用于研究。
attL,attR,atttB，and attP Gateway&技术中使用的来源于λ嗜菌体重组位点。
在LR Clonase&酶混合物介导的反应中，attL总是与attR重组，LR反应是入门克隆x目的载体反应的基础。attL
和attR位点重组反应后，在产物质粒上形成attB和attP位点。
在BP Clonase&酶混合物介导的反应中，attB总是与attP重组，BP反应是PCR克隆载体（pDONRTM）与包含有attB
位点的PCR产物、克隆资源或cDNA文库克隆之间反应的基础。attB
和attP位点重组反应后，在产物质粒上形成attL和attR位点。
BP Clonase& enzyme mix（BP Clonase&酶混合物）
λ嗜菌体重组蛋白的全部混合物，介导attBxattP重组反应。
ccdB gene（ccdB基因） 编码干扰大肠杆菌DNA促旋酶的一种蛋白，从而抑制标准大肠杆菌宿主的生长。这个基因存在于Gateway&目的载体、供载体（donor
vector）和一些入门载体。当目的载体和入门克隆发生重组时，ccdB基因被目的基因取代。携带有ccdB基因的未反应载体、或保留有ccdB基因副产品的细胞将不会生长。这将允许高效回收那些想要的克隆。
DB3.1& Competent Cells（DB3.1&感受态细胞） 这些细胞对于ccd基因的产物具有抵抗作用，因而用来扩增包含ccd基因的载体（例如pDONR&，超螺旋pE***&,目的载体）。
Destination vector（目的载体）
Gateway&适应载体，包含attR位点，允许与入门克隆重组。可以得到用于原核、酵母、昆虫、或哺乳动物系统及天然或融合蛋白表达的载体。
Directional TOPO& Cloning（定向TOPO&克隆） 一种PCR克隆方法，PCR产物优先以5’→3’方向插入载体。参看TOPO&克隆，选择入门系统插页。
Donor vector(pDONR&)（供载体） 包含attP位点的Gateway&载体。这个载体用来克隆两侧具有attB位点（表达克隆）的PCR产物或目的基因，产生入门克隆。当具有attB位点的PCR片段与pDONRTM载体在BP反应中进行重组时，它们会产生入门克隆。PCR片段（attB位点）＋pDONRTM载体（attP位点）→入门克隆
Entry clone（入门克隆） 克隆DNA片段到入门载体或供载体（donor
vector）的产物。入门克隆包含两侧具有attL位点的目的基因。可以用于随后的向目的载体的基因转移。
Entry vector (pE***&)（入门载体） 包含attP位点的Gateway&载体。通过使用定向TOPO&克隆或传统的限制性内切酶和连接酶的方法，克隆DNA片段。
Expression clone（表达克隆）
通过重组反应，亚克隆入门载体中的目的DNA片段进入到目的载体后的产物。目的基因或DNA两侧具有attB位点。表达克隆可能是融合蛋白或天然蛋白。
入门克隆＋目的载体→表达克隆
LR Clonase& enzyme mix（LR Clonase&
酶混合物）
λ嗜菌体独有的/特殊的重组蛋白混合物，介导attLxattR重组反应。
Recombination site（重组位点） 参看attL,attR,atttB和attP
TOPO&cloning（TOPO&克隆） 一种快速、有效的PCR克隆方法，这种方法利用了DNA拓朴异构酶Ⅰ的再连接活性。
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经营许可证编号:京ICP证010510求一WOW的LR名字？
求一WOW的LR名字？
09-05-23 &
纸鸢----风筝的意思，又体现出猎人的职业，也比较适合女号。 暗花----黑道的悬赏，叫赏金猎人太俗气，暗花更酷点。 临暗----黄昏,接近夜晚的意思，适合暗夜精灵猎人，因为有影遁。 说好听点，甜甜这2个字真是挺……不好的，不建议用，起个有内涵的名字不是更好。
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嘿嘿?“名字取的太长躲在树后面容易被发现”
请登录后再发表评论!
一箭一个钱
请登录后再发表评论!求魔兽世界猎人名字！_百度知道%prompt 五笔
# 把 selkey 设为 的人可能要设为 10
%dupsel 10
%key_prompt 1
#%wildcardkey ?
