掌握合成双链cDNA的RLM-RACE技术可构建高質量的cDNA文库。

1. MDF-192型超低温冰箱日本三洋电机株式会社；

13. XK96-B微型旋涡混合仪，江苏省姜堰市新康仪器厂

以反转录第一链cDNA为模板，按以下组分建立PCR反应体系：

充分混匀，按以下程序进行PCR扩增：95℃热变性2 min迅速加入高保真酶，再94℃变性2 min进入循环94℃变性30 秒，65℃退火30秒68℃延伸2 min，25個循环后于68℃继续延伸10 min扩增产物以琼脂糖凝胶电泳检测，置于-20℃保存备用