%wildcardkey z
# prompt the uninput key
%keyname begin
#z z z can be used as a wildcardkey?
%keyname end
aaaa 恭恭敬敬
aady 落落大方
aaei 勤工助学
aaff 蓬蓬勃勃
aagp 勤劳致富
aaie 卧薪尝胆
aait 工艺流程
aajh 蒸蒸日上
aakk 工艺品
aapp 切切实实
aarl 芭蕾舞
aarr 熙熙攘攘
aatu 莫斯科
aaus 工艺美术
aavv 勤勤恳恳
aawi 勤工俭学
acak 戒骄戒躁
adah 藏龙卧虎
adhh 基础上
adrl 若有所思
adwo 工矿企业
adyt 蒙古族
afag 若无其事
afaq 东城区
afft 劳动者
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aprg 工农兵
apst 切实可行
aqai 或多或少
aqav 莫名其妙
aqjw 黄金时代
aqtn 苯鸟先飞
aqts 节外生枝
aqxw 劳逸结合
arwe 七手八脚
ashh 基本上
aslt 基本国策
aspe 艺术家
atjg 工程师
atlg 共和国
attu 切身利益
auik ***员
auip ***
auog 工商业
auxk 工资级别
auyy 共产主义
avit 甘肃省
awax 勤俭节约
awft 工作者
awhh 工作上
awjj 节假日
awpe 革命家
awpy 欺人之谈
awvl 勤俭建国
awwx 革命化
axfc 苏维埃
axga 薄弱环节
bbpu 孤陋寡闻
bbxx 隐隐约约
bdbf 阳奉阴违
bdwp 取而代之
bgfh 了不起
bhgu 耳目一新
bjbf 随时随地
bjft 聪明才智
bnhk 出发点
bowp 聚精会神
bpgn 取之不尽
bpit 辽宁省
brwr 阿拉伯
bsit 陕西省
bsyy 随机应变
btil 出租汽车
btpt 取长补短
btpy 出版社
btuk 卫生部
btww 联系人
btyx 出生率
bugf 取决于
bvri 了如指掌
bwlg 联合国
bwwf 联合会
bwws 联合体
bxgo 联绵不断
byat 出谋划策
byqy 承认错误
caaa 能工巧匠
cadu 艰苦奋斗
cchh 马马虎虎
ccsk 难能可贵
cdln 马克思
cent 通用性
cfit 参考消息
cfnn 参考书
cfuo 参考资料
cgff 欢天喜地
cgfh 对不起
cgtj 巴不得
cgyy 马列主义
chcg 能上能下
chcg 骑虎难下
cigu ***
ciit 台湾省
cmri 对内搞活
cndg 通情达理
cqcw 难解难分
cqgy 对外开放
cqqj 对外贸易
crfr 欢欣鼓舞
ctfh 对得起
ctnn 通知书
cuym 台北市
cuyu 难道说
cwyt 通俗读物
cycg 能文能武
cypy 通讯社
cyta 参谋长
cywu 能说会道
dayy 百花齐放
dbce 原子能
dbce 太阳能
dbow 破除迷信
dbwn 有限公司
dcaq 丰台区
dcit 奋勇当先
ddoo 兢兢业业
ddpp 确确实实
ddsy 大有可为
ddwg 面面俱到
ddwy 大有作为
ddym 太原市
degf 有助于
dflg 大无畏
dfny 有求必应
dfsa 大规模
dfym 成都市
dgbn 大不了
dgdf 万事大吉
dgdt 奋不顾身
dgiu 太平洋
dgnu 奇形怪状
dgsh 有理想
dgwt 万事俱备
dhah 有目共睹
dhij 大步流星
dhrt 顾此失彼
dhtf 故步自封
dide 有没有
diiy 大洋洲
ditg 大学生
djtr 大显身手
dkfj 大跃进
dkhi 大踏步
dkww 三中全会
dkyx 成品率
dlgn 大力开展
dllx 大力加强
dlnn 大力发展
dlts 胡思乱想
dmin 大同小异
dmis 非同小可
dmya 大幅度
dndw 克己奉公
dnlx 奋发图强
dnyy 感性认识
dpkm 研究员
dppg 研究室
dpqe 丰富多采
dpqk 百家争呜
dprn 研究所
dptg 研究生
dpwf 研究会
dpyf 石家庄
dqly 顾名思义
dqov 大多数
drdy 百年大计
drfl 有气无力
drgr 百折不挠
drry 大失所望
druw 盛气凌人
dsdr 有根有据
dsiu 大西洋
dsst 成本核算
dtdg 有条有理
dtgf 有利于
dtgu 三番五次
dthd 成千上万
dtqd 大自然
duad 有效期
dutf 有道德
duui 矿产资源
duwv 大部分
dwft 大公无私
dwgj 三令五申
dwhh 大体上
dwip 大会堂
dwkk 存储器
dwly 有偿转让
dwqn 大使馆
dwtt 有何特长
dwuy 百货商店
dwxx 百分比
dxtv 有纪律
dyhi 百废具兴
dyny 奇谈怪论
dywf 研讨会
dywx 有文化
eafc 爱劳动
eddt 胸有成竹
eflf 腾云驾雾
egud 用不着
ekpf 脚踏实地
elaf 脑力劳动
elyy 爱国主义
eplg 爱祖国
etdy 服务态度
etip 爱科学
etkm 服务员
etuk 服务部
eutg 妥善处理
ewna 爱人民
farf 南斯拉夫
fbaq 朝阳区
fbyq 喜出望外
fcug 干劲冲天
fcyl 无能为力
fdpg 教研室
fetv 运用自如
ffbi 直截了当
ffdd 零零碎碎
ffee 十二月
ffit 云南省
ffkm 运动员
ffna 土地改革
ffpi 真才实学
ffrm 二进制
ffrm 十进制
fgbu 无理取闹
fgdd 老一套
fgdj 老一辈
fgee 十一月
fgfh 越来越
fghi 进一步
fgxg 地平线
fhbj 赵紫阳
fitx 违法乱纪
fjwf 博览会
fjym 南昌市
fkge 老中青
fklt 无足轻重
fkum 雪中送炭
fock 专业对口
foty 专业知识
fowk 专业人员
fowx 专业化
foyn 专业户
fpfn 无穷无尽
fpgt 求之不得
fpym 南宁市
fqad 无名英雄
fqgm 截然不同
fraf 朝气蓬勃
frfg 无拘无束
frii 喜气洋洋
frrq 趁热打铁
fruy 走后门
frwy 无所作为
fryl 无所谓
fsdt 无可奉告
fsdw 无可奈何
fsdy 无可非议
fsit 吉林省
fsiy 南极洲
fstp 二极管
fsyy 霸权主义
ftgg 无微不至
ftif 专利法
ftlf 动物园
ftnn 教科书
ftnt 规律性
ftov 未知数
ftqn 博物馆
ftsc 专利权
ftyx 增长率
fuaf 埋头苦干
fuaw 埋头工作
fubx 无产阶级
fufr 十六进制
fuft 无产者
fulg 吉普车
fvyy 封建主义
fwfu 十全十美
fwgt 求全责备
fxdl 超级大国
fxfd 无缘无故
fxjn 无线电
fxtv 无纪律
fyft 献计献策
fyuk 教育部
fyvw 无论如何
fyym 南京市
fyyq 教育方针
gaar 不甘落后
ganf 下基层
gapb 不切实际
gayy 形式主义
gbbp 不了了之
gbwd 现阶段
gcgi 不能不
gdbb 一辈子
gdfe 来龙去脉
gdgl 不三不四
gdhi 形而上学
gdnt 正确性
gdwx 表面化
geiw 不胜举
gfaq 不求甚解
gfbt 环境卫生
gffq 不动声色
gffu 天南地北
gfgr 来者不拒
gfov 平均数
gfru 理直气壮
gfuw 责无旁贷
ggbn 来不了
ggey 来不及
gggf 不至于
gghi 下一步
ggpm 不正之风
ggql 刑事犯罪
ggsy 素不相识
ggtt 来来往往
ggwf 理事会
ghbq 一目了然
ghmj 与此同时
ghww 弄虚作假
ghyh 到此为止
giai 开源节流
gifs 不学无术
giit 青海省
gili ***
ginn 政治局
girh 青少年
gith 政治处
giuk 政治部
giym 天津市
giym 武汉市
gjge 一览表
gjrw 平易近人
gjwh 到时候
gjyt 来日方长
gkrn 一口气
glgk 两回事
glgr 一国两制
gmar 歪风邪气
gmmk 不同凡响
gmpf 不败之地
gmty 不由自主
gngu 一心一意
gntg 恶性循环
gonn 不断发展
gpds 不寒而栗
gphh 事实上
gpuy ***
gpwp 天灾人祸
gpyy 列宁主义
gqbp 玩忽职守
grcr 天气预报
grgd 再接再厉
gria 不拘小节
griq 理所当然
grpp 不白之冤
grpt 一技之长
grrr 一把抓
grrw 不择手段
grww 青年人
gsde 互相帮助
gsdy 一概而论
gser 互相爱护
gsgi 不可不
gsgy 不可否认
gshg 不相上下
gsjc 不要紧
gsly 不可思议
gssf 严格要求
gsww 两极分化
gtbn 不得了
gtdx ***
gtey 来得及
gtgd 不管不顾
gtgi 不得不
gtgq 一系列
gtgt 平等互利
gtnt 两重性
gtny 一条心
gtrr 不知所措
gtry 一般的说
gtut 再生产
gtyg 一般说来
gugj 副总理
gugo 到头来
gukk 副产品
gulb 不着边际
gurw 更新换代
guwv 一部分
gvav 一刀切
gwdg 责任感
gwet 副作用
gwgb 来人来函
gwny 责任心
gwrm 责任制
gwtq 平分秋色
gwwx 现代化
gwyf 一分为二
gwyj 两个文明
gwyu 与人为善
gxdm 不约而同
gxrr 青红皂白
gydk 不言而喻
gydm 一方面
gydw 不谋而合
gydw 开诚布公
gyfx 天衣无缝
gyip 一言堂
gylu 五讲四美
gywj 平方公里
hhkk 目瞪口呆
hiym 上海市
hkfw 目中无人
hklg 旧中国
hnvt 上层建筑
hpqh 此之外
hrfb 目的地
hwfy 具体地说
hwyg 具体说来
iait 江苏省
iasu 光荣榜
iauq 举世闻名
ibym 沈阳市
icaa 汗马功劳
iddm 满面春风
idtu 温故知新
iedc 小朋友
ifat 清规戒律
ifdj 满载而归
ifit 河南省
ifit 湖南省
iflc 深圳四通
ifmf 满城风雨
ifqy 海南岛
ifuk 党支部
ifym 济南市
igdt 满不在乎
igff 兴致勃勃
igrg 没事找事
igsu 党政机关
igxg 水平线
iiaq 海淀区
iigx 滔滔不绝
iiib 游泳池
iiit 浙江省
iiiu 汗流浃背
iime 港澳同胞
iiss 清清楚楚
iitg 小学生
iixg 流水线
ijda 光明磊落
ijfw 兴师动众
ijgd 光明正大
ijjr 光明日报
ijuh 水电站
ijwh 小时候
ikmd 党中央
ilwj 赏罚分明
innn 小心翼翼
ipaq 省军区
iroy 滚瓜烂熟
isdo 海枯石烂
isit 江西省
isuo 当机立断
itbu 兴利除弊
itbw 少先队
itdu 法律顾问
itib 深入浅出
itpq 当务之急
ittw 常务委员会
itwf 党委会
itwf 常委会
iuit 河北省
iuit 湖北省
iukk 水产品
iuln 小意思
iutx 没关系
iuul 海关总署
iwtc 没什么
ixkk 消费品
ixli 党纪国法
ixty 汇编程序
ixyy 汇编语言
iyeg 兴高采烈
iyfh 深谋远虑
iysm 洗衣机
jbip 电子学
jdjm 显而易见
jekk 日用品
jfsm 电动机
jgwj 时至今日
jhxe 明目张胆
jjbp 电影院
jjym 昆明市
jjyy 时时刻刻
jjyy 日日夜夜
jkwx 电器化
jlde 坚固耐用
jmfv 暴风雪
jmyn 电风扇
jpck 电视台
jpgt 坚定不移
jpsm 电视机
jpwf 鉴定会
jqgt 日久天长
jrgn 坚持不懈
jrrk 电报挂号
jsgy 归根到底
jssm 照相机
jtdq 明知故犯
jujd 明辨是非
juts 电冰箱
jwfy 电化教育
jwtp 晶体管
jxgn 坚强不屈
jykd ***号码
kaei 口若悬河
kakm ***中央
kbuk 中联部
kbym 贵阳市
kcca 跑马观花
kdgf 别有天地
kgrh 中青年
kgyd 另一方面
kiip 中小学
kirt 顺水推舟
kitg 中学生
kjnd 口是心非
kkkk 叽叽喳喳
kkpp 踏踏实实
klai 中国***
klgy 中国政府
klqt 中国银行
kltr 中国特色的
kmgn 中央政治局
kmjc 中央电视台
kmld 中央办公厅
kmnt 中央书记处
kmpt 中央军委
kmtk 中央委员
kmtt 中央各部委
kmtw 中央委员会
kmwc 中央人民广播电台
kmww 中央全会
knbb 忠心耿耿
knyw 唯心论
kpuk 中宣部
kpwp 听之任之
kqip 哈尔滨
kqiy 哈尔滨市
kqwu 中外合资
ktct 另行通知
ktdy 顺息万变
ktit 呼和浩特
ktpr 另行安排
ktyw 唯物论
kusf 中关村
kwnl 中华民国
kwny 中华民族
kwwl 中华人民共和国
kxtv 中纪委
kxuk 中组部
kyit 贵州省
kyym 唱高调
laog 轻工业
laou 轻工业部
lbuk 国防部
lcwl 四通集团
lcwn 四通公司
ldia 黑龙江
ldji 轻而易举
ldwy 四面八方
lfrp 因地制宜
lfuk 团支部
lgkm 办事员
lgth 办事处
lgwf 默不作声
lgwn 力不从心
lkit 四川省
llfu 默默无闻
llgg 轰轰烈烈
lllx 逻辑思维
llnt 逻辑性
llyy 逻辑设计
lmqh 国内外
lnip 国民党
lnqn 图书馆
lnqu 加以解决
lnxi 国民经济
lptu 国家利益
lpuu 固定资产
lpyq 置之度外
lqry 连锁反应
lrce 力所能及
lrhk 转折点
lrtn 因势利导
lshh 思想上
lsnt 思想性
ltbp 国务院
lttk 国务委员
ltxq 轻重缓急
lwdn 因人而异
lwds 办公厅
lwdt 四人帮
lwgw 四个现代化
lwpf 团体赛
lwpg 办公室
lwqn 软件包
lxti 边缘科学
lyab 国庆节
lynt 国计民生
lyud 国库券
maaa 同甘共苦
madg 内蒙古
mait 山东省
mdhg 岂有此理
mfmt 风雨同舟
mfwu 同志们
mgqs 财政危机
mguk 财政部
mhsm 由此可见
mjnn 邮电局
mjuk 邮电部
mjwf 同盟会
mnfl 同心协力
mnlt 购买力
mnmt 同心同德
mpin 山穷水尽
mqyy 见多识广
mrgo 几年来
msit 山西省
mtid 同等学历
myaq 崇文区
mycy 见义勇为
mymy 风言风语
najg 改邪归正
nbgp 层出不穷
nbnt 局限性
ndsd 情有可原
nfkk 必需品
nfsm 发动机
ngew 以理服人
ngff 惊天动地
nght 眉开眼笑
ngtj 怪不得
nguk 民政部
ngvt 恰到好处
niuk 司法部
niuk 心满意足
njsm 发电机
njwf 展览会
njwt 发明创造
nkdo 心中有数
nkfo 心中无数
nmgq 屡见不鲜
nnfr 惊心动魄
nnkp 发展中国家
nnqr 眉飞色舞
nnsr 恰恰相反
nnyi 习以为常
npgt 心安理得
nqnt 必然性
nqwf 展销会
nrid 发扬光大
nrrn 情报所
nsce 尽可能
nsnt 必要性
nsyt 以权谋私
ntov 已知数
ntwm 以身作则
nuic 民意测验
nunu 尽善尽美
nurd 改头换面
nusm 收音机
nvaw 恰如其分
nvsm 收录机
nwkm 司令员
nyth 书记处
nyww 发言人
oabb 炎黄子孙
ogeo 数不胜数
ogkm 炊事员
ogwx 数理化
ohpb 数目字
ojoi 糊里糊涂
onpq 燃眉之急
opon 精神焕发
orxt 精打细算
oryl 数据库
otbt 业务联系
otgx 精简整编
ouby 断章取义
oufo 精益求精
pbhh 实际上
pcal 宏观世界
pdgm 视而不见
pdkk 突破口
pejk 家用电器
pent 实用性
pgaq 宣武区
pgfj 实事求是
pgfr 完整无缺
pguk 农副产品
pjir 冠冕堂皇
pkyj 家喻户晓
plit 农田水利
pnfr 襟怀坦白
pnqf 突飞猛进
pqdf 突然袭击
pqqr 额外负担
pqyf 农贸市场
prny 之所以
ptit 安徽省
pukk 农产品
pvit 福建省
pwtr 农作物
pwtu 安全生产
pwuk 宣传部
pwwt 社会公德
pwyy 社会主义
pybt 家庭出身
pyym 福州市
qace 多功能
qaqt 多劳多得
qcbn 杀鸡取蛋
qdrt 多面手
qdwf 留有余地
qedy 名胜古迹
qffw 急起直追
qgap 名副其实
qgbn 免不了
qgrm 负责制
qgrw 饥不择食
qirh 多少年
qitg 留学生
qjfp 贸易协定
qjyf 贸易市场
qkst 狭路相逢
qkym 银川市
qmjf 狂风暴雨
qmwn 金山公司
qnws 印刷体
qouc 触类旁通
qqdp 铁饭碗
qqgf 狼狈不堪
qqsc 针锋相对
qqsy 乌鲁木齐
qrgo 多年来
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qtmk 银行帐号
qtqs 多种多样
qtxa 多种经营
quqe 昏头昏脑
quty 独立自主
quuk 外交部
quuk 铁道部
quyt 外部设备
qvdq 迎刃而解
qwdt 争分夺秒
qwnt 独创性
qwpt 销售额
qwxj 饱食终日
qxix 铺张浪费
qxtv 错综复杂
qydm 多方面
qyiu 印度洋
qypl 解放军
qypr 解放军报
qyrg 解放后
qyue 解放前
rabs 按劳取酬
ralg 披荆斩棘
raog 手工业
rauk 后勤部
rawg 反革命
raws 按劳分配
raym 拉萨市
rdgt 打成一片
rdif 打破常规
rdpn 后顾之忧
rdrm 所有制
rdsc 所有权
rdwx 扩大化
rfgo 看起来
rfgy 反过来说
rfir 反动派
rfld 接二连三
rfpg 按规定
rfvf 报刊杂志
rfws 按需分配
rfwx 年老体弱
rfye 扭亏为盈
rgen 拥政爱民
rgfh 看不起
rgnx 看不惯
rgpy 据不完全统计
rgqt 迫不急待
rhyg 按步就班
rieh 热泪盈眶
ripg 描淡写
rjpd 按时完成
rjtg 质量管理
rjyt 打***
rkha 拦路虎
rlww 年轻人
rlwx 年轻化
rmgg 手风琴
rmrg 近几年来
rnet 手忙脚乱
rnke 提心吊胆
rnle 推心置腹
rnln 掉以轻心
rofg 热火朝天
rpfq 操之过急
rplx 年富力强
rpnn 持之以恒
rpwn 拥军优属
rqck 气象台
rqdt 气象万千
rqgj 拾金不昧
rqrn 托儿所
rqsm 打印机
rqyy 换句话说
rrge 措手不及
rrgo 近年来
rrii 气势汹汹
rrkk 手舞足蹈
rrsm 拖拉机
rrta 欣欣向荣
rryu 挑拨离间
rsbb 看样子
rskm 技术员
rsui 拉丁美洲
rtdb 挺身而出
rtft 所向无敌
rtnt 扬长避短
rtrg 拨乱反正
rtrn 招待所
rtyi 报告文学
rufd 抛头露面
rujg 年产量
rumi 气壮山河
rupx 拼音字母
rutx 拉关系
rwet 反作用
rwkm 操作员
rwry 所作所为
rwtn 损人利己
rwtx 操作系统
rwuj 提货单
rxdw 后继有人
ryaa 瓜熟蒂落
ryaj 按计划
ryrq 拐弯抹角
saou 核工业部
sawp 株式会社
sawt 歌功颂德
saxn 本世纪
scdy 相对而言
scnt 可能性
scyu 相对误差
sfaq 西城区
sfud 标志着
sgjg 要不是
sgqd 要不然
sgsv 要不要
sgtj 要不得
shtk 标点符号
sial 根深蒂固
siqd 想当然
skww 机器人
sntg 酌情处理
souk 林业部
spym 西安市
spym 西宁市
sruy 相提并论
sryn 本报讯
ssdt 可想而知
ssgt 格格不入
ssna 机构改革
sswx 机械化
stfu 横行霸道
stnt 可行性
sttu 权衡利弊
sugf 西半球
suun 标新立异
suwr 标准件
suwu 本单位
suwx 标准化
sxpg 相比之下
sylp 西方国家
syyi 想方设法
syym 杭州市
tats 各式各样
tddn 千百万
tdgp 秘而不宣
tdgt 生态平衡
tdng 自古以来
tdpa 各大军区
tdrm 私有制
tduk 科研部
tduo 第三产业
tdym 长春市
teyx 利用率
tfdd 千真万确
tffn 第十二届
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tfii 生动活泼
tfrr 自动控制
tfsf 自动检索
tfsi 自动检测
tftu 长远利益
tfwf 奥运会
tfwx 自动化
tfyy 各地方
tgaf 行政区域
tgat 和平共处
tgau 航天工业部
tgdh 自下而上
tgku 微不足道
tgmn 身不由己
tgsf 翻来覆去
tgsm 微型机
tgtf 翻天复地
tgto 翻一番
tgwr 得不偿失
tgwx 系列化
thdg 自上而下
thsr 刮目相看
thyn 先睹为快
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tibp 科学院
tidq 积少成多
tihh 生活上
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tirs 科学技术
tiym 长沙市
tjoi 稀里糊涂
tjpt 千里之行
tjty 每时每刻
tkta 委员长
tkwf 委员会
tlgn 智力开发
tlgt 自力更生
tmpj 先见之明
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tnta 秘书长
tnwy 身心健康
togr 待业青年
tpdu 行之有效
tqdo 千锤百炼
tqef 自负盈亏
tqgn 千钧一发
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tqsm 复印机
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trff 生气勃勃
trng 科技司
trnt 选择性
tsdh 适可而止
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tsnt 积极性
ttag 各行其事
ttcr 敌我矛盾
ttdc 自告奋勇
ttgs 微处理机
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ttnn 税务局
ttsu 怎么样
ttto 各行各业
ttts 各种各样
ttws 德智体
ttyg 各自为政
tudx 千头万绪
tufr 垂头丧气
tult 生产力
tuny 自尊心
turh 向前看
tutn 彻头彻尾
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tuuy 各部门
tuwu 各单位
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tuyx 生产率
tvgx 自始至终
twgh 条件下
twlt 生命力
twlt 身体力行
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twpb 繁体字
twrn 先人后己
twrt 待人接物
twrt 条件反射
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txit 各级党委
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txwn 各级领导
tydm 各方面
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tyya ***
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uafw 旁若无人
ualn 奖勤罚懒
uawf 总工会
ubwy 新陈代谢
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ucuk 交通部
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udkk 半成品
udyp 总而言之
uerq 亲爱的
ufjf 背地里
ufvf 半封建
ugiu 总政治部
ugjg 并不是
ugqq 差不多
uhhk 着眼点
uijn 交流电
uitt 逆水行舟
ujad 新时期
ujpg 阅览室
ukgk 美中不足
ukhk 立足点
uklg 新中国
ukud 意味着
ulgd 半边天
ulrj 前因后果
ulyc 并驾齐驱
ulyy 帝国主义
umdf 闻风而动
unfn 问心无愧
ungr 首屈一指
unwl 竭尽全力
unws 半导体
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uoyq 养精畜锐
upfu 亲密无间
upnt 兼容性
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urfd 前所未有
urfu 前所未闻
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ursy 新技术
uryg 总的说来
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utgt 新生事物
uuaa 辛辛苦苦
uubx 资产阶级
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walw 全世界
wawd 人工合成
wawq 任劳任怨
wbpl 保卫祖国
wcwg 从难从严
wdgg 八面玲珑
wdgl 低三下四
wdgw 从古到今
wdjk 集成电路
wdrm 公有制
weww 使用价值
weym 合肥市
wfii 人才济济
wfnt 优越性
wfrm 八进制
wfww 何去何从
wglf 代表团
wgqn 领事馆
wgtj 舍不得
wguk 人武部
wgwx 合理化
wgyf 化整为零
wgyf 供不应求
wiem 贪污受贿
wigu 停滞不前
wimw 分水岭
wisu 合法权益
wiup 贪污盗窃
wiwl 全党全军和全国
wjdd 似是而非
wkao 食品工业
wlnf 全力以赴
wlth ***处
wlyu 集思广益
wmys 分崩离析
wnaf 人尽其才
wnfw 舍己救人
wnjr 人民日报
wntm 人民币
wnwg 合情合理
wnwu 全心全意
wnww 人民代表大会
wnyw 舍己为人
wpgr 从容不迫
wpnn 公安局
wptn 人之长情
wpuk 公安部
wpxi 全神贯注
wqnt 偶然性
wqtd 你争我夺
wquk 俱乐部
wrmt 众所周知
wsfv 人杰地灵
wsth 售票处
wtcm 人生观
wtic 货币流通
wtjg 信息量
wtlt 货币回笼
wtnq 分秒必争
wtnt 创造性
wtsu 什么样
wttg 信息处理
wtwg 例行公事
wtww 候选人
wtyy 从长计议
wurq 分道扬镳
wwcf 仅供参考
wwgy 念念不忘
wwkm 售货员
wwpe 贪便宜
wwqn 公使馆
wwrq 他们的
wwwx 合作化
wwyj 任人为贤
wwyj 催化剂
wwyn 个体户
wwyt 化公为私
wxww 介绍人
wxwy 介绍信
wyff 体育运动
wyfn 体育场
wyqj 集市贸易
wyqn 体育馆
wyqo 体育锻炼
wysl 人言可畏
wytu 价廉物美
xcwx 绝对化
xdlt 强有力
xdqo 绝大多数
xduw 绝大部分
xfrp 编者按
xhrs 综上所述
xist 经济核算
xiuu 经济效益
xkyx 费品率
xluk 编辑部
xnya 引以为戒
xqlf 幼儿园
xtfh 经得起
xtnt 纪律性
xtrt 贯彻执行
xtud 统筹兼顾
xwdr 纪念碑
xwih 引人注目
xwkk 纪念品
xxaw 继续革命
xxgf 纹丝不动
xxhh 组织上
xxkk 纺织品
xxnt 组织性
xxsm 缝纫机
xxuk 组织部
xyge 统计表
yagf 为期不远
yait 广东省
yant 计划性
ydqq 座右铭
ydtl 望而生畏
ydyx 误码率
yelt 说服力
yeti 应用科学
yfnt 主动性
yfsc 主动权
yfsi 旗鼓相当
yfwt 市场信息
yfxu 毫无疑问
yfya 市场调节
ygff 说不过去
yggf 说一不二
yggo 说不来
ygpg 说不定
ygpx 刻不容缓
ygte 旗开得胜
yhfh 高瞻远瞩
yhfk 高瞻远嘱
yifa 方兴未艾
yint 谨小慎微
yirb 文汇报
yjnn 说明书
yjpe 文明礼貌
yjud 良师益友
yjwh 这时候
yjyu 就是说
ynfl 齐心协力
yngu 诗情画意
ynlt 记忆力
ynxj 夜以继日
ynyu 诚心诚意
ypdg 言之有理
ypyw 废寝忘食
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yqdg 试金石
yrlg 摩托车
yrwy 为所欲为
ysdl 主要原因
ysdp 调查研究
ysuk 高档商品
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yswk 主要人员
ytbs 高等院校
ythw 误入歧途
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ytkn 计算中心
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ytxj 房租费
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ywpk 文化宫
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ywuk 文化部
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